口蹄疫病毒入侵宿主细胞研究进展

口蹄疫病毒(FMDV)是小RNA病毒科,口蹄疫病毒属的典型成员,是一种基因组大约含有8 400个核苷酸的无囊膜单股正链RNA病毒。大量研究发现识别细胞表面受体并侵入细胞是FMDV感染宿主细胞非常重要的环节;对FMDV而言,利用哪种受体就决定了利用哪种內吞路径。近年来在口蹄疫病毒入侵宿主细胞方面进行了大量研究,在一定程度上解释了口蹄疫病毒感染机制方面的问题,为解决实际生产问题提供了重要依据。对前期工作进行阶段性总结,为后期深入研究口蹄疫病毒致病机制和探索更有效的防治措施提供参考。     

Elementary Flux Mode Analysis Revealed Cyclization Pathway as a Powerful Way for NADPH Regeneration of Central Carbon Metabolism

NADPH regeneration capacity is attracting growing research attention due to its important role in resisting oxidative stress. Besides, NADPH availability has been regarded as a limiting factor in production of industrially valuable compounds. The central carbon metabolism carries the carbon skeleton flux supporting the operation of NADPH-regenerating enzyme and offers flexibility in coping with NADPH demand for varied intracellular environment. To acquire an insightful understanding of its NADPH regeneration capacity, the elementary mode method was employed to compute all elementary flux modes (EFMs) of a network representative of central carbon metabolism. Based on the metabolic flux distributions of these modes, a cluster analysis of EFMs with high NADPH regeneration rate was conducted using the self-organizing map clustering algorithm. The clustering results were used to study the relationship between the flux of total NADPH regeneration and the flux in each NADPH producing enzyme. The results identified several reaction combinations supporting high NADPH regeneration, which are proven to be feasible in cells via thermodynamic analysis and coincident with a great deal of previous experimental report. Meanwhile, the reaction combinations showed some common characteristics: there were one or two decarboxylation oxidation reactions in the combinations that produced NADPH and the combination constitution included certain gluconeogenesis pathways. These findings suggested cyclization pathways as a powerful way for NADPH regeneration capacity of bacterial central carbon metabolism.     

海洋细菌Agarivorans sp.HZ105的琼胶降解酶系

通过克隆得到菌株Agarivorans sp.HZ105中3个琼胶酶基因,长度分别为2 988 bp、1 437 bp和1 362 bp,分别编码琼胶酶HZ1、HZ3和HZ4,分别属于糖苷水解酶GH50、GH118和GH16家族。将这些琼胶酶基因与质粒p ET-32(a)构建重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),实现了琼胶酶基因的重组原核表达,制备了重组酶,研究了琼胶酶的酶解产物。琼胶酶HZ1降解琼脂糖以及高聚合度新琼寡糖(聚合度为8、10、12和14)得到新琼二糖和新琼四糖;琼胶酶HZ3降解琼脂糖的终产物是高聚合度新琼寡糖;琼胶酶HZ4降解琼脂糖和高聚合度新琼寡糖为新琼四糖和新琼六糖。因此推测菌株HZ105主要先用琼胶酶HZ3和HZ4降解琼脂糖为较高聚合度的新琼寡糖,随后这些寡糖被琼胶酶HZ1和HZ2(课题组先前报道的另一个琼胶酶)降解为低聚合度新琼寡糖。首次研究报道了Agarivorans属中能产生4个琼胶酶的细菌菌株及其琼胶降解酶系,丰富了有关细菌降解琼胶酶体系及其中各琼胶酶作用的研究和认识,也有利于菌株HZ105琼胶酶的有效开发应用。     

