维吾尔族正常黑胆质人群肠道菌群的分布情况分析

目的：了解维吾尔医学正常黑胆质人群肠道菌群分布情况、多样性并优势菌。方法：对健康人进行维吾尔医学体液分型并挑 取其中正常黑胆质人群,采集受检者粪便样品,提取总DNA,设计一对通用引物扩增16S rDNA 的V6～V8 可变区,扩增出来的 PCR产物稀释并进行变形梯度凝胶电泳DGGE,从DGGE 指纹图谱中选择条带,切胶回收、克隆、序列测定。结果：通过实验得到 了反映肠道菌群结构特征的DNA指纹图谱,从指纹图谱上选择一些特异性条带切下来回收,重新纯化扩增出来并测序,测出来 的基因序列在基因库进行比对检测相似性程度。最终用相似性程度大于95%以上的序列比对做出进化树了解菌群之间的亲缘 性。结论：正常黑胆质人群肠道菌群基因序列的亲缘性结果显示黑胆质人群肠道菌群具有丰富的多样性,其中肠道优势细菌乳酸 杆菌属GU269544.1 占优势。     

小麦60Co诱变后代品质性状变异及高分子量谷蛋白亚基突变体鉴定

用300 Gy的60Co-γ射线辐射小麦品种涡9722的干种子,对M4代341个株系的蛋白质含量、湿面筋含量、沉降值、硬度进行变异分析,以超过群体均值±2×标准差为标准筛选出8个蛋白质与湿面筋含量较高的株系和4个蛋白质与湿面筋含量较低的株系。在M5代,进一步对这12个株系的品质性状、粉质参数和高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)进行了分析。结果表明,M5代部分变异株系的品质性状与亲本差异显著,粉质参数变异较大,11个变异株系与亲本具有明显不同HMW-GS谱带。亲本的HMW-GS组成为5+14+15+9+12,而变异株系的HMW-GS为1+5+7+9+12亚基或1+5+7+8+12亚基,说明这些株系的麦谷蛋白位点发生了变异。     

C-MET在大鼠胰腺发育过程中的表达

目的:研究CMET在大鼠胰腺发育阶段的表达和细胞定位.方法:运用RT-PCR和WesternBlot技术分别检测C-MET在大鼠胰腺发育阶段的mRNA和蛋白表达水平;运用免疫组化和免疫荧光技术检测不同时期C-MET在胰腺的组织细胞学定位.结果:RT-PCR结果显示E18.5 C-METmRNA高表达.Western Blot结果显示其蛋白在P14,P21高表达,并存在两种亚型,分子量分别为190KD和170KD.免疫组化和免疫荧光结果显示在不同发育时期C-MET在胰岛B细胞和间充质细胞都有表达.结论:C-MET在大鼠胚胎发育后期及生后出现高表达,并表达于胰岛B细胞和间充质细胞,可能参与了胰岛形成、结构重塑和功能维持.     

间皮素Mesothelin对大鼠胰岛结构形成和重塑作用的研究进展

大鼠胰腺发育的过程分为以细胞增生、分化为主的早中期及以结构形成、功能完善为主的后期这两个阶段,后期涉及胚胎后期胰岛结构形成和生后胰岛结构重塑.而β细胞的功能完善需要多种细胞迁移和细胞间支持黏附因子的介导,其中表达于β细胞的问皮素(Mesothelin)对细胞间的信号识别以及相互黏附有重要的作用.Mesothelin也是胰腺癌等多种恶性肿瘤的细胞表面标记物.有关Mesothelin在大鼠胰岛结构形成和结构重塑过程中的作用及其与胰腺癌形成关系的作用正处于研究之中.     

大鼠E12.5胰腺间质细胞原代培养及鉴定

目的:体外分离培养大鼠胚胎胰腺间质细胞(pancreas mesenchymal cells).方法:以孕12.5天(E12.5)的大鼠胚胎为组织来源,通过显微分离得到E12.5的胚胎胰腺,在鼠尾胶原包覆的六孔板内进行组织块培养,观察培养过程中胰芽的形态变化,间质细胞的长出,并用细胞免疫荧光的方法对间质细胞进行了鉴定.结果:显微分离得到了胚胎胰腺,为间质细胞群包绕着上皮细胞团的结构,培养第二天即发现间质细胞的长出,培养第四天时得到间质细胞群,免疫荧光鉴定为vimentin 阳性的间质细胞.结论:本方法通过大鼠E12.5胚胎胰腺显微分离.体外培养出原代胚胎胰腺间质细胞,为进一步研究大鼠胰腺间质细胞的功能提供实验平台.     

