一株福氏志贺氏菌噬菌体的分离鉴定及其生物学特性

【背景】志贺氏菌是一类能引起人和动物腹泻的致病菌,由于抗生素滥用导致其耐药问题日益严重,寻找新的抗菌药物和治疗方法成为目前亟待解决的问题。【目的】检测志贺氏菌对肉鸡的致病性,分离纯化出一株可裂解强致病性志贺氏菌的噬菌体,并对其生物学特性进行研究。【方法】从病鸡肠道黏膜分离志贺氏菌;以健康肉鸡为动物模型进行攻毒,测定强致病性菌株的耐药性;并以此为宿主菌分离噬菌体,聚乙二醇(Polyethylene Glycol,PEG)沉淀法纯化浓缩噬菌体后,用透射电子显微镜观察其形态特征。利用双层平板法测定噬菌体的宿主谱、最佳感染复数、一步生长曲线、pH和热稳定性对噬菌体活性的影响。【结果】分离得到26株志贺氏菌,分别命名为BDS1-BDS26,其中BDS8致病性最强,经鉴定属于福氏志贺氏菌,而且存在多重耐药性,灌喂后的肉鸡出现严重腹泻和血便;解剖病症主要表现为心脏肥大、肠系膜出血明显等。以BDS8为宿主菌,分离得到噬菌体ΦDS8。透射电镜结果显示噬菌体ΦDS8的头部呈二十面体形状,直径61±2 nm,尾长165±2 nm,属长尾噬菌体科。噬菌体ΦDS8在pH 4.0-10.0、50℃以下范围内能保持较高活性,感染周期约为120 min,其中包括75 min的潜伏期和45 min的暴发期,暴发量为52 PFU/cell。【结论】噬菌体ΦDS8具有宿主特异性,在常规环境下具有较好的耐受能力,为噬菌体治疗福氏志贺氏菌病提供理论依据。     

高压氧治疗糖尿病视网膜病变的研究进展

糖尿病视网膜病变是糖尿病最常见、最主要的微血管并发症之一,具有高发病率,高致盲率的特点,严重影响了人类的生存质量。控制高血糖和改善组织缺氧无疑是防治糖尿病微血管病变的有效方法。如果对糖尿病视网膜病变及时进行治疗,能延缓其发展并能提高病人的生活质量。近年来,随着对糖尿病发病机制的深入研究,很多方法用于防治糖尿病视网膜病人都取得了一定的疗效。而高压氧治疗是许多急慢性疾病的首选治疗方法。已有基础和临床研究证实,高压氧治疗对糖尿病视网膜病变安全有效。因此,作为一种新疗法,高压氧疗法可能会为糖尿病视网膜病变的治疗带来更广泛的应用前景。     

睾丸间质细胞在小鼠生精恢复过程中的作用

研究睾丸间质细胞对小鼠生精恢复过程的作用,可以为深入理解睾丸精原干细胞与其微环境(体)细胞间的相互关系提供实验证据。选取8周龄健康C57近交系成年雄性小鼠60只,腹腔注射22 mg/kg白消安建立小鼠精子发生受阻模型,随机分成1,2-二甲磺酸乙烷(ethane 1,2-dimethanesulphonate,EDS)处理组、氟他胺处理组和对照组,每组20只,3 d后分别给予EDS腹腔注射(100 mg/kg)、氟他胺埋植,对照组仅注射溶剂、埋植空管,分别在处理后的1个月内每周采样,Real-time RT-PCR检测CSF1、Gdnf、PLZF和Nanog m RNA表达水平,Gdnf蛋白水平表达,并在4周时进行睾丸组织HE染色,观察组织学变化并对相关指标进行量化分析。结果表明,小鼠睾丸间质细胞去除及雄激素受体阻断均能促进睾丸损伤后的生精恢复过程,但是,受体阻断的效果更强,说明间质细胞除了通过雄激素发挥作用外还直接对生精恢复起着一定的促进作用,这种促进作用可能是通过分泌CSF1等细胞因子来实现的。     

海马与新皮质组织特异性GABRG2基因敲除小鼠模型的构建及其在遗传性癫痫伴热性惊厥附加症中的初步研究 *

建立基于Cre/loxp重组酶系统调控的海马和新皮质特异性GABA_A受体γ2亚基(GABRG2)基因条件基因敲除小鼠模型,为深入研究海马区和新皮质GABRG2在癫痫发生中的功能作用提供动物模型.将引进的GABRG2 ^fl/wt转基因小鼠与海马和新皮质特异性表达Cre ^+/+重组酶工具鼠分别进行繁配和鉴定,然后再将2种小鼠进行杂交并对其子代小鼠的基因型进行鉴定,其子代基因型为GABRG2 ^fl/wtCre ⁺的小鼠为构建的海马区和新皮质特异性GABRG2基因条件性敲除小鼠.利用PCR技术鉴定小鼠基因型,Real-Time PCR和Western blot技术检测GABRG2基因在小鼠海马和新皮质中的mRNA水平和蛋白质水平的表达情况.PCR结果显示子代小鼠基因型符合GABRG2 ^fl/wtCre ⁺;海马与新皮质特异性GABRG2基因敲除小鼠海马和新皮质中GABRG2的mRNA水平和蛋白质水平显著低于对照组;热造模过程中,实验组小鼠癫痫发作更明显.利用Cre/Loxp技术成功构建了海马与新皮质GABRG2基因敲除小鼠,可为进一步研究GABRG2在癫痫发生中的作用机制奠定基础.     

