大小肾癌中CXCR4 和MMP-3的表达及其临床意义研究

目的:研究CXCR4及MMP-3的表达与大小肾癌生物学特性的关系。方法:在上海市第一人民医院泌尿外科2004年6月至2010年12月行手术治疗的肾癌患者里,任意抽出20例癌旁正常组织,30例小肾癌,30例大肾癌的标本,检验大小肾癌及正常肾组织中CXCR4及MMP-3的表达情况。结果:肾癌中CXCR4和MMP-3的表达高于癌旁正常肾组织(P0.01),大肾癌CXCR4,MMP-3的表达高于小肾癌(P0.05)。肾癌中两者的相关表达呈正相关。结论:MMP-3,CXCR4在小肾癌中的低表达可能预示了小肾癌恶性程度低、侵袭和转移能力小的生物学特点,可以预测肾癌的进展。     

粘虫幼虫血淋巴脂蛋白的分离鉴定及理化特性分析

通过利用NaBr密度梯度超速离心对粘虫Mythimna separata幼虫的血脂蛋白进行了分离及理化特性分析。查明了幼虫血淋巴内主要是高密度脂蛋白(HDLp),而低密度脂蛋白(LDLp)的含量极低。这两种脂蛋白的密度分别为HDlp 1.123g/Ml,LDLp 1.059g/mL。HDLp和LDLp蛋白含量、脂类、氨基酸的种类测定结果表明HDLp,LDLp的蛋白含量分别是25.2μg/μL和11μg/μg。HDLp水解后可获得16种氨基酸。LDLp可获得15种。氨基酸的种类比较一致,其含量变化幅度也不大。HDLp脂类部分占最多的是二酰基甘油酯(DC)和磷脂(PC)。其余的脂类依次是碳氢化合物(HC)和胆固醇?。LDLp主要是磷脂和碳氢化合物。昆虫脂蛋白的主要中性甘油酯是二酰基甘油酯。     

实验动物全心脏组织制片法和联合染色技术的应用

实验动物全心脏组织制片法和联合染色技术的应用凡平,詹洲,龚志锦（第二军医大学长海医院心血管内科,上海２００４３３）（第二军医大学病理解剖学教研室,上海２００４３３）由于科研工作的需要,我们对动物全心脏组织进行了整体切片,按照动物模型的设计,对肌纤维,...     

应用pIRES2-EGFP表达载体快速建立Hela细胞稳转细胞系

[目的]探索应用pIRES2-EGFP表达载体快速建立Hela细胞稳转细胞系的筛选方法。[方法]EcoRⅠ和Bam HⅠ双酶切,T4 DNA连接酶连接构建目的基因p IRES2-EGFP表达载体并测序确定,Lipofectamine3000转染Hela细胞分为Mock组(未转染组)、NC组(p IRES2-EGFP空载对照组)、重组质粒转染组,转染后24 h消化细胞进行初步筛选(900μg/m LG418),转染后14～16 d将长至肉眼可见的细胞克隆全部重新消化进行二次筛选(方法同初步筛选),转染后28～32 d挑选3个肉眼可见的细胞克隆,实时荧光定量PCR和WB检测目的基因过表达效率。[结果]双酶切及测序确定重组质粒成功构建,与Mock组相比,NC组无明显变化,重组质粒转染组各克隆目的基因mRNA水平分别升高109±8. 3、127±10. 5、122±9. 1倍,P 0. 01,蛋白水平分别升高33±3. 3、45±4. 7、47±4. 9倍,P 0. 01。[结论]该筛选方法 28～32d左右可快速建立Hela细胞稳转细胞系,过表达效率高,可直接进行后续实验。     

