高效的酵母完整细胞转化法

以穿梭质粒PYES2转化酿酒酵母H158,用二硫苏糖醇（DTT）和处理酵母细胞,变性单链鱼精DNA（ssDNA）为质粒DNA的携带体;转化率比普通酵母完整细胞转化法提高200倍,可达8．3×104个转化子/μg质粒DNA。     

小麦G—型细胞质雄性不育的育性恢复因子Rf3的研究：Ⅱ.总体DNA构建提…

分别用Ｐｓｔ,Ｉ,Ｈｉｎｄ,Ⅲ和ＥｃｏＲ,Ｉ三种限制性内切核酸酶切割提菲菲维小麦基因组ＤＮＡ,再与用相应酶处理的载体ｐＵＣ１１９连接,然后转化到大肠杆菌菌系ＤＨ５α之中。转化效率为１．２×２１０＾４／μｇ。经α互补检测,初步筛选重组子。随机挑取单菌落分别培养,提取质粒,经琼脂糖凝电泳和斑点杂交,最后确定重组子,重组率为４３．８％。粗略地估计了克隆片段在基因组中的拷贝数。     

短小芽孢杆菌碱性蛋白酶BP的纯化和性质

短小芽孢杆菌产生的碱性蛋白酶BP经CM—Sephadex-C-50和Sephadex-G75两个柱层析,得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的酶组分,比活力从1307μ/mg提高到5538μ/mg.活力回收为21%,酶水解酪蛋白的最适反应温度为50℃,最适pH为9.5,Mn^2+、Ca^2+对酶有激活作用,Hg2+、Ag^+对酶有抑制作用.酶的热稳定性不高,但在Ca^2+保护下,热稳定性明显提高.酶的最适作用底物为酪蛋白,对血红蛋白、蛇毒蛋白、牛血清蛋白、卵蛋白、核糖核酸酶也有水解作用.对酪蛋白的Km为0.62%,V_max为50μg/min.DFP可完全抑制酶活性,PMSF和NBS也严重抑制酶活力,PCMB、_o-PTH和EDTA几乎不抑制酶活力.纯酶的分子量为25000Dal.该酶蛋白含有17种氨基酸,其中甘氨酸(Gly)和丙氨酸(Ala)为主要氨基酸.     

乳链菌肽产生菌的定向筛选及发酵产物的鉴定

利用乳链菌肽产生菌中nip^+nis^rsuc^+紧密连锁的原理,在添加乳链菌肽、蔗糖及溴甲酚紫的选择培养基上,从牛奶样品中定向筛选乳链菌肽产生菌。对筛选到的L. lactis1409菌株发酵产物的分析鉴定结果揭示:该产物对多种革兰氏阳性菌有强烈抑制作用,而对革兰氏阴性菌、酵母菌和霉菌无效,在pH值低的条件下对热稳定,对α—胰凝乳蛋白酶敏感,具有生物活性的蛋白质的分子量与乳链菌肽相当,而1409菌株的质粒分布与L. laclisATCC11454和L. lactis 7962不同,说明筛选到的L. laclis 1409菌株确是一株新的乳链菌肽产生菌。     

嗜杀酵母毒素蛋白活性的平板检测

本文介绍一种在平板上直接检测嗜杀酵母产生的毒素蛋白活性的方法,此方法操作简便,可分析不同条件下毒素蛋白对敏感酵母细胞的嗜杀作用.     

转座子Tn916接合转移诱变棒杆菌

采用滤膜接合法,将大肠杆菌中带有Ｔ_ｃ抗性的转座子Ｔｎ９１６接合转移到北京棒杆菌ＧＭ９３中其进行诱变。接合频率在１０^－７－１０^－８之间,在没有选择压力的条件下传代培养,接合子是比较稳定的,仍保持Ｔ_ｃ抗性。Ｔｎ９１６的接合转座作用可以使ＧＭ９３产生营养缺陷型突变,其中氨基酸营养缺陷型占８４％,并得到与Ｌ－Ｉｌｅ产生途径有关的六种氨基酸（Ｔｈｒ,Ｌｙｓ,Ｌｅｕ,Ｍｅｔ,Ｖａｌ,Ｉｌｅ）的缺陷株。     

啤酒酵母呼吸缺陷型诱变形成机制初探

本文以两株不同的啤酒酵母(S.cerevisiae)作出发菌株,用溴化乙锭(10—100μg/ml)作诱变剂,诱变呼吸缺陷型。发现在非生长条件下,EB诱变呼吸缺陷型过程中出现回复现象。这一现象可被咖啡碱有一定程度的抑制,而在生长条件下EB诱变过程中未发现此现象。但当用KCN处理时,则得到了类似于非生长条件下的诱变结果。因而,推测呼吸缺陷型形成过程中可能存在一中间态过程[ρ~-]~*。呼吸缺陷型的形成过程可用ρ~ [ρ~-]~*→ρ~-表示。这是一动态过程。加入一定量的放线菌酮、氯霉素处理时,对诱变动力学曲线没有发现有影响,但培养酵母所用葡萄糖浓度不同时,对其诱变结果有一定的影响。     

灰背伯劳的生态观察

灰背伯劳Lanius tephronotus为甘肃夏候鸟,4—10月居留本省。主食昆虫和小型啮齿类。5—8月繁殖。本文对其繁殖过程作了记述。     

使用脊柱SDS9900 系统治疗神经根型颈椎病的临床研究

目的:探讨和总结使用脊柱SDS9900系统治疗神经根型颈椎病的临床效果和安全性。方法:对经过纳入及排除标准的2013.06-2015.06于我院行脊柱SDS9900系统治疗的共计165例患者进行回顾性分析。每个患者均接受了至少6个月的治疗后随访。结合详实的随访资料,对治疗前后患者在受累节段椎间隙高度,疼痛,颈椎功能(NDI,neck disability index),生活质量评分等指标进行总结和比较。结果:患者在治疗后椎间隙高度(6.63±0.87)较治疗前(4.67±0.86)明显增大(P0.05);治疗后疼痛VAS评分(2.02±0.87)及NDI(6.64±3.17)分值明显低于治疗前(7.65±1.01,12.49±7.42)(P0.05)。生活质量评分显著提高。所有患者中未出现并发症。结论:SDS9900在神经根型颈椎病的保守治疗中,能够显示其独有的特点和优势,在临床工作中可以进行进一步的使用和推广。