生物样品制备的冷冻技术

在分子水平上探讨生物组成,用电子显微镜(EM)与生物化学和X线衍射等方法有着根本的差异。采用电子显微镜可以探讨活细胞及活组织是以怎样的形式存在并起作用的。如何便样品保存得近于活体状态,并能放     

尿素对生成L—谷氨酰胺的影响

用谷氨酸产生菌通过改变发酵条件,可以使谷氨酸发酵转向谷氨酰胺发酵,从而在发酵液中积累起谷氨酰胺。我们用谷氨酸产生菌黄色短杆菌ATCC(1406),通过改变发酵条件,发酵65小时,在每毫升发酵液中积累了25毫克谷氨酰胺,同时观察了尿素对生成谷氨酰胺的影响。     

黄色短杆菌ATCC 14067产L-谷氨酰胺的发酵条件

L-谷氨酰胺是L-谷氨酸的r-羧基酰胺化,其分子式为H_2N·OC·CH_2·CH_2·CH(NH_2)·COOH,作为药物,它可以用来治疗神经衰弱,胃和十二指肠溃疡等疾病,疗效明显。我们用谷氨酸产生菌黄色短杆菌ATCC 14067,通过改变发酵条件,使谷氨酸发酵转向谷氨酰胺发酵。发酵65小时,在每毫升发酵液中积累了30mg的谷氨酰胺。     

江苏省古生物学会举行古生物磨片、绘图、分析技术经验交流会

古生物磨片、绘图、分析技术是古生物学研究工作的重要一环,也是反映研究成果水平的重要标志之一。几十年来我省的有关技术人员刻苦钻研、勤奋工作,为提高我国古生物研究成果的质量,作出了重要贡献。在取得可喜成绩的基础上,我省广大古生物技术人员,迫切要求总结经验,探讨和学习新技术、新方法,以利于进一步做好工作,积极培养新生力量,为我国古生物学研究赶超世界先进水平贡献力量。为此,省古生物学会于1983年6月30日至7月5日在连云港市召开了古生物磨片、绘图、分析技术经验交流会。参加会议的代表来自我省地质、石油、煤炭、科研、教育、林业等系统的代表六十余人。使我们感到高兴的是还有来自北京、上海、安徽、浙江、江西、四川、湖北、贵州、广西、甘肃等省的十多位同志列席了我们的会议。江苏省古生物学会理事长穆恩之教授致开幕词,     

談談教学工作的精雕細刻

教学工作是一个非常细致复杂的工作,要搞好这一工作的关键,首先在于教师思想上做到政治掛帅。目前学校教师,在學校党委的领导下,学习了党的八屆八中全会的文件,并根据文件精神初步批判了右傾思想和畏难松劲的情緒,教师政治觉悟提高了,因而进一步鼓起了革命干劲,个个意气奋发,工作热情高涨,先后在各校掀起一个以进一步貫彻党的教育工作方針,     

盐激条件下快生大豆根瘤菌的渗透调节

快生大豆根瘤菌(Rhizobium fredii)RTl9在基本培养基中能耐800 mmol/L。NaCl。该菌株在对数生长后期,突然加入高浓度NaCl,使其培养液中的NaCl最终浓度为1000mmol/L。5分钟后,细胞内谷氨酸的含量便急剧增加,而且脯氨酸也大量积累。50分钟后,它们的含量分别达到未受盐激的(对照)4倍和3.8倍。在盐激条件下,RTl9的谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸合成酶(GOGAT)的活性比对照明显提高。其中GS活性的提高主要是由GSⅡ引起的,GSI变化不大。将这两种酶直接暴露于1000mmol/LNaCl,50分钟后,酶活性降至原来的70％,并未完全失活。聚丙烯酰胺凝胶双向电泳的分析表明,若干蛋白质在盐激后消失,而且发现两种蛋白质是新合成的,其分子量和等电点(MW/pI)分别为110 kD/4.3和76 kD/6.5。     

水稻种子发芽过程中活性物质的研究

研究了水稻种子在不同的发芽条件下维生素Ｃ、Ｂ１、Ｂ２、Ｅ,谷胱甘肽,β－胡萝卜素等活性物质含量的变化。结果表明：维生素Ｃ、谷胱甘肽、维生素Ｂ２的含量随着发芽时间的延长而呈线性增加;在发芽的４８ｈ内,维生素Ｂ１的含量是增加的,而后逐渐降低;维生素Ｅ的含量逐渐增加至第三天时达到最大值,以后略有下降;样品中未检测出β－胡萝卜素;光照、醋酸钠、葡萄糖可显著提高维生素Ｃ的含量,其中醋酸钠的效果最佳;硫酸钠提     

人类新细胞因子CKLFSF2羧基端蛋白在大肠杆菌中的表达纯化、抗体制备与鉴定

哺乳动物细胞表达的人类新细胞因子——趋化素样因子超家族成员-2(CKLFSF2)存在分泌形式,位于CKLFSF2分子的羧基端,具有细胞趋化作用.为进一步研究CKLFSF2羧基端蛋白的结构和生物学功能及抗体制备,构建了GST-CKLFSF2C51原核表达质粒,经原核表达、亲和层析、凝胶过滤,获得GST-CKLFSF2C51融合蛋白和CKLFSF2羧基端蛋白(CKLFSF2C51),纯度可达到95%以上.GST-CKLFSF2C51融合蛋白用于制备多克隆抗体,ELISA方法检测抗体效价阳性,蛋白质印迹检测CKLFSF2哺乳动物细胞超表达细胞裂解液,获得特异性条带与预期大小一致.CKLFSF2C51经N端测序,质谱鉴定与预期结果一致,该蛋白质具有对PC-3细胞趋化的活性,并且该活性可被制备的多克隆抗体中和.上述结果表明,原核CKLFSF2羧基端蛋白具有与CKLFSF2真核表达蛋白类似的细胞趋化活性,原核CKLFSF2羧基端蛋白制备的多克隆抗体可用于免疫组织化学、蛋白质印迹检测,并能中和CKLFSF2蛋白的趋化活性作用.     

江苏省古生物学会举行古生物磨片、绘图、分析技术经验交流会

古生物磨片、绘图、分析技术是古生物学研究工作的重要一环,也是反映研究成果水平的重要标志之一.几十年来我省的有关技术人员刻苦钻研、勤奋工作,为提高我国古生物研究成果的质量,作出了重要贡献.在取得可喜成绩的基础上,我省广大古生物技术人员,迫切要求总结经验,探讨和学习新技术、     

丛毛单胞菌CNB-1合成PHA及相关基因的研究

分析了丛毛单胞菌(Comamonas sp.)CNB-1菌株在不同条件下合成聚羟基烷酸(polyhydroxyalkanoic acids,PHAs)的组分和含量,同时克隆了与PHA合成相关的基因。结果表明,该菌可以多种短链有机酸及醇类为碳源合成PHA多聚物或共聚物,以戊酸和1,4-丁二醇为底物时,可达菌体干重的57%;同时发现小分子醇类的存在能显著促进PHA的合成,推测与醇类氧化过程中提供了更多的还原力有关。为了克隆相关基因,利用已知phaC的保守区简并引物筛选基因组文库,将得到的阳性克隆质粒测序,发现phaC、phaA、phaB组成一个基因簇phaC-A-B。将phaC、phaA、phaB连接到pET载体在E.coli中共表达,重组E.coli菌株能合成PHA;将这3个基因单独连接到pET载体,在E.coli中表达后检测到相应酶活,分别约为原始菌株的4.1、71和2882倍。