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基于金黄色葡萄球菌16S rRNA基因序列,采用序列比对设计了一种茎环结构的寡聚核苷酸探针。探针的环序列即为金黄色葡萄球菌16S rRNA基因序列的其中一个片段,同其他菌种的16S rRNA基因序列误配2个以上的核苷酸,因此能高度专一、灵敏的检测金黄色葡萄球菌16S rRNA。根据分子信标技术和酶联免疫分析的原理,评估一个实验方法,即利用能构象转换的、固定化的茎环结构探针酶联检测靶核酸。由于探针的特异性加强,这个检测系统能有效的排除假阳性即不会出现误配一个核苷酸的情况。采用微量浓度测定分析,最低下限可检测出大约4ng的金葡球菌16SrRNA。这种方法的灵敏度比其他常规检测方法高出了至少一个数量级。 相似文献
942.
作为合成二甲胺基四环素的原料——去甲基金霉素(去甲基四环素),可以通过发酵途径制备。出发菌株Sir.…eofaciens 38—2在产生去甲基金霉素的同时,还产生大量的金霉素。以Str. Aureofaciens 38-2作为出发菌株,采用紫外线、乙烯亚胺及二者复合等诱变处理,根据菌株在固体培养基中菌丝体呈赤褐色,并有可溶性色素分泌的特征,挑选出54株变株,在紫外线的处理中,得到了一株颜色突变株,编号为38-2-14。经过纸谱层析、生物显影及紫外线吸收光谱等测定,证明系一株仅产生去甲基金霉素和去甲基四环素,而不产生金霉素的菌株,在用培养基(2)时,摇瓶培养96小时的生物效价测定,发酵单位为1075微克/毫升。 相似文献
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944.
铁摄取调节蛋白(ferric uptake regulator, Fur)是控制铜绿假单胞菌铁代谢和毒力的关键调节因子。许多课题组尝试构建铜绿假单胞菌fur的缺失突变株均失败,因此铜绿假单胞菌的fur一直被认为是必需基因,这导致其生物学功能一直未得到全面的解析。【目的】构建铜绿假单胞菌fur的缺失突变株,并对该突变株的表型进行分析。【方法】以铜绿假单胞菌PAO1为亲本菌株,通过同源重组的方法构建fur缺失突变株,研究该基因对铜绿假单胞菌生长、铁载体生物合成、抗氧胁迫能力、鞭毛形成、生物被膜形成和毒力等的影响。同时,通过遗传分析对fur缺失突变株生长缺陷表型的原因进行探究。【结果】本研究成功构建了铜绿假单胞菌fur基因的缺失突变株,发现缺失突变fur极大地限制了铜绿假单胞菌的生长能力,并降低了该菌对限铁环境的生长适应性,但不影响该菌对高铁环境的生长适应性。铜绿假单胞菌Δfur的这种生长缺陷表型是细胞生长增殖变慢造成的,而不是诱导细胞死亡引起的。然而,其他异源的fur基因能完全互补Δfur的这种生长缺陷表型,暗示铜绿假单胞菌的Fur蛋白在功能上不存在独特性。尽管Fur与毒素-抗毒素系统PacTA存在功能关联性,但是铜绿假单胞菌Δfur的这种生长缺陷表型却与PacT毒素无关。除了影响铜绿假单胞菌的生长表型,缺失突变fur还使铜绿假单胞菌丧失了对铁载体生物合成的抑制作用,导致该菌对H2O2更敏感并丧失了鞭毛的形成能力,同时降低了该菌对大蜡螟幼虫的毒力。此外,缺失突变fur还显著提升了铜绿假单胞菌的胞内环二鸟苷酸(cyclic diguanylate, c-di-GMP)水平,从而诱导pelF和pslA基因的表达,进而促进铜绿假单胞菌生物被膜的形成。【结论】fur是可以缺失的非必需基因,在铜绿假单胞菌的正常生长、铁载体生物合成、抗氧胁迫能力、鞭毛形成、生物被膜形成和毒力等方面都发挥着十分重要的作用,这为针对铜绿假单胞菌的疫苗和抗菌药物开发奠定了基础。 相似文献
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946.
947.
948.
先将蟾蜍的皮剥去,再将骨骼上附着的肌肉初步拿掉(不必细作),后将蟾蜍放入烧杯内用开水约煮一刻钟取出。这时可用镊子仔细的将肌肉除去(因为煮后肌肉疏松很容易取掉),即可放入调配好的氢氧化钠(氢氧化钠1毫升,水100毫升)里,约浸两小时取出,即用清水洗干净氢氧化钠(因为氢氧化钠是碱性的,若不洗干净则漂白 相似文献
949.
950.
离体的与带有雌配子体的紅松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc.)胚胎,在人工培养下,其根部的生长可表現出各种形态解剖上的分化。普通带有雌配子体的成熟胚的下胚軸基部,除了生长特別迅速以外,其余都比較正常,內部的分化大致也与一般自然生长下的松属幼苗相似。但是完全离体的胚胎,在人工培养一星期后,即可显出各种变异,其中胚根鞘的結构表現得特別显著。这种在胚根伸展时多形成紅褐色的一团,复盖在最前端;里面逐漸与根冠分离,外部变为相当疏松。不久在初生根伸长时即被穿破或推向一边。而初生根的前端周围則又由皮层細胞逐漸轉变成7—8层細胞寬的疏松結构层;在其外面不断的成条状剝落。离体胚初生根继續向前伸长时,根端內的分区逐漸变为不明显;分生組織減少,原始细胞成单层細胞,位在下胚軸的基部。同时根端的根冠細胞退化,只剩了几层細胞;有的不久完全消失。培养六星期后,有些根端的分生組織,逐渐轉变为薄壁组織;分散的管胞十分靠近根的前端。最后根端的组织分化衰退而趋向死亡。 相似文献