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11.
12.
用免疫荧光单克隆抗体对脊髓灰质炎病毒抗原表位的分析 总被引:1,自引:0,他引:1
用间接免疫荧光与中和试验筛选出来的抗脊髓灰质炎2型与3型不同毒株的12个单克隆抗体,其中3个仅有免疫荧光活性,9个具有中和与免疫荧光活性。用免疫荧光活性的单克隆抗体进行试验,发现它们在识别特异性抗原表位方面与中和性单克隆抗体相似,显示出株特异的、几个毒株共同特异的或型特异的抗原表位。根据表位分布关系及特征,可以用来鉴别型内毒株的特征、毒株的抗原分析、抗原变异的研究以及疫苗相关病例的鉴别。所得结果与中和性单克抗隆抗体及T1-寡核苷酸指纹图谱分析一致。而免疫荧光单克隆抗体识别抗原表位的活性范围比中和性单克隆抗体更广。另外还发现某些兼有荧光与中和两活性的同一个单克隆抗体,用不同方法(IF与NT)进行试验时,与相同毒株出现不同表位反应,这点是值得引起注意需待进一步证实的重要问题。 相似文献
13.
应用梯度离心和超速离心浓缩获得部分提纯的病毒制剂,产量约为7.45g/kg病叶提纯的病毒制剂的紫外吸收曲线呈典型的核蛋白吸收曲线,OD260/OD242和OD260/OD280的比值分别为1.24和1.38。病毒粒子呈线状,宽13—14nm,长度主要分布于250—300nm和550—700nm之间,1000nm以上的粒子也有检到。病毒外壳蛋白仅由一个分子量约为30Kd的亚基组成。在免疫电镜试验中、病毒粒子与日本WYMV抗血清发生强烈的血清学反应。新鲜病叶的超薄切片中可看到大量风轮体和膜状体。 相似文献
14.
利用PCR方法对单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D(HSV-2gD)基因进行了修饰,在其5'端删去约500bp的非编码区,仅保留ATG上游7个bp。将修饰后的HSV-2gD基因插入到带有痘苗病毒天坛株TK基因区段的痘苗表达质粒pJSA1175,置于痘苗病毒P7.5k早/晚期启动子控制下。将此重组质粒用脂质体Lipofectin方法转染已受野型TK ̄+痘苗病毒天坛株感染的TK ̄-143细胞,通过同源重组机制和标志基因LacZ产物的蓝斑显色作用,以及BudR试剂对TK表型的选择压力,筛选出整合有HSV-2gD基因的重组痘苗病毒。Southem杂交表明,HSV-2gD基因已正确地插入痘苗病毒TK基因区内;间接免疫荧光检测显示,HSV-2gD蛋白已得到有效表达,且主要分布于细胞膜。重组病毒免疫家兔可产生明显的抗HSV-2gD中和抗体。用重组病毒免疫小鼠,3周后可使94%(17/18)的小鼠对抗HSV-2的致死量攻击,表明重组病毒具有明显的免疫保护作用。 相似文献
15.
He-Ne和CO2激光对茶树花药培养的药裂率和出愈率的影响,既有促进作用,也有抑制作用。按出愈率和愈伤组织生长状况的序列:He-Ne:20J/cm^2〉CK〉He-Ne:30J/cm^2〉CO2:35.4J/cm^2。对He-Ne激光照射花药及其愈伤组织的过氧化物酶同工酶分析,主要表现在弱酶带的变化上,无规律差异。 相似文献
16.
17.
As an adjunct to existing thin layer and column chromatographic methods for the identification of glycolipids a method that utilizes the high pH anion chromatographic (HPAEC) analysis of the oligosaccharides released from the glycolipids by endoglycoceramidase has been developed. Using a Dionex Carbo Pak PA1 column and elution with a linear gradient of sodium acetate in 0.2M NaOH, the elution times of eight neutral and fourteen acidic oligosaccharides derived from glycolipids were determined. Under these conditions the neutral oligosaccharides were well separated from each other but some of the acidic oligosaccharides had overlapping elution times. The ganglioside-derived oligosaccharides could be further identified by treating them with sialidase or by mild acid hydrolysis and reanalysing the products by HPAEC. The method was applied to the analysis of mixed bovine brain gangliosides. The procedure provides an additional approach for the initial identification of glycolipids by analysing the component oligosaccharides rather than the intact glycolipids. 相似文献
18.
抗鞘翅目δ-内毒素
及毒素基因文库的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了对鞘翅目昆虫有毒效的5个苏云金芽孢杆菌新菌株YM-03、Sph04-04、YK14-01、SH11-05、Sph16-01伴孢晶体的蛋白质组成,以柳蓝叶甲为供试虫测定了它们的LC_(50)值,其中YM-03毒力最高。测定了YM-03晶体蛋白N-末端部分氨基酸序列。用琼脂糖凝胶电泳快速检测了5株菌的质粒组成,证明其质粒图型各不相同。以广谱的cosmid质粒pLAFRI为载体,通过限制酶EcoRI部分酶解获得“目的”DNA片段,构建了菌株YM-03的总DNA文库,对17个抗性克隆的质粒进行酶切分析表明,其中含有外源片段的克隆占总数的76%,超过要求的理论值。以人工合成的杀鞘翅目基因的18bp保守序列片段为探针,筛选了近1200个抗性克隆,获得了3个阳性克隆,LE392(PBYM2)、LE392(pBYM3)和LE392(pBYM4),毒力测定试验表明LE392(pBYM3)和LE392(pBYM4)有一定表达,表明其携带有δ-内毒素基因。 相似文献
19.
5mg/L—10mg/L的茶碱在0℃─10℃变温条件下诱导野生毛尖蘑形成了实体原基。分析证明,此条件下毛尖蘑菌丝体呼吸强度提高,体内可溶性蛋白质增加,而DNA与RNA总量却稍有下降之势。本研究为珍品毛尖蘑人工驯化做了先导性工作。 相似文献
20.