SD大鼠骨髓间充质干细胞体外原代培养及鉴定

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养以及扩增的方法并鉴定。方法:取100g左右雄性SD大鼠后肢股骨、胫骨骨髓,原代全骨髓培养法,多次传代纯化,体外扩增后,观察细胞形态,并免疫组化及流式细胞仪检测cd34、cd90、cd105细胞因子,鉴定是否为BMSCs。结果:所获取的细胞呈长梭形,呈现特征性的漩涡状生长,CD34阴性,CD90、CD105阳性。结论:利用全骨髓培养法成功分离骨髓间充质干细胞,10代以内的细胞纯度高,活性好。全骨髓培养较为简便、易行。     

桔青霉木聚糖酶基因克隆及其在毕赤酵母中的表达及活性分析

通过同源序列PCR克隆的方法,获得桔青霉(Penicillium citrinum)CR-2菌株的木聚糖酶编码基因xyl,该基因全长984 bp,编码327个氨基酸,无内含子序列,具有完整开放阅读框。其编码的氨基酸序列N端具有一段包含19个氨基酸的信号肽序列,并具有糖基水解酶第10家族(GH10)的保守催化域特征,推测该酶属于第10家族成员。将该基因与毕赤酵母表达载体pPIC9相连接构建重组载体pPIC9-XYL,电击转化至毕赤酵母GS115菌株中。挑选阳性重组子经测序、酶活性以及SDS电泳分析表明,xyl基因成功在毕赤酵母中分泌表达,重组酶活性可达214.15 IU/mL。该重组酶最适温度与最适pH分别为50℃和4.5,且具有良好的pH和热稳定性。     

颈内动脉狭窄并发TIA及CRVO动静脉溶栓治疗一例及文献复习

目的:探讨动脉介入及静脉溶栓联合应用对因颈内动脉狭窄致TIA发作伴发静脉阻塞所导致的闭塞性脑血管病的预防性治疗的临床疗效。方法:应用介入方法经颈内动脉至眼动脉开口处注入尿激酶同时给与静脉尿激酶溶栓治疗。结果:治疗后病人左上肢发作性轻瘫立刻消失,患者次日视力恢复至0.25,二周后恢复至0.3,一个月内未再出现TIA发作。三个月视力恢复至0.4,未出现TIA发作。结论:动静脉溶栓的联合治疗方法对患者脑缺血疾病的预防与治疗具有确切疗效。     

应用微生物发酵与超声波联合处理高效提取钩藤碱

目的:通过研究微生物发酵和超声波联合处理对钩藤碱提取率的影响,寻找高效提取钩藤碱的发酵菌株的处理方法.方法:采用微生物发酵与超声波处理中药钩藤粉末,用70%乙醇提取钩藤碱,用紫外分光光度法测定钩藤碱含量.结果:与未经处理相比,单独发酵处理或超声波处理以及发酵与超声波联合处理均能提高钓藤碱的提取率,其中以酵母发酵、酵母发酵与超声波联合处理法提取率最高,分别为对照(未处理)提取效率的2.598倍和2.857倍.结论:酵母是高效提取钩藤碱的优良发酵菌株,酵母发酵与超声波联合处理更显著地提高钩藤碱的提取效率,为钩藤碱的高效提取提供了一种简便、廉价、有效的新方法,建议在生产中推广应用.     

Relationship between uterine expression of matrix metalloproteinases and their inhibitors and endometrial receptivity

In order to investigate the relationship between the endometrial receptivity and matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 ,-3 (TIMP-1,-3) in the en-dometrium, we used early pregnant mice as the animal model and studied the expression of MMP-2, TIMP-1 ,-3 in the endometrium in relation to the number of implantation sites after RU486 treatment. The results indicated that RU486 could significantly inhibit embryo implantation and change the expression of MMP-2 and TIMP-1,-3 in a dose-dependent pattern. When the mice were treated with 12 mg/kg RU486, there were a few embryos implanted as compared with the control. The expression of matrix metalloproteinase MMP-2 was low during the period of "implantation window", while the tissue inhibitor of metalloproteinase in the endometrial cells was high, suggesting that the activity of the proteolytic enzyme was strictly controlled by its inhibitors. After RU486 treatment, the generation of TIMP-1,3 was decreased while the MMP-2 wa     

