免疫固定电泳检测对浆细胞肿瘤相关肾损害的诊断价值

目的:探讨免疫固定电泳(immunofixation electrophoresis,IFE)检测对浆细胞肿瘤相关肾损害的诊断价值。方法:回顾性分析我院肾病科665例住院患者的免疫固定电泳分型结果及检出M蛋白带的患者骨髓检查结果。结果:665例肾病科患者中检出44例单克隆免疫球蛋白带,检出率6.6%,其中IgG型24例(κ型6例,λ型18例),IgA型10例(κ型6例,λ型4例),IgM型2例(均为κ型),单纯轻链κ型2例,单纯轻链λ型6例;此44例患者经骨髓检查,38例确诊为多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM),2例确诊为巨球蛋白血症(waldenstrom macroglobulinemia,WM),骨髓涂片中骨髓瘤细胞比例均≥10%;骨髓瘤细胞10%的4例,诊断为意义未明单克隆免疫球蛋白血症(monoclonal gammopathy of un-determined significance,MGUS)。结论:免疫固定电泳检测可对浆细胞肿瘤相关肾损害提供重要的诊断和分型依据,值得临床应用。     

布氏杆菌病疫苗的应用和研究现状

布氏杆菌病是由布氏杆菌引起的一种重要的人兽共患病。布氏杆菌具有宿主广泛、传染性强以及感染后根治困难等特点,对畜牧业和人类健康均构成严重威胁,疫苗免疫是预防和控制布氏杆菌病的主要措施。迄今国内外已有多个弱毒活疫苗在使用,但均存在一定的缺陷,因此研究更理想的疫苗一直是控制布氏杆菌病的重点。目前除了常规诱变筛选新的弱毒株外,人们正通过基因工程技术构建重组弱毒疫苗、DNA疫苗以及亚单位疫苗。本文简述了布氏杆菌病疫苗的应用及新型疫苗的研究现状。     

鸡传染性喉气管炎病毒gB基因重组DNA疫苗的构建与免疫试验

本研究构建了编码ILTV主要抗原gB基因的重组DNA疫苗pcDNA-gB,质粒转染293-T细胞的间接免疫表明其表达的蛋白具有免疫反应性。为测定该DNA疫苗的免疫效果,将其与本室保存的重组鸡痘病毒rFPV-gB-gD-IgY分别以单独和混合的方式给4周龄非免疫鸡进行免疫,然后测定ILTV特异性抗体和T淋巴细胞增殖反应。结果表明这2种基因工程疫苗均能诱导鸡产生特异性的体液免疫及细胞免疫应答。其中以pcDNA-gB/rFPV-gB-gD-IgY联合免疫组的效果最好,其诱导的抗体水平已接近于常规弱毒疫苗,而细胞免疫水平则比后者高得多。上述研究结果为ILTV新型疫苗的研究奠定了基础。     

人NDRG3 cDNA的克隆与表达

目的：为了获得NDRG3(N-Myc downstream regulated gene3)的cDNA,以成人脑组织为模板。方法：由特异性的引物通过RT—PCR方法扩增人NDRG3的编码基因,大小约为1．1 kb。将此基因插入PMD 18-T载体中,并进行酶切鉴定和序列测定。然后,将测序正确的片段亚克隆人原核表达载体pPROEX-HTb表达载体中,转化DH5α感受态细胞,并在LB培养基中获得高效表达。结果：这表明成功地进行了人NDRG3的克隆和表达,为进一步研究NDRG3的功能奠定了良好的基础。     

经基磷灰石(H A )的制备方法及其研究进展

HA生物材料作为最有发展前途的生物硬组织替代材料之一。已经成为生物医用材料研究的重点内容。本文在综合了大量的国内外文献的基础上,对羟基磷灰石的不同制备方法及国内外研究现状进行了总结及评论。并提出了相应的设想与展望。     

