肠杆菌科细菌对β-内酰胺类抗生素耐药机制的研究现状

肠杆菌科细菌是革兰阴性杆菌中最常见的一类细菌,在一定条件下可引起医院和社区感染。临床首选β-内酰胺类抗生素来抗感染,但由于抗生素的不合理使用导致肠杆菌科细菌产生相应的灭活酶及水解酶或菌株细胞结构改变,从而破坏β-内酰胺环使其对抗生素作用的敏感性下降甚至耐药,给临床抗感染治疗带来了极大的挑战;为更好地指导临床用药,拟就肠杆菌科细菌的耐药表型、对β-内酰胺类抗生素的耐药机制做一综述。     

P波离散度对房颤消融术后复发的预测价值

目的:探讨P波离散度对心房颤动(房颤)导管消融术后复发的预测价值。方法:连续收集经导管消融的房颤患者120例,根据是否复发分为复发组与对照组,分别测定和比较两组术后心电图最大P波时限(Pmax)及最小P波时限(Pmin)并计算P波离散度(Pd)。结果:房颤消融术后,53例病人复发,复发组最大P波时限(132±23mm VS 102±25mm)及P波离散度(33±9mm VS 29±10mm)均显著高于非复发组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:P波离散度可用于辅助预测房颤导管消融术后是否复发。     

基于高通量测序的发芽苦荞转录组学研究北大核心CSCD

采用新一代高通量测序技术Illumina Solexa Hiseq 2500对发芽荞麦转录组进行测序,结合生物信息学方法开展基因表达谱研究和功能基因预测。通过测序,获得了42 953 962个序列读取片段(reads),包含了5.37 Gb碱基序列信息。对reads进行序列组装,获得45 278个单基因簇(unigenes),平均长度862 bp,序列信息达到了39 Mb。另外,从长度分布、GC含量、表达水平等方面对unigenes进行评估,数据显示测序质量好,可信度高。数据库中的序列同源性比较表明,2 127个unigenes与其他生物的己知基因具有不同程度的同源性。发芽苦荞转录组中的unigenes与细胞进程、细胞和蛋白结合相关。将unigenes与KOG数据库进行比对,根据其功能大致可分为24类。以KEGG数据库作为参考,依据代谢途径可将unigenes定位到328个代谢途径分支,包括核糖体代谢通路、碳水化合物代谢等,并且筛选出38条参与GABA合成的氧化磷酸化代谢的unigenes。SSR位点查找发现,从71 366个unigenes中共找到7 141个SSR位点。SSR不同重复基序类型中,出现频率最高的为A/T,其次是AAG/CTT和AT/AT。     

“摩尔根的果蝇杂交实验(第2课时)”教学设计

本节课的教学设计以新课程理念作为主要的指导思想,根据学生的具体情况和学校的教学资源,为学生创设了以假说-演绎法分析果蝇眼色遗传为主线、亲身参与果蝇杂交实验的基本过程,为载体的探究性学习课程。     

中国虎纹蛙脾微血管铸型的扫描电镜观察

以扫描电镜的方法对中国虎纹蛙脾微血管铸型进行了观察,发现脾实质的白髓和红髓之间界限不甚清晰,脾血窦形态大小不一,相续连接成网,窦壁上有少数裂孔。脾微循环为闭锁和开放性循环共存的类型,且大部分为开放性循环。脾实质断面上有动静脉吻合的存在。     

鸡γ干扰素的可溶性表达及纯化产物的抗病毒活性

【目的】克隆鸡γ-干扰素（chIFN-γ）基因,大肠杆菌表达及产物纯化与活性检测。【方法】通过RT-PCR方法用ConA刺激的20日龄SPF鸡的脾脏淋巴细胞中扩增出chIFN-γ成熟蛋白基因cDNA,克隆至原核表达载体pET-32a (+),构建重组表达质粒pET-32a (+)-chIFN-γ,在大肠杆菌BL21（DE3）中经IPTG诱导表达,利用镍柱亲和层析法纯化可溶性蛋白,并进行SDS-PAGE、Western blot鉴定。利用MDCK-VSV系统测定抗病毒活性。【结果】克隆得到456 bp 的chIFN-γ成熟蛋白编码基因,大肠杆菌中成功表达chIFN-γ蛋白,分子量约为31.0 kDa,能与抗His的单克隆抗体和兔源多抗血清发生特异性反应。表达蛋白一部分形成包涵体,另一部分以可溶形式存在,可溶性蛋白经镍柱在天然条件下的纯化得率为3.0 mg/mL。生物学活性试验表明,1:32 稀释纯化的重组chIFN-γ （rchIFN-γ）孵育MDCK细胞后能抵抗100TCID50的VSV攻击。【结论】通过镍柱天然纯化获得的rchIFN-γ具有较好的抗病毒活性,为研制新型抗病毒干扰素制剂奠定基础。     

串联表达PRRSV M与GP5蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研究

利用PCR扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒的M基因,按正确的读码框与GP5基因串联,成功构建穿梭载体pShuttle-CMV-M-GP5,经PCR、测序鉴定正确。PmeⅠ线性化后在BJ5183大肠杆菌内与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组,产生重组腺病毒DNA。重组腺病毒DNA经PacⅠ线性化后用脂质体转染HEK-293A细胞,在细胞内包装成完整的腺病毒,通过IFA可以检测到M与GP5串联的重组腺病毒构建成功,可以正确地表达目的蛋白。将构建好的重组腺病毒免疫小鼠,结果表明可以诱导产生较强的体液免疫应答(ELISA抗体和中和抗体)和细胞免疫应答(淋巴细胞增殖和CTL反应)。证明该重组腺病毒具有较好的免疫原性,为下一步猪体免疫试验奠定了基础。     

二维电泳分离牛精子蛋白的技术研究

二维电泳是蛋白质分离技术并可由于对精子蛋白的分离。本研究旨在通过对双向电泳条件的研究摸索出一种适用于分离牛精子蛋白的二维电泳技术,并利用其对牛精子蛋白进行分离鉴定。在实验中,优化了等电聚焦程序,研究了精子蛋白的不同制备方法、不同上样量、不同胶条长度对电泳结果的影响。结果表明,采用尿素－盐酸胍两步裂解法裂解精子细胞制备蛋白,使用13cm非线性胶条进行蛋白二维电泳,能获得较好的电泳图谱。图谱经二维电泳软件分析,可检测出约800多个蛋白质点,分子量基本分布在10~100KD、等电点约为4~9的区域内。对精子蛋白二维电泳条件的摸索,为后续牛精子X、Y差异蛋白的检测和分析奠定了理论基础。     

高效液相色谱检测聚乙二醇化天花粉蛋白方法比较

目的：建立聚乙二醇化天花粉蛋白纯度的检测方法。方法：使用分子筛色谱法和反相高效液相色谱法测定了聚乙二醇天花粉蛋白。结果：聚乙二醇天花粉蛋白纯度分别为100％和98．14％。结论：高效液相色谱法简单易行、准确、灵敏度高,适用于聚乙二醇化天花粉蛋白纯度检测。     

生殖激素对小鼠胚胎性别影响的研究(简报)

性别控制是人类很早就关心的研究领域,因为许多重要的经济性状与性别有直接关系。在家畜生产中,性别控制应用潜力很大,可以大幅度提高生产力,节约生产成本。性别控制可使肉用家畜多产雄性后代,乳用家畜多产雌性后代。为了达到控制