东北三省6株肾综合征出血热病毒生物学性状的研究

肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)是我国重点防治的急性传染病,对于流行于不同地区的汉坦病毒(hanatavirus)进行分离和系统地鉴定,可以为HFRS的防治提供科学依据,特别是对流行株血清型及基因型的确定,是研制疫苗和确定防治重点及对策的重要前提,也为研究我国汉坦病毒的遗传和进化特征奠定了基础。研究对6株流行于东北三省的汉坦病毒进行了全面鉴定,其中H8205、H8207株为人源性汉坦病毒,其余均为鼠源性汉坦病毒。研究表明,6株病毒具有病毒型别明确,抗原性较为广谱,免疫原性好,在Vero细胞上适应能力强及病毒滴度高,以及来源及传代历史清楚等特点,适合作为双价HFRS纯化灭活疫苗候选毒株,并且可建立起完善和合格的生产用毒种库,为我国生产以Vero细胞为基质的双价肾综合征出血热纯化灭活疫苗奠定了坚实的基础。     

内蒙古白绒山羊若干数量性状遗传参数的研究

本研究应用女母回归法、公畜内女母回归法、半同胞相关法和单元内半同胞相关法对内蒙古阿尔巴斯白绒山羊的产绒量、绒厚、毛长、体重、绒伸直长度和细度等六个性状的遗传参数进行了估测。结果表明：（1）绒量遗传力介于0.26～0.45之间;绒厚遗传力介于0.33～0.56之间;毛长遗传力介于0.23～0.32之间;体重的遗传力介于0.16～0.36之间;绒伸直长度遗传力为0.24;绒细度的遗传力为0.14。（2）产绒量与绒厚、绒厚与毛长、长度与绒厚、长度与毛长的遗传相关分别介于0.33～0.79、0.51～0.69、0.38～0.60、0.74～0.90之间,存在较强的正向遗传相关;绒量与毛长、绒量与体重、绒厚与体重、细度与绒厚、细度与绒量、细度与体重的遗传相关分别为0.11～0.38、0.06～0.17、0.15～0.36、0.02～0.11、0.24～0.35、0.13～0.32之间,存在较弱的正向遗传相关;毛长与体重、长度与绒量、长度与体重、长度与细度、细度与毛长之间的遗传相关介于-0.14～-0.28、-0.09～-0.20、-0.18～-0.23、-0.27～-0.31、-0.17～-0.28之间,存在中等偏弱的负向遗传相关。（3）绒量、绒厚、毛长、体重的重复率分别为0.42、0.27、0.59、0.18。 Abstract：Daughter-dam regression, daughter-dam regression wit hin sire, half-sib correlation and intro-unit half?sib correlation were used in the study to estimate genetic parameters for several traits of Albas type of In ner Mongolia cashmere goats, Traits included in this paper were cashmere yield ( CY),cashmere thickness(CT),staple length(SL),body eight(BW),cashmere stretched length(CSL) and cashmere fineness(CF).The results showed: (1)Heritabilities for CY,CT,SL and BW ranged between 0.26 and 0.45,between 0.33 and 0.56, between 0.23 and 0.32 and between 0.16 and 0.36 respectively; Heritabilities for SL and CF were 0.24 and 0.14 respectively.(2)Genetic correlations between CY and CT,between CT and SL ,between SL and CT and between CST and SL ranged 0.33～0. 79, 0.51～0.69, 0.38～0.60, and 0.74～0.90,respectively,and they belonged to high positive one;Genetic correlations between CY and SL, between CY and betw een CY and BW,between CT and BW, between CF and CT, between CF and CY and betwe en CF and BW ranged 0.11～0.38, 0.06～0.17,0.15～0.36, 0.02～0.11, 0.24 ～0.35 and 0.13～0.32,respectively, and they belonged to low positive correla tion;Genetic correlations between SL and BW, between SL and CY,between SL ?and BW, between? SL and CF and between CF and SL ranged -0.14～-0.28, -0.09～-0 .20, -0.18～-0.23,-0.27～-0.31,and -0.17～-0.28,respectively,and they belonged to low negative correlations.(3)Repeatabilities for CY,CT,SL and BW were 0.42,0.27,0.59 and 0.18,respectively.     

