乙脑病毒全长cDNA的扩增克隆及体外转录制备感染性RNA的研究

本研究根据已知的乙脑病毒（ＪＥＶ）ＳＡ１４株基因序列设计一套引物,利用长模板ＲＴ－ＰＣＲ技术,一次扩增出了ＪＥＶ的全长ｃＤＮＡ,并采用大片段克隆技术将其克隆于载体的ＲＮＡ聚合酶启动子下游。阳性克隆转录的ＲＮＡ转染ＨＢＫ细胞后细胞产生病变,经乳鼠脑内接种及特异性免疫荧光染色证明为ＪＥＶ,这一结果表明ＪＥＶ感染性克隆的构建获得了成功。其次,合成一条含有ＲＮＡ聚合酶启动子序列的５′引物,利用长模板ＲＴ－     

肾综合征出血热病毒50K结构蛋白的纯化和鉴定

以HFRS病毒感染的乳小白鼠脑为原材料,用硫酸鱼精蛋白和PEG沉淀法制备粗病毒抗原。将此粗制抗原通过抗HFRS病毒MeAb与Separose4B偶联制成的免疫吸附柱,并用3MKCNS洗脱,获得了SDS-PAGE均一纯的特异性病毒结构蛋白,分子量为50,000道尔顿,具有较高的抗原滴度和良好的免疫原性。初步认为该蛋白可能是HFRS病毒的一种囊脱蛋白。     

香蕉通过胚状体途径的快速繁殖研究

采用吸芽顶端分生组织培养的方法快速繁殖香蕉已广泛应用于生产。近年来,我们通过胚状体途径的快速繁殖已取得成功。取香蕉花序顶端3—5厘米,分别将雄花、花苞片和花序轴剪碎作外植体。基本培养基为MS。诱导胚状体培养基为 MS 2,4-D2mg/L(单位以下同) BA0.5 NAA0.5,胚状体发育和分化培养基为 MS BA3.0 NAA0.2;加速再生植株生长培养基为 MS KT0.2 NAA0.     

乙型肝炎病毒preS基因DNA免疫小鼠诱导产生抗preS_2抗体

HBV表面蛋白的preS区具有强的免疫原性,对PreS_1特异的T辅助细胞可辅助主蛋白特异的B细胞活化增殖,克服对主蛋白的无反应性,目前带有preS区的基因工程重组疫苗正在研究当中。preS_1和preS_2区各自带有T细胞和B细胞识别位点,PreS_1(21～47)为HBV结合肝细胞受体的位点,抗preS_1(21～47)肽的抗体具有保护作用。根据preS抗原的上述特点,我们选择了preS基因,构建了pCMV_4preS和     

人体上皮细胞系（株）间交叉污染的检测

本文根据不同上皮细胞的角蛋白丝性质和多肽组成的差异,建立了四种不同上皮细胞系(株)间交叉污染的检测方法:1.SDS-PAGE法;2.免疫印迹法;3.AE1单抗免疫荧光染色法;4.角蛋白丝结构转化法。结果表明:方法1—3比较有用。我们认为,要获得较满意的检测结果,需要根据不同上皮细胞的特点,选择不同的方法配合使用。     

肺超声在获得性肺炎患儿诊断中的临床应用

目的:探索肺超声(LUS)在获得性肺炎(CAP)患儿诊断中的临床应用价值。方法:选取自2013年4月至2014年11月我院确诊为CAP的患儿95例,以腋前线、腋后线为界,将患儿肺脏分为前、后、侧三个区域,对所有患儿进行LUS检查,观察胸膜线、B线、肺实变程度及胸腔积液,并对支气管充气征进行检查。结果:95例CAP患儿经LUS检查后,诊断为阳性的有93例,阴性有2例,准确率为97.89%;CAP患儿的LUS的主要表现为肺泡-间质综合征、支气管充气症、胸膜线异常、胸腔积液;80例为综合表现(84.21%),15例为单一表现(15.79%)。结论:LUS诊断CAP患儿具有较高的准确率,结果安全可靠,可以应用于为临床诊断CAP。     

肾综合征出血热病毒血凝素的研究 Ⅱ.血凝和血凝抑制试验影响因素的探讨

本文探讨了肾综合征出血热病毒(HFRSV)血凝和血凝抑制(简称血抑)试验的主要影响因素,观察到HFRSV血凝素的制备要求较高,4℃保存的效果较好,血凝素对热似有一定的稳定性,血凝作用的条件较为严格,最佳pH在5.7—6.1,鹅血球较为敏感,氯仿法去除血清中非特异性抑制物有效而简便。通过试验条件的模索和方法的改进,使之适用于基层。     

双单克隆抗体ELISA间接夹心法检测流行性出血热病毒抗原

建立了检测流行性出血热(EHF)病毒抗原的双单克隆抗体(McAb)ELISA同接夹心法,用本法和间接荧光抗体技术(IFAT)相比较,IFAT检出感染细胞内病毒抗原的高峰在感染后第8天,而ELISA检测感染上清中病毒抗原的高峰在第14天,两方法检测179份人工感染EHF病毒的乳鼠脑和肺组织标本,阳性检出率分别为72.1％和68.2％,实验结果表明,本法特异,敏感,简便,不仅可用于EHF病原学研究,也适用于流行病学调查检测大量鼠肺标本。     

单克隆抗体治疗日本乙型脑炎的实验研究

本文应用JEV-McAb对感染JEV的小白鼠及幼山羊进行实验性治疗,并对乙脑免疫机理作一初步探讨。结果表明,JEV-McAb对经不同途径感染各种JEV毒株的小白鼠都有较好的保护作用,其效果明显优于PeAb。小鼠感染后120小时,大部分已发病,个别已濒死,这时给予混合MeAb或其F(ab′)2,仍可保护约半数存活。McAb对感染JEV的幼羊也有较好的保护作用。羊脑内注入JEV48小时后,出现发热不安等症状,这时由腹腔和椎管两种途径同时给予混合McAb,保护率达100％。存活实验动物脑组织内未分离出病毒;而死亡功物病毒分离阳性,脑组织经双PAP及HE染色证实JEV抗原阳性并伴有脑炎的病理改变。中和活性是JEV-McAb的主要保护方式,中和放价高的MeAb保护率也高。     

中国钩瓣叶蜂属三新种(膜翅目,叶蜂科)

记述采自中国甘肃的钩瓣叶蜂属3新种,肿跗钩瓣叶蜂Macrophya incrassitarsalia Wei et Wu,sp.nov.,黑体钩瓣叶蜂Macrophya melanosomata Wei et Xin,sp.nov.和白转钩瓣叶蜂Macrophya leucotrochanterata Wei et Li,sp.nov..新种模式标本保存于中南林业科技大学昆虫模式标本室.