不对称水解(R,S)-2,6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯新菌种的分离鉴定及酯酶基因的克隆、表达

【目的】筛选鉴定1株可以选择性水解农药甲霜灵的中间体(R,S)-2,6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯(MAP)的菌株,并克隆、表达该菌株中的酯酶基因。【方法】以MAP为唯一碳源,对活性污泥样品中的微生物进行富集培养,采用罗丹明B平板显色法进行初筛,通过摇瓶复筛得到了1株对MAP具有最高对映体选择性和水解活力的新菌株,根据其形态、生理生化特征及16S rRNA序列分析,确立该菌株的系统发育学地位。构建该菌株的基因文库,筛选获得含目的基因的克隆子,通过序列分析和引物扩增得到酯酶基因,将基因与表达载体pET28a(+)连接后,转化大肠杆菌BL21Gold(DE3)plysS,构建重组菌。【结果】该菌属于革兰氏阴性菌,结合16S rRNA基因、形态特征和生理生化实验结果,鉴定该菌为反硝化无色杆菌。通过基因文库法,找到了该菌中的酯酶基因EHest,并成功构建了重组大肠杆菌EHest-p ET28a(+)-BL21Gold(DE3)plys S,表达了来自Achromobacter denitrificans 1104且具有不对称水解MAP活性的酯酶EHesterase,大小约27 kDa,表达酶活是原始菌株的27.1倍。用EHesterase催化MAP水解,底物浓度50 g/L,反应1 h,底物转化率为29.5%,产物(酸)的ee_p为85.1%,对映体选择性为R型。该酶的最适反应pH和温度分别为pH 9.0和50°C。它水解MAP的活性分别是水解橄榄油和乙酸乙酯活性的333倍和667倍。【结论】筛选到1株具有不对称水解MAP能力的新菌株Achromobacter denitrificans 1104。     

重金属胁迫下内生菌对宿主植物的解毒机制

采用内生菌联合植物修复是土壤重金属污染修复理论研究和应用实践的新思路。较之根际促生菌,内生菌因生存环境稳定且与植物联系更加紧密,在实际应用中具有更大价值。在重金属胁迫下,部分具有特定功能的细菌可进入植物体内成为内生菌,这些内生菌通常在重金属吸收、耐受和解毒方面具有优良的特性,而且可以协同宿主植物耐受重金属胁迫,表现在直接或间接降低植物体内重金属胁迫强度和提高植物本身对重金属的耐受性两方面。系统分析了内生菌对宿主植物的解毒机制,综述了近年来内生菌增强植物重金属耐受性的研究,展望了重金属胁迫下植物和内生菌互作机制的研究思路和方向。     

非那雄胺联合M受体拮抗剂治疗前列腺增生合并膀胱过度活动症的疗效

目的:探讨非那雄胺联合M受体拮抗剂对前列腺增生合并膀胱过度活动症临床疗效的影响。方法:回顾性研究我院前列腺增生合并膀胱过度活动症的患者60例,随机分为实验组和对照组,每组30例。对照组患者给予M受体拮抗剂,实验组患者在对照组的基础上给予非那雄胺。观察并比较治疗前后两组患者国际前列腺症状评分(IPSS)、膀胱过度活动症评分(OABSS)、残余尿量、最大尿流率、尿急次数以及治疗期间不良反应。结果:与对照组相比,实验组患者IPSS及OABSS较低(P0.05);残余尿量较少,最大尿流率较大,尿急次数较少(P0.05);不良反应发生率较低(P0.05)。结论:非那雄胺联合M受体拮抗剂能够降低前列腺增生合并膀胱过度活动症的不良反应发生率,提高临床疗效,值得在临床上推广应用。     

改变人工饲料组分对七星瓢虫幼虫生长发育的影响

改变人工饲料的含氮物质和脂类以及温度对七星瓢虫幼虫生长发育有明显影响.幼虫取食含有脂类物质的饲料时,化蛹率可达90%左右,生长 历期明显缩短,成活率增加;食物中缺乏某些脂肪酸对幼虫生长发育不利,其中亚麻酸和油酸是必需的因素.据测定人工饲料中的游离氨基酸含量低于蚜虫中的水平,而蛋白质水解氨基酸的含量则较蚜虫中高.饲料中加入酵母水解物使幼虫生长加快,体重显著增加.幼虫在28℃时成活率和化蛹率均较在其他温度高,此时幼虫的取食和食物利用加强.幼虫取食改进的饲料时除体重外,在生长期、成活率、化蛹率都接近取食蚜虫时的水平.     