旌节花科及其相关类群的分支分析

选取生长习性、植物形态、木材解剖、花的形态结构、花粉特征以及胚胎学和染色体数目等共72个性状,采用最大简约法（Maximum Parsimony,MP)对旌节花科及其相关类群五桠果科、猕猴桃科、山茶科、金莲木科和省沽油科等进行分支分析。并用靴带检验法（Bootstrap)计算内部分支的支持率。分支图表明,旌节花科与省沽油科组成姊妹群,靴带支持率为79％,表明旌节花科与省沽油科具有最为密切的关系。旌节花科与猕猴桃科的关系次之,旌节花科和省沽油科与猕猴桃科关系的靴带支持率为58％。然后是山茶科。而旌节花科与金莲木科和五桠果科的关系则依次疏远。这与我们在孢粉学和胚胎学研究中所得的结论在某些方面是基本一致的。与Nandi等人用形态学数据和分子数据分析得到的结论也比较吻合,他们的结论也认为旌节花科与省沽油科具有比较密切的关系。只是他们把五桠果科和金莲木科摆在更近的位置,而山茶科和猕猴桃科则放在较疏远的位置上。     

Mnk2与CBCVHL泛素连接酶E3复合物的相互作用

Mnk2即MAPK相互作用的激酶-2(MAP kinase-interacting kinase-2, Mnk2)是MAPK激活的蛋白激酶之一, 具有磷酸化真核翻译起始因子eIF4E(Eukaryotic translation initiation factor 4E)的作用, 但是eIF4E磷酸化的生理功能以及Mnk2在蛋白翻译过程中的确切地位并不清楚. 除了eIF4E外, Mnk2生理底物尚缺乏鉴定. 为了进一步寻找Mnk2新的生理底物, 揭示Mnk2的生理功能, 我们以Mnk2为“诱饵”, 运用酵母双杂交系统发现Mnk2能够与VHL(von Hippel-Lindau tumor suppressor), Rbx1(ring-box 1)和Cul2(Cullin2)相互作用, 并在哺乳动物细胞中验证了Mnk2和VHL的结合. 由于VHL, Rbx1和Cul2均为CBCVHL泛素连接酶E3复合物成分, 所以Mnk2参与了CBC^VHL泛素连接酶E3复合物的相互作用, 可能是其新的泛素化底物. 此外, 在酵母双杂交系统中, Mnk2还与VHL结合蛋白-1(von Hippel-Lindau binding protein 1, VBP1)相互作用, 由于VBP1在细胞骨架蛋白的成熟过程起重要作用并与胚胎形态的发生有关, 所以Mnk2可能还参与了细胞形状的调控.     

转基因棉花中糖类和游离氨基酸含量的变化对棉蚜泌蜜量及蜜露主要成分的影响

以3个转基因棉和2个亲本对照棉花品种为研究材料,分别测定了这5种棉花植株体内主要糖分与游离氨基酸含量;同时,分别用这5个棉花品种的叶片饲养棉蚜Aphis gossypii Glover并测定其蜜露分泌量及其主要营养成分。结果表明,转基因棉花“国抗22”叶片中葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的平均含量及可溶性糖总量分别比亲本对照棉“泗棉3号”减少61.76%、 89.05%、77.86%和23.61%,转基因棉花“苏抗103”和“中抗310”叶片中葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的平均含量及可溶性糖总量分别比亲本对照棉“苏棉12”下降14.15%、32.80%、92.22%、11.46% 和4 6.81%、93.19%、61.11%、43.91%,游离氨基酸总量及各种氨基酸、果糖、鼠李糖、海藻糖的含量在不同转基因棉与亲本对照棉花品种间也存在很大差异,其中一些处理间的差异达显著或极显著水平。这表明外源基因的导入已经影响到了转基因棉花品种中主要糖分与游离氨基酸的合成。棉蚜取食转基因棉花品种“国抗22”后,蜜露的日平均分泌量比取食对照品种“泗棉3号”减少40.54%,取食其他两个转基因棉花品种“苏抗103”和“中抗310”后蜜露的分泌量也比取食对照棉花品种“苏棉12”降低22.67%和30.0%,但棉蚜取食转基因棉花后蜜露中游离氨基酸的总量均高于对照棉花品种,蜜露中可溶性总糖、蔗糖和各种氨基酸含量在取食转基因棉和常规棉花品种间存在一定差异。     

178例小儿肺炎分离菌分布和耐药性分析

目的 了解小儿肺炎病原菌谱及耐药性。方法 对2003～2004年178例小儿肺炎的痰标本进行细菌学培养,测定药物敏感性。结果 分离菌中,以革兰阴性菌居首位．占58．51％。肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌为主琴芦种,对亚胺培南、美罗培南的耐药性最低;其次为革兰阳性菌,占40．43％,以金黄色葡萄球菌为主,耐甲氧西林的葡萄球菌为57．1％,对万古霉素、替考拉宁最敏感。结论 小儿肺炎病原菌以革兰阴性菌为主,并且出现多重耐药。临床上应避免盲目经验性用药,减少或减缓细菌耐药的发生。