高压液相色谱在测定细菌DNA中鸟嘌呤G加胞嘧啶C克分子百分比方面的应用

1980年初,我们开展了应用高压液相色谱技术。对7株不同种的细菌 DNA 中G C 克分子百分比进行测定工作。结果表明用 Nucleosil C_(18)进行反相分配层析可以快速、简便、灵敏而又精确地测定用过氯酸水解后的 DNA 中 G C 克分子百分比,测定时进样量只需0.2—1微克,测定时间仅为8分钟,重现性好。试验测得数值与文献报导值接近。分子遗传学的研究证明脱氧核糖核酸     

组培繁殖天竺葵

天竺葵是牛儿苗科多年生草本植物。是花叶兼赏的盆栽花卉。其花期长 ,自春到秋开花不断 ,夏初盛花。在园林中也可用于布置花坛绿地 ,因此组培繁殖天竺葵具有重要意义。１ 培养条件（１）愈伤组织诱导培养基 :ＭＳ ６ -ＢＡ０．５ｍｇ Ｌ １（单位下同） ２ ,４ -Ｄ０．１２     

MMP-9和PTEN在胶质瘤中的表达及相关性分析

目的：检测脑胶质瘤组织中MMP-9和PTEN表达情况并探讨其意义。方法：采用免疫组织化学S-P法检测50例脑胶质瘤、10例正常脑组织中两者的表达。结果：脑胶质瘤组织中MMP一9和PTEN表达定位于细胞浆,其阳性表达率分别为74．00％（37／50）和60．00％（30／60）与正常脑组织0、100％有差异（P〈0．05）。两者的表达与胶质瘤患者的年龄、性别无明显相关性（P〉O．05）,但高级别组与低级别组之间表达有差异,具有统计学意义（P〈0．05）;在脑胶质瘤组织中MMP-9蛋白的阳性表达与PTEN蛋白的阳性表达有相关性,二者呈负相关（P〈0．05）。结论：MMP．9蛋白在胶质瘤组织中的表达明显高于正常脑组织,并且高级别胶质瘤组的表达明显高于低级别胶质瘤组中的表达,提示MMP-9可能与胶质瘤的浸润、发展、转移有关,可作为一个预测胶质瘤侵袭转移能力的肿瘤标志物。PTEN蛋白在正常脑组织中的表达明显高于胶质瘤,且高级别组表达明显高于低级别组,提示PTEN基因突变或缺失在胶质瘤的发生发展中起重要作用,且与肿瘤恶性分化程度密切相关,表明PTEN的失活预示着一个特殊的进展性的临床行为,在胶质瘤恶性进展中属于较晚发生的分子事件。     

Hsa_circ_0000745对肝癌细胞增殖、侵袭、迁移的作用及其机制

该文主要研究环状RNA hsacirc0000745对肝癌细胞的促肿瘤作用及其相关作用机制。首先,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法检测不同肝癌细胞中环状RNA hsacirc0000745的表达;其次,利用siRNA干扰技术敲低HepG2细胞中的hsacirc0000745;然后,采用CCK-8和平板克隆实验检测细胞的增殖能力,用Transwell实验和划痕愈合实验检测肝癌细胞HepG2的侵袭及迁移能力,利用Western blot方法检测增殖、侵袭及迁移相关蛋白的表达。结果表明,干扰hsacirc0000745后,肝癌细胞的增殖及克隆形成能力降低(P<0.05),同时伴有增殖相关蛋白cyclin D1表达水平下降(P<0.001),细胞迁移和侵袭能力降低(P<0.05),上皮标志物E-Cadherin的表达水平上调(P<0.05),而间质标志物N-Cadherin和Vimentin的表达水平下调(P<0.05)。该研究结果表明,干扰hsacirc0000745显著抑制肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力和上皮–间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)。这为肝癌的诊断和治疗提供了新的潜在靶点和视角。     

P53抗体联合CYFRA21-1和CEA在非小细胞肺癌中的应用

目的:研究血清P53抗体在非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系,并结合血清中的癌胚抗原、角质蛋白21-1以指导对临床上肺癌复发和转移的分析,用来选择合理的治疗方案。方法:正常组30例,肺良性疾病组10例,肺癌组45例,肺癌全组分别于手术前1天、术后10、30、60和90天时抽取清晨空腹静脉血2ml,23例肺癌病例于手术后120天,15例病例于手术后180天抽取清晨空腹静脉血2ml,肺良性疾病组分别于手术前1天、抽取清晨空腹静脉血2ml。正常组清晨空腹采集静脉血2ml。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清P53抗体和角质蛋白21-1,采用荧光酶标免疫法检测血清癌胚抗原。结果:血清P53抗体、CYFRA21-1和CEA在正常人组、良性疾病组、肺癌组术前阳性率的比较三种肿瘤标志物阳性率经X2检验,在肺癌组分别与正常人组和良性病例组有显著性差异(P<0.05),良性病例组和正常人组之间无显著行差异(P>0.05)。并与手术后复发与转移相关。结论:联合检测癌胚抗原、角质蛋白21-1及血清P53抗体水平有助于肺部良恶性疾病的诊断;手术前后动态测定肺癌患者血清P53抗体和角质蛋白21-1的变化规律,有助于判断疗效,监测预后和指导肺癌术后的综合治疗。     

