荧光原位杂交技术和流式细胞仪用于环境样品中产毒及非产毒微囊藻的定量监测

全球范围内,高频次、大范围暴发的蓝藻水华对淡水水体环境造成严重影响.微囊藻因其在生长特别是衰亡过程中向水体释放微囊藻毒素而威胁人类健康.因此,分析其产毒株及非产毒株在环境样品中的组成,建立产毒蓝藻的预报及评价体系显得极为重要.本文采用荧光原位杂交技术结合流式细胞技术实现对环境样品中产毒藻株的鉴别与定量.针对目标基因mcyA设计的、以地高辛标记的双链DNA探针可有效应用于产毒微囊藻FACHB905和PCC7806的鉴别.分别对来自滇池、太湖和关桥的11个样品进行分析显示,该方法与传统的形态学鉴定及PCR方法有较好的匹配.荧光原位杂交技术与流式细胞相结合可有效鉴别产毒与非产毒微囊藻,尤其可以对野外样品中产毒与非产毒藻株进行简便、可视化地鉴别,从而达到对产毒微囊藻水华早期预警的目的.     

大气C02浓度升高对稻田土壤溶液中阴离子浓度的影响

利用中国稻/麦轮作FACE(Free-Air Carbon Dioxide Enrichment)试验平台,研究了 大气CO2浓度升高对稻季各生育期耕层土壤溶液中Cl-、CO2-3、HCO-3、SO2-4、NO-3和溶解无机磷(DIP)等阴离子浓度的影响,探讨了稻田生态系统土壤元素地球化学循环对大气CO2浓度升高的响应.结果表明:大气CO2浓度升高降低了土壤溶液SO2-4浓度,提高了HCO-3浓度,与5 cm处相比,其在15 cm处的影响程度更大;大气CO2浓度升高有增加土壤溶液NO-3和溶解无机磷(DIP)的趋势;对CO2-3和Cl-未表现出明显的规律性影响.文章还分析了大气CO2浓度升高对土壤溶液阴离子浓度产生影响的可能机理.     

RNAi 在植物功能基因组中的应用

植物生物学后基因组时代的主要目标就是确定植物基因组中所有基因所具有的功能。解决这个问题的一个最直接的方法就是还原或者敲除某个在正常条件下其功能能表达出一定的可观察到的表型的特殊基因。对于这方面的研究,插入突变技术就是一个可用的工具,但是基因的随机性,致死敲除,无标记的突变体都大大地限制了这种技术的利用。RNm技术可以克服以上那些难题。它已经被广泛地应用在线虫的功能基因组上,并且所获得的有效资源还被广泛地用于植物功能基因组的分析。     

蝎毒多肽提取物抑制DU- 145 细胞 COX- 2 和MMP- 9 表达的研究

目的：研究蝎毒多肽提取物（peptide extract from scorpion venom,PESV）对雄激素非依赖性人前列腺癌细胞株DU-145COX-2和MMP-9表达的影响,进一步探讨其抗血管生成的分子机制,为抗前列腺癌骨转移提供有效的治疗手段。方法：采用免疫组只化学方法检测PESV对COX-2、MMP-9蛋白表达的影响,应用RT-PCR检测PESV对MMP-9在mRNA水平表达的影响。结果：蝎毒多肽提取物（40μg／mL）作用于前列腺癌细胞后,COX-2、MMP-9蛋白表达水平明显下调（P〈0．05）,进一步检测发现MMP-9在mRNA水平亦明显下降（P〈0．05）。结论：蝎毒多肽提取物（PESV）通过抑制前列腺癌细胞血管生成因子COX-2的表达而发挥其抗血管生成作用,具有临床应用价值。     

ACC氧化酶和ACC合成酶反义RNA融合基因导入番茄和乙烯合成的抑制

从番茄品种强力米寿的总DNA中克隆番茄果实特异启动子2A11,以番茄成熟果实的RNA为模板,进行RT-PCR扩增,克隆番茄全长的ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因片段。完成两个基因的克隆和测序后,将888bp的番茄ACC氧化酶基因和943bp的ACC合成酶基因片段串联,构成全长1837bp的融合基因。将该融合基因以反义的方向插入植物双元载体pYPX145中番茄果实表达特异启动子下游,获得ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因融合的植物双元载体pOSACC。该载体外源基因表达单元的两端含两个烟草SAR序列,利于转基因的稳定遗传。以番茄栽培品种合作903子叶和下胚轴为外植体,利用根癌农杆菌进行基因转化,通过200mg／L卡那霉素选择和GUS检测,获得了105株番茄GUS阳性植株,转基因番茄果实在当代表现明显耐贮特点。经过4代的耐贮和果实农艺性状的综合选择,获得了两个表现良好的株系DR-1和DR-2,两株系果实乙烯释放量显著下降,是未转基因材料的9．5％,番茄的贮存期在50天以上。     

