| 表达HSV－2 gD基因的重组痘苗病毒保护小鼠对抗致死量HSV病霉攻击 |
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| 引用本文： | 容敏清,阎辉,阮力,侯云德,何南祥,朱既明.表达HSV－2 gD基因的重组痘苗病毒保护小鼠对抗致死量HSV病霉攻击[J].病毒学报,1995(3). |
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| 作者姓名： | 容敏清 阎辉 阮力 侯云德 何南祥 朱既明 |
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| 作者单位： | 中国预防医学科学院病毒学研究所，北京病毒基因工程国家重点实验室，浙江医科大学传染病研究所 |
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| 摘 要： | 利用ＰＣＲ方法对单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白Ｄ（ＨＳＶ－２ｇＤ）基因进行了修饰，在其５＇端删去约５００ｂｐ的非编码区，仅保留ＡＴＧ上游７个ｂｐ。将修饰后的ＨＳＶ－２ｇＤ基因插入到带有痘苗病毒天坛株ＴＫ基因区段的痘苗表达质粒ｐＪＳＡ１１７５，置于痘苗病毒Ｐ７．５ｋ早／晚期启动子控制下。将此重组质粒用脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法转染已受野型ＴＫ￣＋痘苗病毒天坛株感染的ＴＫ￣－１４３细胞，通过同源重组机制和标志基因ＬａｃＺ产物的蓝斑显色作用，以及ＢｕｄＲ试剂对ＴＫ表型的选择压力，筛选出整合有ＨＳＶ－２ｇＤ基因的重组痘苗病毒。Ｓｏｕｔｈｅｍ杂交表明，ＨＳＶ－２ｇＤ基因已正确地插入痘苗病毒ＴＫ基因区内；间接免疫荧光检测显示，ＨＳＶ－２ｇＤ蛋白已得到有效表达，且主要分布于细胞膜。重组病毒免疫家兔可产生明显的抗ＨＳＶ－２ｇＤ中和抗体。用重组病毒免疫小鼠，３周后可使９４％（１７／１８）的小鼠对抗ＨＳＶ－２的致死量攻击，表明重组病毒具有明显的免疫保护作用。
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| 关 键 词： | 单纯疱疹病毒，疫苗，痘苗病毒载体，聚合酶链反应，基因工程 |
RECOMBINANT VIRUS EXPRESSING PCR-MODIED HSV-2gD GENE PROTECT MICE AGAINST LETHAL HSV-2 CHALLENGE |
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| Rong Minqing Yan Hui Ruan Li Hou Yunde He Nanxiang,Zhu Jiming.RECOMBINANT VIRUS EXPRESSING PCR-MODIED HSV-2gD GENE PROTECT MICE AGAINST LETHAL HSV-2 CHALLENGE[J].Chinese Journal of Virology,1995(3). |
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| Authors: | Rong Minqing Yan Hui Ruan Li Hou Yunde He Nanxiang Zhu Jiming |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Herpes simplex virus Vaccine Vaccinia virus vector Polymerase chain reaction Genetic engineering Institute of Infectious Diseases |
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