多酚氧化酶作用机制的研究 Ⅰ.有机溶剂对于多酚氧化酶接触邻位双酚氧化的影响

(一)乙醇能够使多酚氧化酶接触儿茶酚及焦性没食子酸氧化的活力提高,在50%乙醇溶液中,以儿茶酚为底料时,多酚氧化酶的活力比没有乙醇存在时的活力高出一倍以上。(二)50%的乙醇不能使多酚氧化酶接触其他双酚衍生物氧化的活力提高,相反地却有抑制作用。(三)无论有无抗坏血酸的存在,50%乙醇对多酚氧化酶活力的提高程度是一样的,在有一定量的抗坏血酸的存在下,多酚氧化酶对儿茶酚的 Michaelis 常数(25℃)在水溶液及50%乙醇溶液中各为0.072×10~(-3)M 及0.49×10~(-3)M。(四)乙醇的存在,并不影响多酚氧化酶氧化儿茶酚作用时氧气被完全还原为水的作用。无论乙醇存在与否,每一分子底料的氧化,都消耗一个氧原子。(五)其他水溶性有机溶剂对多酚氧化酶氧化儿茶酚活力的影响不同,如甲醇、异丙醇、叔丁醇、丙酮等能使酶活力提高;但1,4-二氧己圜、乙二醇、甘油等则有抑制作用。50%丙酮能使酶活力提高约3倍。     

动物组织中细胞色素c过氧化物酶活力的探索

主要以大白鼠为材料,检验各种动物组织结果说明和酵母不同,这些动物组织中细胞色素 c 过氧化物酶或者不存在,或者即使存在,其活力也甚微弱。     

再论科学道德问题

1991年 10月 2 5日《中国科学报》(现名《科学时报》)发表的邹承鲁等 14位学部委员 (院士 )撰写的“再论科学道德问题”一文 ,阐述的科学道德问题是科技界和学术界永远值得提倡的。此文对于当前优化科研环境、树立良好道德风尚、推动精神文明建设 ,继承和发扬先进文化 ,具有积极的现实意义。我们征得《科学时报》社同意全文转载 ,推荐给广大读者、作者和编者阅读学习     

NADP~ 在兔肌甘油醛3-磷酸脱氢酶中作为氢受体的活力

兔肌甘油醛-3-磷酸脱氢酶以NADP~ 作氢受体时,有极轻微的活力,实验表明它不是由于所用NADP~ 试剂中含有NAD~ 或酶制剂中含有磷酸酯酶、转氢酶等造成的干扰。采用高浓度酶对纯化后的NADP~ 测定结果是:NADP~ 作为氢受体的活力仅及NAD~ 的二百分之一。米氏常数K_m为700μm。NADP~ 对NAD~ 的还原无明显抑制作用。不同来源的甘油醛-3-磷酸脱氢酶对辅酶专一性程度有差别,酵母酶的专一性较兔肌酶为高:NADP~ 作为氢受体的活力仅为NAD~ 的千分之一。     

甘油醛-3-磷酸脱氢酶的变性和失活动力学研究

用紫外差吸收和萤光方法对甘油醛-3-磷酸脱氢酶及其衍生物的SDS变性动力学研究结果表明,不论对于全酶、酶朊、羧甲基化酶,还是光照酶,在酶浓度为5μM,SDS的浓度为6.24mM,25℃恒温条件下,测量差吸收ΔA_(295)随时间的变化,或在λ_(ex)=305nm,λ_(em)=335nm测萤光强度随时间的变化,其结果均表现为由三个简单一级反应组成的复合一级反应,三个速度常数,对于上述四种酶来说尽管各不相同,但它们的数量级分别为:k_1=1秒~(-1),k_2=10~(-2)秒~(-1),k_3=10~(-3)秒~(-1)。这表明甘油醛-3-磷酸脱氢酶每个亚基中的三个色氨酸由于所处的空间位置的不同,在空间结构发生变化时,分别以不同的速度由酶蛋白分子内部的非极性环境暴露于其外部的极性环境。另外还发现,在这四种酶中,全酶的变性速度最小,而羧甲基化酶的变性速度最大。这说明酶经羧甲基化后空间结构的稳定性减弱,因而更易于为SDS变性。与此同时,我们测定了全酶和酶朊的SDS失活过程,并同它们的变性过程进行了比较。从酶的失活过程类似于变性过程也是由三个一级反应组成的复合一级反应这一事实来看,全酶和酶朊的失活过程似有部分变性并具有部分活力的中间物存在。     

龙虾肌甘油醛-3-磷酸脱氢酶及其衍生物与NAD~+的结合

平衡柱层析法测得每分子龙虾肌羧甲基化甘油醛-3磷酸脱氢酶能结合3.9分子NAD~+,而每分子光照酶则只能结合2分子NAD~+。 由蛋白荧光淬灭法得到,在25℃、pH7.0的磷酸盐缓冲液中,全酶、羧甲基酶及光照酶与NAD~+结合时均呈负协同性。     

琥珀酸脱氢酶的研究 Ⅱ.酶与辅基性质的进一步观察

(一)用结晶胰蛋白酶及结晶胰凝乳蛋白酶处理净化的水溶性琥珀酸脱氢酶,经过对甲酚抽提,硫酸汞沉淀,硫化氢分解及纸电泳纸层析等方法净化得到四种带有不同肽链的腺嘌呤异咯嗪核苷酸。从它们的组成成份的分析以及它们的性质的观察,我们认为它们与已知的腺嘌呤异咯嗪二核苷酸略有不同。肽链是连接在异咯嗪上,其连接方式异于一般异咯嗪蛋白。肽链部份的氨基酸组成的分析结果,证明它们都含有半胱氨酸。(二)琥珀酸脱氢酶中的铁处于还原状态。铁与酶朊紧密结合,它与酶活力有密切关系。(三)无机磷可增加琥珀酸脱氢酶的活力,但琥珀酸脱氰酶的活力并不是必需依靠无机磷的存在,乙二胺四乙酸与丙氨酸也有类似无机磷的作用。     

世纪之交生物学发展趋势

数理科学广泛而又深刻地渗入生物学的结果,开辟了在分子水平研究生命现象的新学科,分子生物学,从而全面改变了现代生物学的面貌。一、分析与综合虽然分子生物学的兴起全面改变了生物学的面貌,但是也有部分生物学家一方面对基于分析工作为主的分子生物学成就感到兴奋,...     

对《生命的化学》青年读者的希望

对《生命的化学》青年读者的希望邹承鲁（中国科学院生物物理研究所,北京１００１０１）［本文是邹承鲁院士应本刊设立“特约专家论坛”专栏而写,文中寄托着他对我国青年生化学者的殷切希望。这是一篇说理透彻、逻辑严密、教诲谆谆、陈述痛快淋漓的好文章,通篇漾溢着科...