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141.
木聚糖酶和甘露聚糖酶是两种主要的半纤维素酶,广泛应用于诸多领域。选择了3种毕赤酵母内源信号肽Scw11、Dse4和Exg1,以α-factor为参照,分别在毕赤酵母X33中用于表达实验室前期获得的耐热木聚糖酶DSB和耐热甘露聚糖酶Man A,选择适合DSB和Man A表达的信号肽以提高胞外酶活水平。结果表明不同信号肽引导的两种半纤维素酶的酶活水平相差较大:对DSB(分子量为23k Da),α-factor介导的表达效率明显优于其它3种信号肽;但对Man A(分子量为30k Da),Dse4和α-factor介导的表达效率相当且明显优于Scw11和Exg1。因此在X33中表达DSB时应选用α-factor,而表达Man A时应选用Dse4或α-factor。此外胞内酶活的结果显示α-factor介导的DSB和Man A重组菌胞内滞留酶活明显高于其它信号肽,而分子量为30k Da的Man A的滞留酶活又明显高于分子量为23k Da的DSB,因此在表达Man A蛋白时,选用其它的信号肽,如Dse4,会减少外源蛋白在胞内的滞留从而在一定程度上提高外源蛋白的分泌量。因此为毕赤酵母表达系统鉴定更多可用的信号肽并筛选到针对目的蛋白的最优信号肽奠定了一定的基础。 相似文献
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144.
145.
将牛αS1-酪蛋白5′调控序列约1.2 kb的片段,连接到含SV40启动子调控下β-半乳糖苷酶基因(LacZ)的PSV载体上,做为启动子,在其后连接0.76 kb的人α-乳白蛋白基因(α-LA),构建真核表达载体 αS1-LA-psv.采用组织块接种法,培养奶牛乳腺上皮细胞,经传代纯化后,对细胞接种存活率、群体倍增时间、生长曲线、形态学等生物学性状进行检测,用免疫荧光细胞染色法对培养的奶牛乳腺上皮细胞进行角蛋白18鉴定,结果表明,成功建立奶牛乳腺上皮细胞系,细胞传至20代以上时仍保持旺盛的增殖活力.将构建的真核表达载体 αS1-LA-psv 转染奶牛乳腺上皮细胞,培养24~120 h均检测到了β-半乳糖苷酶的表达;培养72 h检测到细胞中人α-乳白蛋白的表达,表达量约为0.64 g/L.实验结果表明,建立的奶牛乳腺上皮细胞系具有外源基因表达活性,得到的牛αS1-酪蛋白5′调控序列能作为启动子指导外源基因的表达,构建的真核表达载体能在体外培养的牛乳腺上皮细胞中同时表达人α-乳白蛋白和β-半乳糖苷酶. 相似文献
146.
目的分析酶联免疫法(EIA)在检测生殖器疱疹病毒的可行性。方法收集性病门诊患者标本338例进行细胞培养和EIA法检测,另将两法检测结果不相符的标本采用荧光PCR复检,比较分析细胞培养、EIA法与扩大金标准结果的相符性。结果分析表明细胞培养与EIA法检测生殖器疱疹病毒的敏感性均为90.24%,特异性分别为100%和96.29%。结论EIA法检测生殖器疱疹病毒有较高的敏感性而且方法简便、快速,可以用于大批量标本的检测和流行病学的筛查。 相似文献
147.
148.
太白山野葛根中异黄酮和葛根素含量随季节的变化 总被引:6,自引:0,他引:6
为了考察太白山野葛根中异黄酮及葛根素含量随季节的变化。采集一年12个月份的野葛根,采用紫外分光光度法测定其中异黄酮含量;以7高效薄层色谱扫描法测定野葛根中游离葛根素及总葛根素含量。结果表明:三月份异黄酮含量最高,为18.53%;四月份游离葛根素及总葛根素含量最高,分别为7.45%和8.93%。对不同季节太白山野葛根中异黄酮、游离葛根素及总葛根素进行定量分析,为这一野生资源的合理采收和开发利用提供了实验依据。 相似文献
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150.
摘要 目的:分析小颗粒自体脂肪移植应用于面部年轻化的临床疗效。方法:采用回顾性方法分析,选取本院自2018年1月-2020年12月收治的80例行面部年轻化患者的临床资料,随机分为对照组(40例,给予玻尿酸注射)与研究组(40例,给予小颗粒自体脂肪移植),比较两组患者的临床疗效、治疗前后的皮肤检测指标、鼻唇沟及下颌缘形态评分、术后并发症。结果:研究组患者优良率(83.33%)明显高于对照组(58.33%),有显著差异(P<0.05)。治疗3个月后,研究组患者的鼻唇沟、下颌缘形态评分、油脂、斑点评分均低于对照组,有显著差异(P<0.05)。研究组患者的皮肤水分、弹性评分高于对照组,有显著差异(P<0.05);治疗前TNF-α、hs-CRP水平组间差异无统计学意义(P>0.05),两组治疗后TNF-α、hs-CRP水平下降,且研究组治疗后TNF-α、hs-CRP水平低于对照组(P<0.05);两组患者并发症发生率经比较,无统计学意义(P>0.05)。结论:小颗粒自体脂肪移植用于面部年轻化可有效改善患者皮肤状态,促进患者皮肤水分、弹性的恢复,并改善油脂及斑点问题,且移植后造成的皮肤损伤较小,且有着较高安全性,值得临床应用。 相似文献