NO 与牙周病周期性发病关系的研究

目的：临床上牙周病总是活动与静止期交替发生,经研究牙周病患者中NO含量及其牙周病有显著相关性。本研究目的系为了阐明NO在牙周病中的调节机制。方法：通过对牙周炎患者不同时期的唾液NO含量进行分析,来检测其活动期与静止期NO含量变化。结论：数据表明,NO在高浓度状态下可以导致炎症加重,在低浓度状态下可以抗炎。     

青藏高原药用植物唐古特山莨菪和唐古特大黄光合作用对强光的响应

与唐古特大黄相比,唐古特山莨菪的表观光合量子效率(AQY)较高,但最大净光合速率(Pmax)较低。在光强小于1200μmolm-2s-1时,后者用于碳同化的电子传递占总光合电子传递的比例(JC/JF)比前者高,而分配于光呼吸的电子传递(JO/JF)及Rubisco氧化和羧化速率的比值(VO/VC)则相反;光强大于1200μmolm-2s-1以后两种植物的这些参数都趋向稳定。随光强增加,后者叶片吸收光能分配于热耗散(D)的增加斜率较前者高,表明两高山植物对强辐射的适应方式略有不同。加强光呼吸途径的耗能代谢和PSII天线热耗散份额是唐古特山莨菪适应高原强辐射的主要方式,而提高叶片光合能力则是唐古特大黄的一种适应方式。     

紫外光源及太阳UV-B辐射的模拟实验

介绍了用于UV-B生物学效应研究的几种常见光源,对如何利用选择性薄膜获得理想的UV-B波段的光谱,进而能较真实模拟平流层O3耗损所导致的近地表面太阳UV-B辐射的增强,以及在野外进行UV-B模拟研究时,紫外荧光灯管的排列方式等进行了分析讨论。介绍并讨论了当前UV-B辐射实验的各种方法,并就各实验设计的注意事项和安全操作等提出了建议。     

pWPT-GFP慢病毒载体的改构及鉴定

目的:为实现慢病毒感染后可用抗生素筛选外源基因稳定整合的细胞,我们对慢病毒载体质粒(pWPT-GFP)进行了改构。方法:将三种抗生素抗性基因(puro、hygro、neo)连同其启动子分别克隆入慢病毒载体(pWPT-GFP)。酶切鉴定载体构建正确后,将这三种改构载体分别与辅助质粒psPAX2、pMD2.G共转染293T包装细胞,收获病毒上清并感染靶细胞,使用相应抗生素筛选细胞验证抗性基因的插入。结果:成功构建了重组慢病毒载体pWPT-GFP-puro、pWPT-GFP-hygro、pWPT-GFP-neo,通过调整病毒上清的用量可以达到靶细胞100%的感染效率;用相应抗生素筛选细胞证明了抗性基因的表达。结论:我们成功改构了慢病毒载体(pWPT-GFP),从而使病毒感染后用抗生素筛选稳定整合的细胞成为可能。     

抗P-选择蛋白人源性单克隆抗体的制备

目的:获得人源性抗P-选择蛋白(selectin)特异性抗体,为相关疾病治疗奠定基础。方法:在HEK293细胞中真核分泌表达人P-选择蛋白功能性片段,以此蛋白片段作为抗原,利用本室构建的大容量全合成人源性噬菌体抗体库进行筛选,经过3轮固相筛选后,阳性克隆得到富集;将其中富集效果最好的一株单链抗体A1改造成全抗体(IgG1),重组质粒转染H293细胞后,抗体得到表达;表达后在全抗体水平上用ELISA和Western印迹分别验证了A1抗体的特异性,并通过非竞争ELISA方法初步测定这株抗体的亲和力。结果:3轮筛选得到3株特异性噬菌体抗体,其中富集效果最好的单链抗体A1改造成全抗体形式后特异性良好,抗体亲和力Kd=2×10-8 mol/L。结论:筛选得到一株特异性较好的抗P-选择蛋白人源性单克隆抗体A1,其特异性和亲和力较好,有继续开发的价值。