人参胚胎学研究

本文对人参(Panax ginseng C.A.Mey.)胚胎学进行较为系统的研究。主要结果如下:1.人参花药为四分孢子囊。小孢子母细胞减数分裂过程中,胞质分裂为同时型,四分孢子为四面体形。成熟花粉粒为3-细胞型。2.大孢子母细胞减数分裂形成四个线形或“T”形排列的大孢子,合点端大孢子具功能。雌配子体发育属蓼型。3.在同一朵花中,对雌蕊和雄蕊发育的相关性进行了观察,并将它们与外部形态相联系。4.双受精过程属有丝分裂前配子融合类型。授粉后7-10小时,大部分雌、雄性核发生融合。5.初生胚乳核在授粉后36小时内发生第一次有丝分裂;合子休眠期较长,大约15-20天。核型胚乳。胚乳具约300个游离核时,以自由生长的细胞壁的形式细胞化。     

增甘膦(Glyphosine)和调节膦(Krenite)对叶绿体光化学反应的效应

用2～12 mM增甘膦处理叶绿体,其循环磷酸化活力均高于对照,经增甘膦处理的叶绿体,再用两倍体积的缓冲液洗涤两次并离心,所得叶绿体的磷酸化活力仍比对照的要高。对照叶绿体的非循环磷酸化速度在处理时的较高温下降低得很多,而处理的叶绿体的活力变化不大或略有上升。增甘膦处理的叶绿体,其非循环磷酸化活力和非循环磷酸化条件下的铁氰化钾还原活力均比对照的要高,故其磷/氧值维持不变或略有下降。在5×10~(-5)～5x10~(-3)M,调节膦促进铁氰化钾还原,抑制非循环磷酸化,表现出明显的解联效应。调节膦也抑制循环磷酸化。这种抑制是与反应底物非竞争性的。在抑制磷酸化的有效浓度范围内,调节膦也抑制膜上ATPase活性和光诱导的叶绿体的质子吸收。增甘膦能促进电子传递从而也促进光合磷酸化。调节膦则具有光台磷酸化的解联剂的特征。     

植物香原料防霉剂—防霉剂P的初步研究

在不同自然环境条件下,由于霉菌污染而造成各种工业品霉变、引起人体霉菌性皮肤感染,这是一个大家十分关心的问题。目前,工业防霉应用中,一些新的低毒、高效产品,逐渐取代了苯汞类有毒物质。在皮肤病真菌性感染的治疗中,     

列宁思想在自然科学中的胜利

在人类的历史中,除了马克思、恩格斯、列宁和斯大林以外,再也找不到有像他们这样能对历史事件的进程发生如此巨大影响的更加卓越的活动家了。列宁是马克思事业的天才继承者,卓越的革命战略家,最革命的党、新型的党——苏联共产党——的创立者。列宁把他整个一生贡献给革命事业;在这个规模巨大的革命事业中,他成为科学与实践的最伟大的天才。作为一个最彻底的马克思主义者的     

太原市南郊区雀科鸟类冬季群落生态的初步研究

开展鸟类群落生态学的研究,可以更全面更深入地了解鸟类在自然界中的地位和作用,从而为鸟类资源的保护和利用提供科学依据。雀科(Fringillidae)鸟类与农、林业有较密切的关系,苏造文(1959)、刘焕金等(1984)曾有过报道,但通过定量分析反映群落特征的工作,仅有杨兴家(1983)在长自山北坡对鹀类夏季群落结构所进行的研究,而冬季群落方面的资料较为匮缺。鉴于此,我们于1982—1984年3个冬季,在太原市南郊区对雀科鸟类的群落生态作了初步研究。工作区的自然概况已有说明(刘焕金等,1982),不再赘述。