PDGF-C 3'UTR区荧光素酶报告基因载体构建

目的:构建不同长度包含目的片段的PDGFC 3`UTR双荧光素酶报告基因载体,为进一步研究PDGF-C mRNA的上游miRNA调节做准备。方法:培养人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞,提取腺癌细胞系MDA-MB-231细胞的基因组DNA,以提取的基因组为模板,通过PCR扩增不同长度的PDGFC 3`UTR片段,经胶回收后,将回收的目的片段插入报告基因载体SV40-p GL3中,再经转化将克隆好的载体转入细菌内扩增(先在固体培养基上扩增为菌落,然后再接种进液体细菌培养管中扩增),扩增细菌后进行质粒提取,并进行菌落PCR及双酶切鉴定,最后送公司进行基因序列检测鉴定。结果:成功构建了不同长度目的片段的PDGFC 3`UTR的双荧光素酶报告基因载体。结论:本实验构建了不同长度的PDGF-C mRNA的3’UTR区的双荧光素酶报告基因载体,为进一步研究PDGF-C mRNA的上游miRNA调节打下了基础。     

皱叶肾蕨卷曲叶尖的离体培养（简报）

从皱叶肾蕨卷曲叶尖的离体培养中所诱导的绿色球状物(GGB)为中间继代物,建立了组培快速繁殖方法,并发现,在一定量 NAA配合下,BA有利于GGB的诱导,2iP促进丛生苗的再生,IBA可能对丛生苗上匍匐茎的诱导有促进作用。     

潜力巨大的食品生物技术：转基因食品发展状况与效益

食品工业是生物技术应用的重要领域,利用生物技术可将农副产品原料加工成产品并产业化,进行二次开发形成新的产业,同时借助生物技术改造传统工艺提高产量和质量。因此,食品生物技术产业已逐渐成为食品工业的支柱,生物技术本身也将成为全球性的食物、环保和健康等问题的有效解决提供有力支撑。     

转基因食品发展状况与效益

从1996年转基因作物首次规模化应用以来,转基因食品已经历了13年的发展.截至2008年,全球已有25个国家批准转基因作物商业化种植,全年种植面积达1.25亿公顷,产值达75亿美元,13年间增长了84倍.转基因食品在飞速发展的同时带来了巨大的经济和社会效益,并且得到日益广泛的认同和接受.     

低分子硫酸软骨素在兔软骨修复过程中对IL-1β、TNF-α和TGF-β及钙磷的影响 和TGF-茁及钙磷的影响*

摘要目的：探讨低分子量硫酸软骨素(CS)在兔软骨修复过程中对于IL-1β、TNF-α和TGF-β及血液中钙磷含量的影响。方法：36 只成年新西兰大白兔，随机分成6 组，分别为对照组、模型组、低分子量CS低剂量组、低分子量CS 高剂量组、高分子量CS低剂 量组、高分子量CS高剂量组，每组6 只。通过在实验兔股骨髁关节面部位，钻出直径3mm，深度3mm的缺孔，造成其关节软骨的 缺损。术后次日给予药物进行灌胃，每日1次，5 周后取材。采用酶联免疫法测定关节液中IL-1β、TNF-α和TGF-β的含量，同时用 全自动生化分析仪及其配套的试剂盒来测定兔血清中钙，磷含量。结果：低分子量CS 和高分子量CS都能够减少关节液中炎性因 子的含量和增加TGF-β的含量，且与模型组相比具有统计学意义(P<0.05)；同时低分子量CS 与高分子量CS相比效果较好 (P<0.05)；而高低剂量之间无统计学意义(P>0.05)。与模型组相比，给予CS的组别，其血清中的钙磷含量相对较少(P<0.05)，但都高 于对照组。结论：高、低分子量的CS都可以增加TGF-β的含量，降低IL-1β、TNF-α和血清中钙、磷的含量。而对于软骨修复，这可 能是通过对上述因子的影响，从而产生积极的作用。     

东北三省水稻生长季农业气候资源及障碍型冷害的时空特征

基于东北三省1981—2017年逐日地面观测资料和农业气象观测站水稻生育期资料,结合水稻障碍型冷害指标,分析东北三省水稻生长季特别是孕穗-开花期光、温、降水资源以及障碍型冷害的时空分布特征。结果表明: 1981—2017年,东北三省水稻生长季农业气候资源呈暖干变暗趋势,≥10 ℃活动积温和日照时数增幅分别为73.5 ℃·d·(10 a)^-1和17.7 h·(10 a)^-1,降水量减幅为8.9 mm·(10 a)^-1。水稻孕穗期,农业气候资源呈暖干变暗趋势,日平均温度升幅为0.27 ℃·(10 a)^-1,日照时数和降水量降幅分别为2.06 h·(10 a)^-1和1.90 mm·(10 a)^-1;水稻开花期,农业气候资源呈暖湿变暗趋势,日平均温度增幅为0.12 ℃·(10 a)^-1,日照时数减幅为0.83 h·(10 a)^-1,与孕穗期相反,水稻开花期降水量呈增加趋势,增幅为1.35 mm·(10 a)^-1。气候变暖背景下,水稻障碍型冷害发生频率和强度在大部分地区呈减少趋势,发生频率和强度存在显著的年代际变化特征。研究期间,黑龙江省孕穗开花期发生障碍型冷害次数最多,强度最高,吉林省次之,辽宁省最少。     

