嗜碱菌Alkalimonas amylolytica N10在不同pH条件下的膜蛋白差异表达研究

为了探讨嗜碱菌的嗜碱机制,对一株新型专性嗜碱菌（Alkalimonas amylolytica N10）在不同pH条件下的差异膜蛋白质组进行了初步的研究。在3种pH条件下（pH值分别为84、94和104）培养的该菌的膜蛋白,通过8%～20%的梯度SDSPAGE进行分离。经胶图图像和统计计算,7条电泳条带的相对染色强度随培养液的pH值变化而改变,其中仅有一条条带强度随pH值增高而增加。这些条带经胰蛋白酶胶内消化和高效液相色谱电喷雾离子阱串联质谱（LCMS/MS）分析,共鉴定出了12种蛋白质。其中4种膜蛋白已有报道直接或间接参与细胞pH稳态的保持,其他几种蛋白则是首次发现其表达水平与生活环境的pH变化可能相关。     

晚期糖基化终产物对人脐静脉内皮细胞的肝细胞生长因子表达的影响

目的探讨晚期糖基化终产物(AGEs)对人脐静脉内皮细胞的肝细胞生长因子(HGF)mRNA及蛋白表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,予不同浓度(100mg/L、200mg/L、400mg/L)的AGEs刺激24h及400mg/LAGEs作用6h、12h、24h及48h,采用RT-PCR及免疫细胞化学法检测内皮细胞HGFmRNA及蛋白的表达水平。结果在一定范围内随着AGEs浓度增加,内皮细胞HGF表达逐渐增高;AGEs早期作用内皮细胞,促进HGFmR-NA及蛋白的表达,随着AGEs的持续作用,HGF表达减弱。结论随着AGEs作用时间的延长,HGF对受损内皮细胞的修复作用先增强后减弱。     

抗松材线虫纤维素酶单链抗体库的构建及筛选

构建鼠源性松材线虫纤维素酶（Bursaphelenchus xylophilus cellulase, BXC）的噬菌体单链抗体库,从中筛选特异性BXC的单链抗体。以BXC为抗原免疫BALB/C小鼠,从脾脏提取总RNA,用RT-PCR技术扩增小鼠抗体重链（V_H）和轻链(V_L)可变区基因。经重叠PCR(SOE-PCR)在体外将V_H和V_L连接成单链抗体(scFv)基因,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,电转化至大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体超感染,成功构建了库容为5×10⁴的Anti-BXC单链抗体库,并从该抗体库中初步筛选到了特异性识别BXC的噬菌体单链抗体scFv。将表面展示单链抗体的单克隆噬菌体转化大肠杆菌HB2151进行可溶性表达,SDS-PAGE及Western blot分析结果显示,可溶性scFv获得表达,且与BXC具有结合活性,为松材线虫的检验检疫以及病理学研究奠定了基础。     

脂肪组织的免疫功能

脂肪组织不仅是能量的储备器官,也是一个重要的内分泌器官.它协助神经系统和其他内分泌器官维持机体的内平衡.近年来,一些研究表明脂肪组织与免疫反应有着密切的联系.人们发现脂肪细胞分泌的瘦素不仅调节机体的能量代谢和控制脂肪的积累,还参与调节单核细胞、巨噬细胞和淋巴细胞的免疫功能,是一种作用广泛的细胞因子.脂肪细胞分泌的其他因子如脂联素也有免疫调节作用.免疫刺激还会作用于淋巴结周围的脂肪组织,引起这些脂肪细胞发生脂解作用.脂肪组织与免疫系统的相互作用,进一步表明生命是由各系统组成的一个有机统一体.随着对这一领域的研究不断深入,可能为某些疾病的治疗提供新的途径.     

