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51.
表达猪瘟病毒保护性抗原E0蛋白用以建立猪瘟抗体诊断方法,在标记疫苗(Marker vaccine)的研制和应用上具有重要的血清学鉴别功能,对于监测猪瘟病毒的流行情况和疫苗免疫情况及制定免疫程序具有重要作用.将猪瘟兔化弱毒株(HCLV)E0基因分别插入原核表达质粒pGEX4T,pET30,pMAL-p2X中,并分别以BL21和BL21-codonplus(DE3)-RP, BL21(DE3)和BL21-codonplus(DE3)-RP,TB1和BL21-codonplus(DE3)-RP为表达菌株.通过摸索IPTG诱导浓度,诱导温度,菌体收获时间,确定E0基因能在pGEX4T/ BL21-codonplus(DE3)-RP和pMAL-p2X/ BL21-codonplus(DE3)-RP中获得高效表达,表达产量分别占菌体总蛋白的15%和30%,表达的重组蛋白主要为包涵体形式.分别采用B-per试剂和超声波裂解配以曲通尿素对包涵体进行洗涤两种方法在pGEX表达系中取得了较好的效果.使用分步透析法对变性的包涵体进行复性,将复性蛋白过GST亲和层析柱得到纯化的GST-E0融合蛋白.以GST-E0融合蛋白为诊断抗原,通过摸索抗原包被浓度,抗体血清稀释倍数初步建立了用间接ELISA检测猪瘟血清E0抗体的方法,为进一步开发猪瘟抗体检测试剂盒奠定基础. 相似文献
52.
53.
幽门螺杆菌(Hp)可导致人类胃炎、消化性溃疡和胃癌等多种临床表现,但这些类型是否与Hp菌株的不同有关,迄今尚未得到共识。有别于一般文献报道,本文采用多标本、多参数实验设计,对Hp毒力株携带的cag致病岛(cagPAI)的功能进行了检测和分析。 相似文献
54.
中国钩端螺旋体rRNA基因多态性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
以DigdUTP标记的16SrRNA及23SrRNA基因为探针,分析了八个血清群54个血清型64株国内外致病性钩端螺旋体参考株和27株野生株染色体经限制性内切酶EcoRⅠ消化后的rRNA基因限制性图谱。结果发现,91株菌中共有56个核糖核酸型(Ribotype,简称RT),除部分血清群中少数不同的血清型有相同的RT型外,大部分血清型都有独特的RT型,同一血清群往往拥有共同的核心片段;除黄疸出血群的黄疸出血型外,同一血清型的国内和国际参考株的RT型不相同;大多数野生株的RT和相应血清型国内参考株相同,差异也只表现为谱形上个别带型的缺少和增加,所研究的波摩那型野生株的RT型和国际参考株相同而和国内参考株不同 相似文献
55.
56.
黄土丘陵沟壑区生态—经济背景以及小流域优化生态—生产范式 总被引:4,自引:0,他引:4
在全面分析黄土丘陵沟壑区生态-经济敏感带的自然环境、社会经济环境的基础上,深入探讨了区域的优势景观单元——小流域的景观结构和功能,由此提出了构建小流域生态——生产范式的几项原则及范式内容。其中包括以下几项原则:水分平衡和高效利用原则、农林牧复合系统原则、区位优化原则等。范式内容强调小流域景观单元的空间异质性和等级特点,主要包括以村庄为中心的高效农业生产圈层结构模式、坡面梯状生态经济带建设模式、流域生态一经济水平生产模式、流域之间高效能流物流点一轴发展模式以及流域与外界环境的核心一边缘发展模式. 相似文献
57.
用较系统的生理生化试验对国内不同地区人腹泻粪便标本中收集的28株气单胞菌进行了研究,并对气单胞菌属内不同种的细菌生化特性及鉴别试验进行了比较。28株菌属于气单咆菌四个不同的种,其中豚鼠气单胞菌16株(57.1%),亲水气单胞菌6株(21.4%),寡源气单胞菌5株(17.9%),杀鲑气单胞菌1株(3.6%)。 相似文献
58.
一个异源胞质单体附加系小麦的遗传分析 总被引:2,自引:0,他引:2
以长穗偃麦草(Elytrigia elongata=Agropyron elongatum,2n=70)为母本,普通小麦为父本,进行核代换回交,在第九次回交的F_1(BC,F_1)代里,发现了一个异源胞质单体附加系小麦,代号E617。以E617做母本,普通小麦做父本进行杂交,杂种F_1出现正常株和弱株两种类型。正常株具有43条染色体,弱株具有42条染色体。反交,以普通小麦做母本,E617做父本,杂种F_1,无论是具有43条染色体还是具有42条染色体的植株,都是正常的。正反杂交结果表明,长穗偃麦草细胞质对普通小麦的细胞核产生了抑制作用,使核质杂种生长不正常,而附加一条特异的长穗偃麦草染色体(或端体),就能消除长穗偃麦草细胞质的抑制作用,使核质杂种恢复正常生长。 相似文献
59.
60.
以大肠杆菌高频重组品系Hfrc株和福氏志赞氏菌2a51573株进行杂交获得成功。每毫升含菌100亿,37℃杂交110分钟时的二菌杂交频率是0.7~6.0×10一,平均为2.9x10-8。电子显微镜观察到菌细胞间有原生质桥(“性须”)联结的正在杂交现象。在菌液浓度相同情况下,不同杂交时间对杂交频率有一定影响,20一100亿/毫升菌液浓度杂交30分钟时杂交频率最高,达4.8—6.6x10-8,杂交2—3小时为1.7--4.2×10-8,如再延长时间,其杂交频率明显下降。提高菌液浓度到500亿/毫升,并不能提高杂交频率。杂交株兼有二种亲本的某些特性,其子代表现出遗传因子的分离现彖,最容易观祭到的是乳糖发酵的分离。根据若干不同的遗传标记可将204株杂交株的重组类型至少分为10个杂交型。 相似文献