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81.
pET28a-TAT-LacZ重组子的构建   总被引:4,自引:0,他引:4  
严世荣  龚坚  严洁  邱云城 《遗传》2003,25(2):141-144
为了构建高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,观察表达的融合蛋白TAT-β-Gal能否穿过生物膜,使用人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET28a组氨酸编码区后再连接lacZ基因,组成pET28a-TAT-LacZ重组表达子,转化大肠杆菌,利用组氨酸亲和层析柱纯化TAT-β-Gal融合蛋白,将融合蛋白加入培养的平滑肌细胞。得到高度纯化的、有活性的TAT-β-Gal融合蛋白, TAT-β-Gal在短时间内进入体外培养平滑肌细胞,成功地构建了高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,并在体外培养的细胞中证实TAT-β-Gal融合蛋白穿透生物膜的能力,为肽类、生物大分子药物进入组织细胞内发挥治疗作用提供了理论基础。  相似文献   
82.
细胞色素P450酶系循环催化的新途径   总被引:1,自引:0,他引:1  
细胞色素P45 0酶系的循环催化反应需要电子供体NADPH或NADH等辅助因子系统 ,因此它在实际应用中受到制约。用电极电解或锌粉作电子供体取代NADPH辅助因子可以获得与NADPH相似的底物转换率。此外 ,还讨论了P45 0的“定向进化”产生的突变体在无NADPH等辅助因子存在下 ,通过“过氧化物途径”使底物羟基化。  相似文献   
83.
中国丙型肝炎病毒基因型研究新进展   总被引:3,自引:0,他引:3  
为了进一步了解中国丙型肝炎病毒基因型感染状态 ,我们建立了 5′ NCRABC程序酶切分型法 :首先采用RTPCR技术 5′ NCR扩增HCVRNA阳性样品中的cDNA ,然后按照ABC程序进行分型 ,A应用BHH(BsrBⅠ ,HaeⅡ ,HinfⅠ )复合内切酶消化 5′ NCRcDNA ,B应用BstUⅠ消化 ,C应用HaeⅢ消化 ,电泳检测片段大小。应用该方法对临床采集的HCVRNA阳性血清进行分型 ,在国内首次发...  相似文献   
84.
据文献报告,在寄生虫感染动物模型研究中使用皮质类激素可提高宿主对原虫(How-ard,1984)与多种蠕虫(Rayetal,1975;Hashiguchietal,1977;杨超等,1982)的易感性,并能加速寄生虫生长发育过程。参照前人方法,作者观察泡球蚴(Alveolarechino-coccus)在长期肌注地塞米松的小鼠体内发育情况与宿主免疫反应。实验结果显示小鼠免疫力受到明显抑制,虫囊增重快,原头蚴生成率提高。现报告如下。材料与方法一、实验动物雌性昆明种小鼠,体重18—22克。以两种方式接种:取多房棘球绦虫孕卵节片35—40节直接灌鼠胃引起肝脏原发感染;切取小鼠泡球蚴组织块0.2…  相似文献   
85.
本文记述了采自晋、豫、陕三省交界处黄河流域的8种狼蛛,其中一种为新种Pardosa dukouensis sp.nov,采自山西风陵渡口及陕西西安草滩。  相似文献   
86.
测定叶片蒸腾系数的封闭系统   总被引:1,自引:0,他引:1  
光合测定系统内附装一控制定温的定量吸湿装置,使这系统在测定叶片光合(或呼吸)过程中,湿度保持恒定,可以测得蒸腾量及蒸腾速率,从而得到蒸腾系数。文中还介绍CO_2的标定方法。  相似文献   
87.
勃起功能障碍(ED)常见于糖尿病患者和前列腺切除术后。治疗ED的传统方法常常难以见效,多年来,新方法仍未取得突破。令人兴奋的是干细胞移植治疗ED进入临床前阶段。最近的研究证明移植的干细胞可通过旁分泌作用于周围阴茎组织,并分化为平滑肌、内皮细胞和神经元。脂肪组织来源的干细胞因其丰富且易分离的特点成为有效可行的ED治疗手段。我们简要综述了脂肪干细胞用于ED治疗的新进展。  相似文献   
88.
本报道采自我国东北地区的姬蜂科Ichneumonidae姬蜂亚科,中国-新记录属、种。  相似文献   
89.
【目的】孟氏隐唇瓢虫Cryptolaemus montrouzieri Mulsant生殖系统结构和卵细胞发生将为昆虫的系统进化关系及瓢虫分类提供依据,同时可作为瓢虫人工饲料研究开发的参考。【方法】利用组织石蜡切片技术和光学显微镜,观察孟氏隐唇瓢虫生殖系统结构,以及自成虫羽化后不同发育阶段卵巢发育状况和成熟卵巢管卵子发生过程。【结果】孟氏隐唇瓢虫雄性生殖系统包括2对附腺、1对精巢、1对输精管、1对贮精囊、射精管、弯管和阳基。雌性生殖系统包括2片生殖板、生殖腔、受精囊、中输卵管、1对侧输卵管和1对卵巢。单侧卵巢管数量在11~14根之间,卵巢管端部延伸出细长的端丝。卵巢管属于端滋式,分为原卵区和生长区。滋养细胞分散且细胞核几乎充满整个细胞,未见合胞体。卵细胞稀疏地集中在原卵区下端,并且可见营养索向卵巢管顶端延伸。根据卵细胞位置和形态,卵黄积累情况,滤泡细胞形态变化,将卵细胞发生分为前期,中期,中后期和后期。卵细胞发育后期,营养索消失,滤泡细胞排列疏松,细胞间隙增大。【结论】孟氏隐唇瓢虫卵巢管的滋养细胞是端滋式卵巢管滋养细胞中的原始类型,且推测瓢虫科昆虫卵巢管滋养细胞均属于此类。卵细胞早期发育过程中,卵细胞通过营养索从滋养细胞获取营养物质。  相似文献   
90.
陕西七纺器蛛和拉土蛛不同组织酯酶同工酶的比较研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
陕西七纺器蛛(Heptathela shaanxiensis),拉土蛛(Latouchia sp.)均于1987年10月采自陕西泾阳。在同条件下采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行了不同组织的酯酶同工酶比较。实验方法酶液的制备:将饥饿10天的两种蜘蛛按常规解剖,分别取各组织置于研钵内,根据样品重量之差异,分别加入40%蔗糖溶液1—3ml,匀浆过滤,离心(3500rpm×15′)。取上清液作酶源,贮存于4℃冰箱备用,点样时加入适量0.1%澳酚蓝作电泳的指示染料。酯酶同工酶的聚丙烯酰胺疑胶电泳分离和染色、脱色:基本参照邱琼华等(1987)的方法。用日本20M光密度计(波长570nm,狭缝0.4cm)扫描…  相似文献   
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