实时定量PCR技术及其应用

实时定量PCR(Real—time Quantitative Polymerase Chain Reaction,RQ—PCR)技术是20世纪90年代中期发展起来的一种新型核酸定量技术。该技术具有实时监测、快速、灵敏、精确等特点,是对原有PCR技术的革新,扩大了PCR的应用范围。本文综述了RQ—PCR技术的原理、RQ—PCR仪、RQ—PCR实时定量检测系统及其应用。     

基于纳米金和辣根过氧化物酶双标记抗体的黄曲霉毒素B1高灵敏检测方法的建立及应用

黄曲霉毒素B₁（aflatoxin B₁,AFB₁）在自然界普遍存在,可污染多种粮食作物和饲料,给动物和人类健康造成严重威胁。为建立AFB₁高灵敏度的快速检测方法,本研究通过采用纳米金颗粒（Au nanoparticles,AuNPs）和辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase,HRP）双标记AFB₁单克隆抗体,建立新型酶联免疫检测方法（HRP-AuNPs IC-ELISA）,检测下限（IC₁₀）为0.017ng/mL,检测区间（IC₂₀-IC₈₀）为0.026-0.376ng/mL,半数抑制率（IC₅₀）为0.099ng/mL,与黄曲霉毒素B₂、G₁、G₂ 和M₁ 的交叉反应率分别为2.7%、9.3%、2.1%和5.3%,与赭曲霉毒素A、伏马毒素B₁、桔青霉素、展青霉毒素和玉米赤霉烯酮几乎不存在交叉反应。在玉米和面粉样本中的加标回收率可达88.93-103.55%,与LC-MS/MS同时对天然样本中AFB₁ 含量进行检测,结果表明,两种方法相关性良好。本研究建立的HRP-AuNPs IC-ELISA耗时短且灵敏度高,可用于实际样本中AFB₁ 的快速定量检测与分析,也为其他霉菌毒素的精准检测技术开发提供参考。     

开创手性催化反应研究的新领域——2001年诺贝尔化学奖评介

三位美日科学家因在手性催化氢化反应和手性催化氧化反应研究领域所作出的重大贡献,荣获2001年诺贝尔化学奖.他们的研究成果,对整个手性催化反应的研究领域、手性药物的研制和开发,都起了极大的推动作用.是化学学科在如何由基础理论研究推进到工业生产方面的典范,也是化学学科对整个科学和人类做出贡献的代表.     

作物水分供应订正函数的韦伯函数型

从作物水分生产潜力、潜在水分利用效率与水分满足率的关系及特点入手,引入水分供应订正函数的韦伯形式。与目前常见的水分供应订正函数形式相比,本文给出的韦伯形式的水分供应订正函数具有临界水分满足率和“旋回”特征,能较好地解释作物水分生产潜力与水分满足率之间的数量关系,模型的实用性较广。模型中位置参数表示临界水分满足率;尺度参数表示水分满足率的取值范围;形状参数决定水分供应订正函数的“峰度”和“偏斜度”。根据“图解法”可求取水分供应订正函数的相关参数。其参数也具有明确的生物学和物理学意义,参数值本身也较稳定,使模型在应用中可望具有良好的稳定性。     

东亚钳蝎毒腺腺上皮细胞的光镜和电镜观察

本文取自人工饲养的成年雌蝎５０只，采用光镜和电镜技术，观察其腺上皮细胞的形态结构，其结果证实：蝎毒腺为单管泡状腺，腺上皮为单层柱状，主要由暗细胞和明细胞组成。暗细胞内充满了大量的分泌小泡和分泌颗粒，而明细胞内含有大量溶酶体样的结构。     

日本沼虾精子的形态和超微结构研究

应用电子显微镜技术结合细胞化学方法对日本沼虾精子进行子形态和超微结构研究。结果显示,日本沼虾精子琪似外翻的伞状,无鞭毛,不运动的精子主要由前端棘突,中间帽状体和后主体部分组成,精子的核属非浓缩型,内布许多絮状物质,外无核膜包被,呈Ｆｅｕｌｇｅｎ阳性反应,位于后主体部内;中间帽状体的细胞质内含有一对中心粒和１５－２０根放射状排列的纤丝,纤丝在帽状体凸面中央汇聚并延伸成精子的棘突,棘突和放射状纤丝皆具