亚成体大熊猫肠道真菌多样性

【目的】分析5只亚成体大熊猫肠道真菌的多样性。【方法】采用基于ITS基因的RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)方法,对肠道真菌总DNA进行ITS-RFLP分析,构建ITS克隆文库,然后用HhaI、HaeIII进行酶切指纹图谱分析,测序并绘制系统进化树。【结果】研究表明,5只亚成体大熊猫肠道真菌主要由Ascomycota(平均占46.24%)、Basidiomycota(平均占15.79%)2个门和一些未分类(平均占29.14%)、未培养(平均占8.83%)的真菌。其中,Ascomycota主要以Saccharomycetes(平均占63.74%)和Dothideomycetes(平均占35.91%)2个纲为主;Basidiomycota主要以Tremellomycetes(平均占65.80%)和Microbotryomycetes(平均占33.15%)2个纲为主。而这4个纲分别则主要以Candida、Debaryomyces;Pleosporales、Myriangium;Cystofilobasidium、Trichosporon;Leucosporidium、Leucosporidiella八个菌属为主,各样品中所占比例不等。【结论】亚成体大熊猫肠道内存在一定比例的真菌菌群,且ITS-RFLP技术能够很好地对其多样性进行分析。真菌的发现扩大了我们对大熊猫肠道微生物结构的了解,同时也有助于我们进一步研究真菌能否帮助大熊猫消化高纤维素食物。     

中缅树鼩消化道长度和重量变化

为探讨栖息于昆明禄劝地区中缅树鼩(Tupaia belangeri)的消化道特征与环境之间的适应关系,在2008年6月和12月(夏季和冬季)分别对自然环境中缅树鼩的胃、小肠、大肠、盲肠的长度、含内容物重、去内容物重、干组织重等消化道指标进行了测定。结果表明,中缅树鼩消化道特征冬季和夏季存在变化,随着温度降低、食物质量下降,中缅树鼩的小肠长度和重量增加;各器官重量均在冬季最大;中缅树鼩在受到低温、食物质量下降等因子胁迫下,通过调节消化道长度和重量来满足能量需求的增加,维持正常的生理机能。中缅树鼩的消化道在冬季和夏季中表现出的变化模式及消化对策对其在自然环境中的生存是至关重要的。     

海洋真菌产油脂中DHA含量的准确快速测定

选用DB-23毛细管色谱柱,设置合适的载气压力,采用气相色谱(GC)分析了海洋真菌中脂肪酸的组成,并对二十二碳六烯酸(DHA)进行了定量分析。测定结果表明:能有效分离37种脂肪酸,分析时间仅需20min,DHA的回收率为96.95%～100.22%,相对标准偏差为1.33%,海洋真菌中DHA的含量为365.78mg/g,相对标准偏差为2.54%。     

囊肿去顶减压术是否改善肾功能的动物实验研究

目的:通过模型加压兔子肾脏,监测加压前后肾功能变化,论证压力对肾功能的影响,根据实验结果给多囊肾临床治疗提供借鉴。方法:将成年新西兰兔随机分为三组(A,B,C),A组兔子切除一侧肾脏,另一侧肾脏通过模型固定圆形气泡予肾脏加压;B组兔子切除一侧肾脏,另一侧肾脏通过模型固定塑料圆球予肾脏加压;C组兔子切除一侧肾脏,另一侧肾脏不予加压处理。分别监测实验组和对照组兔子术前术后肾功的变化(血肌酐、尿素)。对不同加压肾脏标本进行HE、masson和六氨银染色,了解肾脏加压后的病理改变。结果:实验组A行加压术后肾功相对术前与对照组C相比无明显差异;实验组B行加压术后,肌酐、尿素升高明显,与术前、实验组A、对照组C比较均有明显差异(P<0.01)。实验组C一侧肾切除后相比术前肾功能无明显差异。病理示:肾脏加压后,肾小球、肾小管、肾血管继发一系列损害肾功的病理改变。结论:对肾脏施加的压力足够大的时候,压力致使肾脏发生相应病理改变,肌酐、尿素升高,肾功能明显下降。因此传统的囊肿去顶减压术,仍是有意义的对症治疗手段。     

獾油促进深Ⅱ度烫伤小鼠创面愈合作用的研究

目的:检测獾油对小鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合的促进作用.方法:制备小鼠深Ⅱ度烫伤模型,分为烫伤对照组(A组)、植物油治疗组(B组)和獾油治疗组(C组).创面依次用生理盐水纱布、植物油纱布、獾油纱布覆盖.无菌纱布包扎固定,每日换药一次.于伤后7天、10天、15天按照Nagelschmidt法观察并记录创面愈合面积,计算创面愈合率;取创面组织,制成石蜡切片,观察病理及组织形态学变化.结果:獾油能加速烫伤创面的再上皮化,促进创面的愈合;提高烫伤组织细胞的增殖活性;促进烫伤创面表皮干细胞的增殖分化.结论:獾油对深Ⅱ度烫伤创面愈合有促进作用