慢性铝暴露对大鼠海马神经元PKC、CaMKⅡ、Ng 的影响

通过研究慢性铝暴露对大鼠学习记忆和海马长时程增强 (long-term potentiation, LTP) 的影响,并检测海马神经元蛋白激酶Ｃ(protein kinase c, PKC) 活性及Ca²⁺钙调蛋白激酶Ⅱ(Ca²⁺calmodulin dependent protein kinase Ⅱ, CaMK Ⅱ) 和神经颗粒素(neurogranin, Ng) 蛋白表达的变化,探讨铝暴露损害学习记忆的作用机制.选用断乳后 Wistar 大鼠,以含有不同浓度 AlCl₃ 的蒸馏水进行饲养.3 个月后,测定铝暴露组大鼠脑内和血中的铝含量;测量记录大鼠海马群体峰电位(population spike,PS)LTP;用改良 Takai 法测定海马神经元 PKC 活性变化;Western 印迹法检测 CaMK Ⅱ和Ng的蛋白表达.结果显示,与对照组相比,铝暴露组的 PKC 活性降低,差异有统计学意义 (P<0.01);与对照组相比,铝暴露组的CaM Ⅱ蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,铝暴露组的 Ng 蛋白表达降低,且差异有统计学意义(P<0.05).实验结果说明：慢性铝暴露可以降低大鼠海马神经元 PKC 的活性及 Ng 和 CaMKⅡ 的蛋白表达,可能影响 Ng 磷酸化水平,从而影响 CaM 与 Ng 之间的亲和性,也影响 Ca²⁺CaM 对 CaMKⅡ 的调节,抑制 LTP 的形成,损害学习记忆的功能.     

MRI 在宫颈癌分期中的应用价值

目的:探讨宫颈癌的MRI表现与分期,评价其诊断价值及临床意义。方法:由2名经验丰富的妇科肿瘤医师前瞻性地对80例宫颈活组织病理检查证实为宫颈癌或可疑早期浸润癌的患者进行妇科盆腔检查,共同决定分期和手术可行性。对可直接手术或经先期治疗后有手术可能的患者,于开始治疗前2周内(平均6.5d)行盆腔和腹膜后MRI扫描。在MRI图像上观察原发肿瘤的位置、信号特征及侵犯范围。将MRI分期与临床分期进行对比,手术病理分期为金标准,采用诊断检验方法,以敏感度、特异度、准确度3项指标分析MRI判断宫颈癌分期、宫旁侵犯和盆腔淋巴结转移的价值。结果:MRI对宫颈癌术前分期的总准确度为88.7%,对浸润性癌(Ⅱa及Ⅱa以上)诊断准确度为86.7%。MRI对宫旁侵犯的判断敏感度为85.2%,特异度为85%,准确性为85.1%,MRI预测淋巴结转移的敏感度为58%,特异度为96%,准确性为90%。结论:MRI能多方位清晰显示宫颈癌瘤灶及侵犯范围与途径,明显优于其他影像学检查方法,MRI对术前宫颈癌分期明显优于临床,可做为宫颈癌术前常规的影像检查方法。     

野生型rLj-RGD3基因重组突变体rLj-112分子克隆及对HeLa细胞活性影响

为研究突变体rLj-112蛋白的抗肿瘤活性,人工合成七鳃鳗野生型rLj-RGD3蛋白和突变型rLj-112蛋白,通过比较两种蛋白质的抗增殖、迁移和促凋亡的活性,确定突变体rLj-112蛋白的生物学意义及地位。采用MTT方法检测不同浓度的rLj-112蛋白对HeLa细胞增殖的抑制作用。结果表明,rLj-112蛋白能显著抑制HeLa细胞的增殖,且IC50为4.3 μmol/L。使用Transwell细胞培养板对bFGF诱导的HeLa细胞迁移实验表明,rLj-112蛋白能抑制HeLa细胞的迁移。rLj-112蛋白作用后,HeLa细胞经Hoechst33258和AnnexinV-FITC染色结果显示,细胞均凋亡。流式细胞仪进一步证明,rLj-112蛋白能诱导HeLa细胞发生凋亡,且呈剂量依赖性。由此可见,与野生型rLj-RGD3蛋白比较,突变型rLj-112蛋白有较高的细胞毒性作用,具有抗肿瘤的功能,有望应用于抗肿瘤基因工程药物的开发,具有重要的生物学意义。     

红枣黑变前后感官特性及功能和香气成分的比较

在高温高湿条件下对红枣进行热处理,并对红枣和黑变枣颜色、成分及香气进行比较,发现红枣黑变后颜色变为黑褐色,且在0～12h内变化明显;含水量先增加后降低。黑变24h后组织状态变软,总酸含量增加,蔗糖降低,果糖、葡萄糖等还原糖增加;多糖、总酚、五羟甲基糠醛（5 HMF）、三萜酸、氨基酸等功能成分增加,但黄酮和环磷酸腺苷（cAMP）减少。与原红枣相比,黑枣果实的香气成分丰富,产生焦糖气味的2 乙酰呋喃,糠醛及其衍生物增加明显。结果证明,黑变枣在某些方面有更高的营养价值。