核酸切割酶在病原微生物检测中的研究进展

DNA是遗传信息的重要载体,其空间构象折叠性质使其具有很多的功能。利用核酸切割酶(cleaving DNAzyme)识别特定单链DNA分子并能够切割其中某条单链的性质来构建传感器,将特异性识别过程转化为凝胶电泳表征、释放荧光、比色现象的信号输出,同时能很好的和扩增反应结合来实现信号放大。核酸切割酶通过体外筛选技术获得,可以与靶物质(小分子、蛋白质,甚至整个细胞)特异性结合。由于具有制备简单,易于修饰和良好稳定性等优点,核酸切割酶被用于构建生物传感器以检测病原微生物,已应用到现场检测甚至医疗中的体内检测,结合已经成熟的检测设备血糖仪、横流层析试纸条带进行微生物检测,并广泛地应用到生物传感、食品安全、医疗在内的重要领域中。综述了近年来核酸切割酶在微生物检测中的应用,讨论了核酸切割酶在微生物检测中的切割机理和产物、靶标以及表征手段,探索核酸切割酶在微生物实际检测中的意义。对该技术的发展前景及其面临的问题进行展望,以期核酸切割酶在微生物检测领域能够更好的发展。     

FEN1酶介导的功能核酸生物传感器的研究进展

瓣状核酸内切酶-1(Flap endonuclease 1,FEN1)是一种可以识别三碱基重叠结构(三核酸)并对其进行切割,释放出5’-flap片段的结构特异性酶,并且有着高效稳定的切割效率。基于此种特性,通过不同的信号输出方式,FEN1酶现被用于DNA、RNA、病毒等放大检测中。首先对FEN1酶的发现、性质以及作用方面做了相应介绍,然后根据所检测的靶物质不同,对FEN1酶所介导的生物传感器进行分类,主要包括对单核苷酸多态性的检测、甲基化检测、基因型检测、RNA检测、病毒检测、肿瘤检测和微生物检测等。此外,对FEN1酶与纳米材料的结合以及体内表征及治疗也进行了较为详细的介绍。同时,还对传感器之间的原理、灵敏度、特异性及适用领域等方面进行比较和优缺点的简单评价。最后,对FEN1酶所介导的生物传感器的中存在的不足,以及未来的发展方向进行了展望,旨在为今后研发更便携、更灵敏、更准确的FEN1功能核酸生物传感器提供理论参考。     

转基因植物的食品安全性问题及评价策略

转基因植物经历了20年的快速发展,已经成为21世纪农业的重要支柱之一。转基因植物从诞生以来,其食用安全性一直是科学界、政府和广大消费者关心的焦点问题。各类转基因安全事件层出不穷,严重影响着转基因产业的发展。本文从营养、毒性、过敏性、抗生素抗性、非期望效应等五个方面系统总结了转基因植物食用安全的问题,详细介绍了转基因植物食用安全评价的六大原则以及国际与国内对转基因植物食用安全性评价的内容,最后介绍了我国的转基因植物安全管理体系。以期使读者对转基因植物食用安全问题有一个系统全面的了解。     

Rho激酶抑制剂Y-27632对C3H10T1/2细胞增殖与成脂分化的作用

探究Rho激酶抑制剂Y-27632对间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）C3H10T1/2增殖和成脂分化的影响.实验分为对照组、成脂诱导组和Y-27632处理组（Y-27632+成脂诱导）. 利用MTT检测细胞增殖情况,油红O染色,异丙醇萃取法检测细胞成脂分化情况,半定量RT-PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activiated receptor γ, PPARγ)和CCAAT增强子结合蛋白α (CCAAT enhancer binding protein α, C/EBPα)基因表达. 结果表明,Y-27632能够显著抑制C3H10T1/2细胞的增殖(P<0.05),并呈一定的浓度依赖性;高浓度Y-27632对C3H10T1/2细胞成脂分化具有显著抑制作用（P<0.05）;半定量RT-PCR结果显示,成脂诱导处理组PPARγ和C/EBPα表达量在第3 d、5 d和7 d显著低于成脂诱导组（P<0.05）. 综上所述,Y-27632能够抑制C3H10T1/2细胞增殖与成脂分化.