CD56和CD117浆细胞免疫表型与多发性骨髓瘤患者染色体核型和预后的研究

目的:探讨CD56和CD117浆细胞免疫表型与多发性骨髓瘤患者染色体核型和预后的关系。方法:选取2011年1月至2017年3月我院收治的66例多发性骨髓瘤患者,均采用以硼替佐米为基础的VTD化疗方法。采集患者新鲜骨髓液,采用流式细胞术(FCM)和荧光原位杂交技术(FISH)检测浆细胞免疫表型和细胞染色体核型。分析浆细胞免疫表型与患者染色体核型和预后的关系。结果:66例患者浆细胞CD19+、CD20+、CD45+、CD56+、CD117+表达频率分别为7.6%(5/66)、18.2%(12/66)、45.5%(30/66)、66.7%(44/66)和40.9%(27/66)。20例行FISH检测的患者,18例(90.0%)核型异常,其中12例(66.7%)IgH重排,9例(50.0%)1q21+扩增,8例(44.4%)del(13q14.3)缺失,10例(55.6%)del(13q14)缺失,3例(16.7%)del(17p)缺失。CD56+患者1q21+扩增和del(13q14.3)发生率显著低于CD56-患者(27.3%vs 85.7%,18.2%vs 85.7%,P0.05)。CD117+患者1q21+扩增和del(17p)发生率显著低于CD117-患者(12.5%vs 80.0%,12.5%vs 20.0%,P0.05)。CD56+患者的PFS和OS明显延长[23.4(2.0-91.4)月vs 19.8(3.0-85.1)月,34.5(8.9-96.5)月vs 30.1(6.7-84.3)月,P0.05]。CD117+患者PFS和OS明显延长[22.9(1.0-94.3)月vs 20.3(2.0-84.3)月,33.9(7.4-93.5)月vs 31.4(6.7-89.7)月,P0.05]。Kaplan-Meier分析CD56和CD117阳性与阴性患者的PFS曲线和OS曲线存在显著性差异(P0.05)。结论:CD56+和CD117+患者的预后明显优于CD56-和CD117-患者,CD56-和CD117-患者染色体异常核型的发生率明显增加。     

人Ha-ras基因中蛋白质特异结合DNA位点的鉴定

利用迁移率改变法和DNaseⅠ足纹法观察了Ha-ras癌基因5’端上游序列与特异结合蛋白的相互作用。用限制性内切酶XmaⅠ消化6.6kb Ha-ras基因得到约10个片段,进行3’-末端标记,与T24细胞核提取液反应,经低离子强度聚丙烯酰胺凝胶电泳,发现与蛋白质特异结合的416bp片段,位于Ha-ras基因5’-端上游1230—1646区域内,靠近转录起始点1660bp处(CAP位置)。另一个与蛋白质特异结合的389bp片段,位于转录起始点上游162—551处。     

上海市气候变化和人类活动对植被物候的影响

植被物候是气候和自然环境变化的综合指示器,同时也是研究植物生长发育与气候变化的重要参数。随着经济社会的发展夜间灯光兼具指示人类活动信息和光照强度的特点,成为研究城市生态系统和生态建设的热点。基于此,利用地理探测器分析方法和变量投影重要性指标,从时间和空间尺度上探究温度、降水、辐射和夜间灯光对2001—2020年上海市植被物候进行时空变化分析和归因分析,并结合城区和郊区的差异进一步分析夜间灯光和环境因子对物候的影响贡献。结果表明：2001—2020年上海市城区温度高于郊区约0.63℃,春季物候(start growth of season, SOS)提前郊区10d左右,秋季物候(end growth of season, EOS)推迟郊区7d左右,夜间灯光高于郊区2.9倍并且其重心向沿海方向显著偏移。空间尺度上夜间灯光对SOS的影响权重最大(q=0.15),并且辐射∩夜间灯光的组合驱动对城区和郊区的植被物候影响权重均最大(q_max=0.29)。时间尺度上SOS与温度的关系最密切,且随温度的增加而提前(平均R_温度=-0.24),EOS与夜间灯光的...     

郑州大都市区生态网络构建及格局优化

快速城市化进程致使生态环境的保护和优化问题日益突出,构建生态网络体系、规划引导生态价值和高效利用景观效应,对区域调节生态空间、促进当地可持续发展具有重要意义。以郑州大都市区为例,基于1980—2020年8个时间节点土地利用数据,运用ArcGIS、Guidos Toolbox和Conefor等工具,通过未来土地利用变化情景模拟预测未来土地格局、形态学空间格局分析识别景观要素、最小累积阻力构建综合阻力面、引力模型计算生态引力、水文分析创建阻力路径和网络结构评价等,判别研究区生态源地、生态廊道和生态节点,构建具有较高结构完整度的生态网络。结果表明：在研究区的9个源地中,黄河流域生态源地连接网络东西部大型集中源地,其余源地坐落于研究区东北、东南及西南部,整体半环绕郑州主城区分布;最小成本路径共163条,生态廊道共58条,其中,一、二、三级廊道分别为10、19和29条,以沿黄河流域、“三横三纵”和“点-轴”形式分布为主;研究区内共判定生态节点70个,并划分为战略点、自然生态点及人工环境点,分别为10、27和33个,其分布于各个源地核心和廊道交叉等关键性节点位置。生态网络包含研究区所有景观要素,并...     

表皮生长因子对肝细胞醋氨酚急性损伤的保护作用

本工作采用无血清培养的小鼠原代肝细胞制备了醋氨急性肝损伤模型,然后利用该模型观察了表皮生长因子（ＥＧＦ）对肝细胞的保护作用。结果如下：（１）小鼠原代肝细胞无血清培养液中加入终深度度为２０ｍｍｏｌ／Ｌ的醋氨酚培养１２－１４ｈ后,培养液中ＧＰＴ和ＧＰＴ的活性明显升高,可作为一种适当的肝细胞损伤。（２）提前１ｈ加入不同剂量（５０,１００,５００,１０００ｎｇ／ｍｌ）的ＥＧＦ可减轻醋氨酚相起的肝细胞损伤。