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141.
142.
B C Locke J M MacInnis S Qian J I Gordon E Li G R Fleming N C Yang 《Biochemistry》1992,31(8):2376-2383
Rat intestinal cellular retinol binding protein II (CRBP II) is an abundant 134-residue protein that binds all-trans-retinol which contains 4 tryptophans in positions 9, 89, 107, and 110. Our ability to express CRBP II in Escherichia coli and to construct individual tryptophan substitution mutants by site-directed mutagenesis has provided a useful model system for studying the fluorescence of a multi-tryptophan protein. Each of the four mutant proteins binds all-trans-retinol with high affinity, although their affinities are less than that of the wild-type protein. Steady-state and time-resolved fluorescence analyses of these proteins indicate that W107 is at the hydrophobic binding site, W110 is in a polar environment, and the remaining two tryptophans are in a hydrophobic environment. Time-resolved fluorescence study indicates that excited-state energy transfer occurs from the hydrophobic tryptophans to W110. The Stern-Volmer analysis with acrylamide of these proteins reveals that static quenching occurs in the W9F mutant protein while others do not. The fluorescence of rat intestinal fatty acid binding protein (I-FABP), a related protein of known X-ray structure, was also studied for comparison. The results of these findings, coupled with those derived from NMR studies and molecular graphics, suggest that CRBP II undergoes minor structural changes in all of the mutant proteins. Since these effects may be cumulative on the protein structure and function, any conclusions derived from higher mutants in this family of proteins must be treated with caution. 相似文献
143.
西北产6种药用柴胡营养器官的比较解剖学研究 总被引:6,自引:0,他引:6
柴胡是伞形科柴胡属植物,据报道,全世界有150种左右,主要分布在北半球及亚热带地区,初步统计我国有30余种。据我们在西北五省调查,药用种类有21种之多,药用主流种类有柴胡Bupleurum chinesis DC.、狭叶柴胡B. scorzonerifolium Willd.、银州柴胡B. yinchowense Shan et Y. Li、小叶黑柴胡B. smithii Wolff. var. parvi- 相似文献
144.
Expression of the human retinoblastoma gene product pp110RB in insect cells using the baculovirus system 总被引:4,自引:0,他引:4
The product of the retinoblastoma susceptibility gene (RB) was overproduced in cultured insect cells using the baculovirus expression system. Upon insertion of the cloned human RB complementary DNA sequence into the viral genome downstream of the promoter of the polyhedrin gene, full-length RB protein with an apparent molecular weight of 110,000 was expressed in the insect cells. This protein was found to be phosphorylated, located in the nuclei of the infected cells, and immunologically indistinguishable from pp110RB of human cells as assayed by several anti-RB antibodies. Following cell disruption and a one-step immunoaffinity chromatographic purification, 6-12 mg of soluble pp110RB with approximately 95% purity were obtained per liter of infected suspension culture. Characterization of the two known biochemical properties of RB protein showed that this purified protein from insect cells behaved similarly to the authentic human pp110RB. First, it bound to DNA, and second, it could form a specific complex with SV40 T antigen in vitro. Prompt translocation of the protein from cytoplasm to nucleus after microinjection further indicated that the purified RB protein may be active. The availability of soluble, intact, and presumably active pp110RB in large quantity represents a significant advance for studying the biochemical and biophysical properties of the RB gene product as well as its potential biological function in cancer suppression. 相似文献
145.
萝卜离体子叶衰老与膜脂过氧化的关系 总被引:10,自引:0,他引:10
萝卜离体子叶在光下或暗中衰老及激素调节衰老过程中,作为叶片衰老指标的叶绿素和蛋白质含量的降低,发生在MDA含量增高之前,更早于SOD活性的下降。表明由SOD活性降低所导致的膜脂过氧化的增强,并非衰老的原初反应,而是叶片衰老到一定程度的生理变化。因此,至少在萝卜离体子叶上,不能将其衰老的启动归因于受SOD控制的膜脂过氧化作用导致的膜累积性质变。 相似文献
146.