氮浓度对铜绿微囊藻、大型溞和金鱼藻三者相互作用的影响

为了解氮浓度对生物操纵和草-藻竞争的影响, 选取铜绿微囊藻、大型溞和金鱼藻分别作为浮游植物、浮游动物和沉水植物的代表, 在温度25℃, 光强2600 lx, 光暗比14h﹕10h, 磷浓度1.5 mg/L时, 研究5种氮浓度(0.5、2、4、8和16 mg/L, 用KNO₃溶液配制)下, 溞-藻, 草-藻和溞-草-藻共培养时各自的增长率和培养液中氮磷削减率的变化。结果表明: 在单独培养铜绿微囊藻时, 氮浓度控制在1.97 mg/L以下, 可有效降低培养液中藻的增长率。在溞-藻共培养时, 大型溞有效控藻的氮浓度范围为0.5—4 mg/L; 在草-藻共培养时, 有效控藻的氮浓度范围为0.5—2 mg/L, 对应氮浓度下(0.5和2 mg/L), 实验末期铜绿微囊藻细胞密度分别是溞-藻共培养的23.89%和21.51%, 控藻效果更好; 在溞-草-藻三者共培养时, 有效控藻的氮浓度范围为0.5—16 mg/L, 且氮浓度为0.5—4 mg/L时, 大型溞和金鱼藻的增长率均显著大于铜绿微囊藻, 铜绿微囊藻的增长率均为负值, 控藻效果最好。大型沉水植物的加入, 可以有效提高生物操纵的控藻效果, 减少水中氮磷含量, 长期有效地改善水质。     

BRCA1相关蛋白1对肾癌增殖和侵袭的实验研究

目的:研究BRCA1相关蛋白(BRCA1-associated protein-1,BAP1)对肾癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:通过含有不同BAP1和HAT1载体的慢病毒感染后用嘌呤霉素筛选的方法在肾癌细胞系中构建BAP1稳定低表达、HAT1稳定高表达、HAT1稳定低表达以及BAP1低表达且HAT1低表达的慢病毒细胞稳转株。通过WB和PCR验证BAP1在肾癌细胞系中对于HAT1的调控。使用CCK-8细胞增殖和TRANSWELL侵袭实验检测对于肾癌细胞增殖和侵袭能力的影响。利用免疫组化和临床回访数据分析其临床意义。结果:肾癌细胞系中BAP1表达降低后HAT1表达升高。BAP1低表达部分通过了HAT1表达升高促进肾癌的增殖和侵袭能力。在肾癌组织中BAP1的表达与HAT1表达具有相关性(P0.05)。结论:BAP1敲低的肾癌细胞中HAT1特异性的高表达可能是导致肾癌细胞增殖和侵袭能力增强的原因。BAP1与HAT1在肾癌组织中的表达具有显著相关性。     

小鼠肠道菌群HPLC分析中色谱分离条件的优化

研究了在小鼠肠道菌群的高效离子交换色谱（HPLC）分析中,不同色谱分离条件对分离效果的影响,确立了最佳色谱条件：样品上样于Toyopearl TSKgel SuperQ-650c强阴离子交换树脂柱,以0.02mol/L哌嗪-HCl缓冲液（pH8.0）平衡,洗脱盐浓度为1.0mol/L NaCl,洗脱梯度为0.1-0.5mol/L NaCl线性梯度洗脱80min,再经0.5-0.75mol/L NaCl线性梯度洗脱25min,流速1mL/min,进样量为1mL。小鼠肠道菌群HPLC分析方法的建立,为深入研究小鼠肠道菌群的组成和动态变化奠定了基础。     

基于HJ-1-A/B数据提取城市绿地信息的应用研究

先通过几何矫正、配准、裁切等预处理获取深圳市辖区的HJ-1-A/B卫星CCD2数据, 再选取城市绿地、林地、农用地等样本进行光谱特征分析, 并以深圳市基本生态控制线等数据作为辅助, 最后利用“决策树-监督”混合分类模式提取深圳城市绿地信息。将分类结果与深圳市生态资源测算的城市绿地面积进行对比, 分析发现两类数据的Pearson相关系数值为0.9997, 平均误差为8.37%; 通过空间分布对比发现, 两类数据解译获取的结果基本一致。结果有利于提高城市绿地信息的提取效率, 进而为降低区域生态环境动态监测的成本并提高监测的时间精度提供一定的借鉴。     

南药广陈皮(茶枝柑)种植技术规范

广陈皮茶枝柑Citrus reticulata cv. Chachiensis为我国重要的道地药材,主产于广东省江门市新会区,开展规范化种植可为该药材的可持续发展提供技术支撑。文中根据2006～2023年新会区不同生态区域种植茶枝柑的技术措施,结合广东省南药(广陈皮)产业技术体系创新团队2019～2023年的实地调查,从种植品种、产地环境、种苗生产、大田种植、病虫害防治、果实采摘等方面进行总结,制定其规范化种植技术标准。