公雏鸡糖皮质激素受体与免疫功能的相关性

研究了用于不同剂量（７５、５０、２５、１０ｍｇ／ｋｇ）ＲＵ４８６阻断公雏鸡糖皮质激素受体１天或连续３天免疫指标变化情况。ＲＵ４８６７５和５０ｍｇ／ｋｇ阻断ＧＲ２４ｈ,公雏鸡脾淋巴细胞ＩＬ－２、ＩＦＮ诱生活性和Ｔ、Ｂ淋巴细胞增殖活性降低（Ｐ〈０．０１）,外周血淋巴细胞、单核细胞、ＡＮＡＥ＋细胞减少（Ｐ〈０．０１）;胸腺、脾脏、法氏囊的体重比减小（Ｐ〈０．０１）。每日ＲＵ４８６５０ｍｇ／ｋｇ连续３天阻     

完全失神经面瘫I／t曲线的对数相关性及预后

肌电图检测完全失神经面瘫３０例,同时检测患侧额肌、口轮匝肌Ｉ／ｔ曲线６０条,有扭结１９条,直线４１条。计算额肌、口轮匝肌Ｉ／ｔ曲线对数回归直线方程分别为：ＬｏｇＹ＝－０．６４ＬｏｇＸ＋０．９８（ｒ＝０．９９９６,Ｐ＜０．００１）和ＬｏｇＹ＝－０．７６ｌｏｇＸ＋０．８４（ｒ＝０．９９８９,Ｐ＜０．００１）。３０例患者随访１至３年,Ｈｏｕｓｅ－ＢｒａｃｈｍａｎｎⅠ级３例,２３例留有后遗症和并发症,Ⅲ级１０例,Ⅳ级１３例。出现面部明显运动时间病后２至５个月,手术损份４例未恢复。结论：完全失神经面瘫Ｉ／ｔ曲线,随脉宽减小,强度值呈直线上升;两条曲线的建立对于评定面瘫的神经损伤程度、预后及比较不同治疗方法优越性提供了依据。     

禾谷类作物细胞培养：体细胞胚性潜力的诱导与表达

体细胞胚胎发生已成为禾谷类作物细胞培养研究中的一个重要方面。本文参照近几年来发表的主要文献并结合本实验室的研究工作,对禾谷类作物的体细胞胚胎发生做了综合评述。就培养基,植物激素,氮源,渗透压,外植体来源及发育时期,起始材料的状态,培养时间等各种因素对禾谷类作物胚性愈伤组织的诱导和保持,胚性悬浮细胞系的建立以及体细胞胚胎发生与植株再生的影响进行了分析。并对长期继代培养物再生能力丧失（或胚性潜力难以充     

江浙蝮蛇毒中性磷脂酶A_2的荧光光谱学研究

用荧光光谱方法研究了江浙蝮蛇毒中性磷脂酶A_2(NPLA_2).研究结果表明NPLA_2分子中确实含有一个色氨酸残基.且位于NPLA_2分子表面;我们还发现荧光探针bis-ANS在NPLA_2分子上有一结合区,其解离平衡常数为11.6μmol/L ;利用结合了的bis-ANS与NPLA_2分子中色氨酸残基之间的能量传递计算出两者之间的距离为17.7(?).     

几种纤维素及无机吸附载体对青霉素酰化酶的吸附作用及其固定化

本文就几种纤维素和无机吸附载体对青霉素酰化酶的吸附作用及其固定化进行了研究,结果表明:DEAE-纤维素、EYI-纤维素、微晶纤维素、CM-纤维素、羟基磷灰石、中性氧化铝、硅藻土及粉末状膨润土对青霉素酰化酶都有很强的吸附能力,其固定化青霉素酰化酶的比活分别在1.47～19.43u/g之间,活力回收率为16.3％至84％,几种固定化酶的最适pH均较游离酶低,且其操作稳定性较好。