华北落叶松夜间树干液流特征及生长季补水格局

在宁夏六盘山北侧半干旱区的叠叠沟小流域,采用热扩散探针法在2011年生长季监测了华北落叶松(Larix principisrupprechtii)人工林的树干液流速率,分析了夜间树干液流和补水量的变化特征及与气象、土壤水分等环境因子的关系.结果表明:树干液流速率日变化表现为典型的单峰宽峰曲线,且整个生长季均存在微弱的夜间液流,一般表现为逐渐减小,特别是在晴天,且晴天的变幅显著大于雨天.除生长季中期雨天夜间液流平均速率显著高于晴天,生长季初期及末期雨天与晴天的差异并不显著.生长季内,夜间树干补水总量为11.03 mm,占总蒸腾量的7.22％;5月份的树干补水量最大(4.19mm),其他月份的树干补水量明显减小,在0.9-1.7mm的范围波动.但不同月份间的补水贡献率存在明显差异,表现为生长季末期(9、10月)＞初期(5月)＞中期(6-8月).相关分析表明,日补水量与各气象因子关系不大,仅与降水量显著正相关(P＜0.05),与土壤含水率、日间蒸腾量、日蒸腾总量极显著正相关(P＜0.01).夜间补水的月蒸腾贡献率与月均土壤含水率、月均气温、月均日间蒸腾量、月总蒸腾量等显著相关(P＜0.05);而夜间补水的日蒸腾贡献率与日最高气温、日均气温、日间蒸腾量、日均饱和水汽压差、日总蒸腾量、日均太阳辐射强度、日最低气温、日均空气相对湿度、日降水量、土壤含水率等极显著相关(P＜0.01),经逐步回归分析建立了日补水量蒸腾贡献率与环境因子的多元线性模型.     

大鼠胰腺发育不同阶段基因表达分析

目的:探讨大鼠胰腺发育不同阶段基因表达规律.方法:运用高通量基因芯片技术检测大鼠胰腺从胚胎12.5天(E12.5)到成年不同时期基因表达情况.结果:基因芯片所涵盖的基因59%在E12.5有表达,65%在15.5有表达,63%在E18.8有表达,53%在新生胰腺中有表达,38%在成年胰腺中有表达.E18.5相对于E15.5表达上调的基因中代谢相关的酶类有121条,占上调基因的18.2%,E18.5相对于E15.5表达下调的基因主要是一些转录因子和骨架蛋白.结论:在大鼠胰腺的发育过程中,早中期以细胞分化为主,而后期则是以细胞功能成熟为主.     

卵泡刺激素受体短肽的表达及纯化

目的:表达人卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)N端第18-34氨基酸片段.方法:将FSHR N端第18-34氨基酸片段克隆p-pGEX4T-1中,构建成重组质粒pGEX4T-1-FSHRN(18-34位氨基酸).将该重组质粒转化E.coli BL21后,IPTG诱导其表达,经亲和层析进行分离纯化,western blot鉴定.结果:克隆成功,并表达FSHRN端第18-34氨基酸片段,所表达的融合蛋白中60%为可溶性蛋白.结论:成功克隆、表达、纯化了人FSHRN端第18-34氨基酸片段,为后续动物免疫试验提供抗原.     

胎膜组织贴壁细胞：一种新的间质干细胞来源

[目的] 建立体外分离纯化胎膜组织贴壁细胞（fetal membrane derived adherent cells,FMDACs）的方法,并且研究FMDACs的基本生物学特性。[方法] 用胰酶消化法分离FMDACs,体外传代培养,并进行向成骨、成脂细胞的诱导分化培养,流式细胞仪、免疫细胞化学检测表面抗原,核型分析及致瘤性实验。[结果] 成功地进行了FMDACs的原代培养及传代培养,FMDACs具有良好的增殖能力,表达CD44、CD29,不表达CD34、CD14、CD45,经诱导后能够分化为成骨细胞和成脂细胞,传代多次后核型正常,无致瘤性。[结论] 胎膜组织中可以分离得到具有间质干细胞特性的贴壁细胞,具有较强的自我更新和多向分化能力,遗传背景稳定无致瘤性。FMDACs为临床应用进行细胞治疗和基因治疗提供了新的来源。     

八株芽孢杆菌菌株的分类及固氮活性的测定

从8个省市的不同土壤分离了200个菌株,筛选出8株（JR₁,JR₂,JR₅,ZZ₃,ZZ₁₂,ZZ₁₆,M₁,K₄）能在无氮培养基上生长良好的典型的芽抱杆菌,其中6株（JR₁,JR₂,JR₄和ZZ₃,ZZ₁₂,ZZ