表皮生长因子对培养的气道上皮细胞抗臭氧损伤的保护作用 总被引:10,自引:2,他引:8
本研究观察到臭氧(O3)对体外培养经3H-UdR标记的免气道上皮细胞有明显细胞毒性作用,且损伤程度与O3作用时间呈正相关。O3暴露组细胞内丙二醛(MDA)产生增多(P<0.01),提示O3损伤细胞的机制与胞膜脂质过氧化有关。表皮生长因子(EGF)可明显降低O3所致的3H释放率(P<0.01)、降低O3的细胞毒指数及细胞内MDA含量(P<0.01),证明EGF对气道上皮细胞有保护作用。进一步还观察到浓度为5ng/ml的EOF可以取消O3所引起的细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)含量降低(P<0.01),并增加细胞内谷胱甘肽总含量(P<0.05),但不能改变O3所致的氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量的增加(P>0.05),对GSH/GSSG比值也无明显提高,这些都提示EGF的细胞保护机理可能与其促进细胞内谷胱甘肽合成有关,而对GSSG转化为GSH的还原过程影响不明显。 相似文献
147.
两组不同月龄小鼠学习记忆能力与脑突触体内游离[Ca^2+]i的相关性 总被引:10,自引:0,他引:10
本文采用Y-迷宫和一次被动回避反应模型,观察了1,6月龄小鼠的学习记忆行为,并运用Ca~(2+)的荧光探针和AR-CM-MIC阳离子测定系统,检测了两组小鼠四个主要脑区(海马、皮层、小脑、中脑四叠体)突触体内游离钙离子浓度([Ca~(2+)]_i)的变化。结果表明随着年龄的增长,小鼠的分辨学习及记忆能力均下降,同时海马突触体内游离[Ca~(2+)]_i升高显著。 相似文献
148.
钙荧光探剂的研究及其在生命科学中的应用 总被引:8,自引:0,他引:8
钙荧光探剂测量活细胞胞浆游离Ca2+浓度的方法在钙研究中已成为一种越来越重要的技术。特别是由于新的一代荧光探剂的合成和激光共聚焦显微镜的发展,使其应用更加广泛。由于国内使用这种技术的实验室逐渐增多,本文将系统介绍钙荧光探剂的发展、测量原理和方法、新的常用钙荧光探剂的比较及其在生命科学中的应用。 相似文献
149.
心率与血压的变异性:分析方法,生理意义及其应用 总被引:19,自引:0,他引:19
本文回顾了关心回顾变异性及血压变异性的最新进展。在分析方法方面介绍了单一生理变量多变量系统的线性分析技术及其主要结果。对HRV/BPV谱的生理意义及其应用问题,也进行了回顾了评述。 相似文献
150.
五种野生稻叶绿体DNA多态性研究 总被引:7,自引:0,他引:7
对野生稻 5个种的18个材料的叶绿体DNA(cpDNA)进行了EcoRI的RFLP分析。
结果显示,共有10种酶切模式,不同种野生稻的cpDNA的RFLP类型都不同,而且在其中一些
种内也有变化,尤以O.rufipogon的种内多态性最为显著,并主要与地理来源有关。本研究还在O.punctata的材料中发现一种以往的分析都不曾描述过的多态性模式。通过对结果的分析,探讨了不同种类野生稻的叶绿体基因组之间以及它们与核基因组之间的进化关系。
Abstract:The polymorphisms of chloroplast DNA from 18 materials of 5 wild rice species were investigated using RFLP analysis.10 restriction patterns were obtained from the analysis of these materials.Different species had different of its RFLP patterns chloroplast DNA,and the polymorphisms existed even with species,especially in O.rufipogon varieties of different geographical origins.In O.punctata a new type of rice chloroplast DNA restriction pattern was discovered which had not been reported before.According to the results obtained,the evolutionary relationships among chlorplast genomes,and between chloroplast and nuclear genomes in different wild rice are discussed. 相似文献