鲜姜化学成分的GC—MS分析

本文采用鲜姜榨汁-过滤的方法提取鲜姜内成分。然后对其化学成分进行GC／MS分析。从鲜姜汁中分离确定了33中成分,其中萜类物质相对含量较高。     

有关杯碟法测定壮观霉素灵敏度的影响因素

通过对菌种、培养基种类及pH、缓冲液种类及pH培养温度、添加葡萄糖和吐温等因素的研究,确定了壮观霉素测定条件,使其测定灵敏度达0．4X10^-6。     

嗜盐放线菌分离方法

盐环境放线菌是一类独特的微生物资源。介绍了盐环境放线菌的种类,生理特性,影响嗜盐放线菌分离效果的基本因素,分离方法存在的问题,以及嗜盐放线菌分离的最新研究进展。推荐了3种适于分离嗜盐放线菌的培养基及分离方法。认为15%或以上NaCl浓度、一定比例的复合盐和培养基成分是高选择性分离嗜盐放线菌的关键。     

白喉毒素突变体CRM197在大肠杆菌中的高效可溶表达、纯化及免疫原性分析

CRM197(Cross-reacting material 197)是白喉毒素的无毒突变体,在生物制药领域具有非常广泛的应用前景。为了实现CRM197在大肠杆菌中的无标签、可溶表达,以替代现有昂贵、复杂的白喉杆菌分泌发酵工艺,文中对目的蛋白的序列进行优化,转化大肠杆菌经IPTG诱导,目的蛋白获得了可溶性高表达,目的蛋白约占碎菌上清总蛋白的40%。超声破菌后、经阴离子交换、肝素亲和以及脱盐三步柱上层析获得纯度高于95%的CRM197样品。细胞毒性实验证明,CRM197的IC_(50)值是白喉毒素IC_(50)值的2.1×10~7倍,是白喉类毒素IC_(50)值的9.6倍,表明文中表达的CRM197是安全无毒的。随后,比较了高、低剂量的CRM197在小鼠体内的免疫原性,发现2μg组三免后的抗体滴度与20μg组的相当,可达1︰409 600。文中建立了CRM197的无标签、高效、可溶表达的大肠杆菌表达系和快速纯化体系,获得了具有较好免疫原性和安全性的重组蛋白,为该蛋白的进一步应用奠定了基础。     

酿酒酵母渗透敏感新基因的定位及其作用机理的研究

本文通过四分子分析将酿酒酵母中另一控制渗透敏感的基因osm3进行了定位。遗传分析表明,osm3是位于染色体Ⅱ上的1个新基因,与gal1座位相距大约45厘摩。其第二次分裂分离频率为51.01%,它与着丝粒的图距为25.51厘摩,属着丝粒连锁基因。回复突变的研究结果表明,渗透敏感性状很可能是因为osm3座位上发生了错义或无义突变所致。 根据渗透敏感菌株和正常菌株对高渗透压反应试验,证明了高的胞内甘油含量是酵母在高渗条件下生长所必需的。osm3菌株不能耐高渗的主要原因是由于甘油转运失调所致,OSM3基因产物可能与甘油的转运过程有关。本文还就高渗对酿酒酵母发酵力的影响进行了讨论。     

极端嗜酸微生物

一般认为,极端嗜酸微生物指那些生长ｐＨ上限为３．０最适生长ｐＨ在１．０～２．５之间的微生物。它们一般分布于金属硫矿床酸性矿水、生物滤沥堆、煤矿床酸性矿水以及合硫温泉和土壤中,包括原核和真核两大类。其中原核嗜酸微生物依生长的温度范围不同又可划分成常温型、中温型和高温型３个类群。由于嗜酸微生物在低品位矿生物滤沥及煤的脱硫等方面有重要应用前景,因此受到广泛重视。１极端嗜酸微生物的多样性及主要类群在极端酸性环境中的真核生命几乎完全限于微生物。在黄石公园的温泉水体中已分离到光合作用的藻类。从其它一些地方金…     

突变的叶绿体ATP合成酶ε亚基对菠菜叶绿体毫秒延迟发光的影响

突变和野生型体ＡＴＰ合成酶的ε亚基均可增强中绿体毫秒延迟发光的快相;不同的突变体对快相的增强强度不同,但与它们对离体ＣＦ１的Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶水解活力的抑制程度情况一致。且这种影响在１℃左右的低温下较显著,而温度升至２５℃时,这种增强作用趋于消失。加入解联剂后快相部分消除,ε亚基仍有增强作用。这些结果说明,ε亚基是通过与ＣＦ１的专一作用而影响光系统Ⅱ附近类囊体的动态结构,使质子不易从类囊体膜上流     

盐生肉苁蓉寄主植物种类鉴定及分布区域分析

盐生肉苁蓉（Cistanche salsa (C. A. Mey.) G. Beck）为列当科肉苁蓉属寄生性草本植物,为目前已知寄主植物种类最多的肉苁蓉属物种,也是我国西北地区传统常用中药材。为探明我国盐生肉苁蓉寄主植物种类及分布区域,本研究结合DNA条形码鉴定和形态鉴别技术,对采集到的66份带有寄主根的盐生肉苁蓉样品进行分布区域分析和寄主植物种类鉴定。结果表明盐生肉苁蓉在新疆及宁夏等地区海拔400～2000 m的区域分布广泛。新疆塔城地区裕民县盐生肉苁蓉寄主植物为菊科绢蒿属聚头绢蒿（Seriphidium compactum (Fisch. ex DC.) Poljakov）和苋科滨藜属疣苞滨藜（Atriplex verrucifera Marsch. von Bieb.）,塔城市盐生肉苁蓉寄主植物为苋科盐爪爪属里海盐爪爪（Kalidium cuspidatum Ung.-Sternb.）、疣苞滨藜和驼绒藜属驼绒藜（Krascheninnikovia ceratoides (L.) Gueldenst.）,该地区优势寄主植物为疣苞滨藜。新疆阿勒泰地区哈巴河县寄主植物为聚头绢蒿、苋科驼...     

一种筛选微卫星位点的改进方法及其在小熊猫微卫星基因文库构建上的应用

微卫星（Simple Sequence Repeat,SSR）基因位点是在各个遗传学领域被广泛使用的分子标记。而对于首次研究的物种,必须筛选出可以应用的微卫星位点。对于分离微卫星位点来说由于只有大约0.5％-2%的重组体含有微卫星位点,所以标准的基因组文库需要至少产生5 000个重组体。传统的筛选方法就是通过检测大量重组体来定位这些少量的位点。近几年来出现了一些新的筛选方法,采用“富集”微卫星序列的技术将包含微卫星位点的重组体比例提高了10-100倍。这样就降低了筛选工作的时间和劳动强度,大大提高了筛选微卫星位点的效率。本文在结合了几种筛选微卫星位点技术路线的基础上,采用生物素标记探针杂交、富集和PCR筛选技术,对原有技术路线进行了改进。主要试验步骤为：1）基因组DNA的提取和消化;2）生物素标记探针富集;3）克隆建库;4）“PCR”筛选;5）引物设计和多态性检测。新的方法在小熊猫微卫星基因文库的构建中取得成功,获得了10个具有多态性的(CA)n重复序列微卫星位点。