抑制 Livin 基因对肺腺癌 SPC-A1 细胞增殖及顺铂敏感性的影响

目的:Livin是近年来发现的人类凋亡抑制蛋白(inhibitorof apoptosis protein,IAP)家族的新成员,发现在多数肿瘤中表达,与肿瘤发生有密切关系,并可能作为肿瘤诱导凋亡治疗的新靶点。本研究旨在探讨si RNA-Livin和夫拉平度(Flavopiridol,FP)协同凋亡诱导配体(TRAIL)两种方式有效抑制Livin表达,诱导非小细胞肺癌SPC-A1凋亡并增强对化疗药物顺铂的敏感性。方法:si RNA-Livin转染SPC-A1,Real-Time PCR检测Livin基因的表达水平,MTT检测干扰组和干扰加药组肿瘤细胞的增殖及活性;TRAIL、FP单独及联合作用诱导细胞凋亡,蛋白质印迹法检测凋亡抑制蛋白Livin的表达水平,MTT检测各处理组细胞的增殖及活性。结果:100 nmol/LFP处理组(F)细胞存活率为(84.30±1.34)%,100 ng/m LTRAIL处理组(T)为(93.40±1.56)%,FP和TRAIL联合组(F+T)为(48.02±1.35)%,si RNA-Livin处理组为(50.88±1.14)%,1.2μg/m L Cisplatin处理组为(19.30±0.89)%,si RNA-livin+Cisplatin组为(14.37±0.81)%,FP+T+Cisplatin组为(10.86±0.87)%,C组存活率为100%。F+T组对细胞的增殖抑制作用显著高于单独用药组,si RNA-livin+Cisplatin与si RNA-Livin组相比、FP+T+Cisplatin与FP+T组相比都显著增强了化疗药物对SPC-A1的杀伤作用。50μmol/LZ-VAD-FMK预处理后联合用药组细胞的存活率为(88.16±1.64)%,caspase抑制剂能明显抑制F+T联合处理组的凋亡效应。结论:RNA干扰和F+T联合用药都能显著降低凋亡抑制蛋白Livin的表达,有效抑制肿瘤细胞的增殖生长,并增强肿瘤细胞对化疗药物顺铂的敏感性,为肺腺癌的靶向治疗提供新的理论依据。     

苏木及单体成分的抗肿瘤机制研究进展

肿瘤发生的根本原因是基因调控的改变,而细胞凋亡是在基因调控下的一种细胞自我消亡的过程。因此,开发一种具有抑制肿瘤细胞生长,促进肿瘤细胞凋亡作用的药物是目前研究的重点。近年来研究发现,苏木具有明显的抗肿瘤作用,并且苏木的体内外抗肿瘤作用、不同提取物的作用、不同作用方式的效果不尽相同。此外,苏木不同提取物和各单体成分存在不同抗肿瘤谱,活性各不相同。随着对苏木及其提取物研究的不断深入,苏木及各单体成分的抗肿瘤机制研究也获得一定进展。本文对近年来苏木及其各单体成分抗肿瘤作用的研究进展作一综述。     

黄芪甲苷对马兜铃酸诱导的巨噬细胞M1型极化的作用及机制研究

目的:探讨黄芪甲苷对马兜铃酸诱导的RAW264.7细胞向M1型极化的影响,并初步探索其可能的作用机制。方法:分别采用马兜铃酸和脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞24 h,伴或不伴黄芪甲苷进行药物干预处理。采用细胞计数检测试剂盒-8(CCK 8)检测细胞活性变化,流式细胞仪检测巨噬细胞分型,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌量。反转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测RAW264.7细胞IL-6、TNF-αmRNA表达。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RAW264.7细胞p-p38和p38 MAPK蛋白表达水平。结果:CCK8结果提示黄芪甲苷在5~50μg/mL浓度范围对RAW264.7巨噬细胞无明显毒性,本研究选取10μg/mL作为实验干预浓度。黄芪甲苷能够显著改善马兜铃酸诱导的巨噬细胞活性(P<0.05),同时减少IL-6和TNF-α的分泌水平和mRNA表达水平(均P<0.05),抑制马兜铃酸和LPS诱导的M1/M2巨噬细胞比例(P<0.05)。黄芪甲苷可部分抑制马兜铃酸诱导的巨噬细胞p38 MAPK磷酸化水平(P<0.05)。结论:黄芪甲苷可减少巨噬细胞M1型极化,降低炎症因子IL-6和TNF-α水平,减少巨噬细胞的活性,从而起到减缓马兜铃酸肾损害的作用,其作用机制可能与部分抑制p38 MAPK信号活性有关。     

福建梁野山国家级自然保护区种子植物区系研究

通过野外调查、采集标本和查阅相关文献资料,编制福建梁野山自然保护区野生种子植物名录,进行植物区系组成和分布区类型的分析,并将其与周边相邻2个保护区的植物区系进行比较。结果表明:(1)梁野山自然保护区共有野生种子植物154科662属1 498种,种类丰富。(2)区系地理成分以热带分布型为主,其中在科级水平上热带分布型所属科共有85科,占总科数的69.67%;在属级水平上热带性质分布型的属有371属,占总属数的60.82%。但相当数量温带成分的存在,体现了亚热带植物区系的特点。(3)对梁野山保护区与周边相邻的武夷山和南靖南亚热带雨林保护区的植物区系比较发现,梁野山种子植物区系属数的热带属数/温带属数(R/T值,1.66)高于武夷山的R/T值(1.10)而低于南靖南亚热带雨林保护区的R/T值(2.68),梁野山种子植物区系与该相邻2个保护区的相似性系数非常接近,但在区系成分上,梁野山既有与武夷山共有而南靖南亚热带雨林保护区没有分布的温带成分,也有与南靖南亚热带雨林保护区共有而武夷山没有的热带成分,说明梁野山植物区系与其地处武夷山脉南端的地理位置相一致,具有明显的从南亚热带向中亚热带过渡的特点。     

心可舒治疗频发早搏疗效观察

目的:应用心率变异性的方法观察心可舒片对早搏的治疗效果及其影响。方法:将96例频发早搏患者随机分成治疗组(51例)和对照组(45例)。对照组给予倍他乐克缓释片口服,47.5mg/次,1次/日,治疗组在口服倍他乐克缓释片基础上加用心可舒片4片/次,3次/日。在服药前及服药后1个月各行1次动态心电图及普通心电图检查,并进行临床观察。结果:治疗组在消除早搏,改善临床症状方面较对照组明显有效(P<0.05),治疗组较对照组心率变异性改善有明显差异(P<0.05)。结论:心可舒片与倍他乐克合用可有效增加其治疗早搏的作用,同时改善心率变异性和改善倍他乐克引起的窦性心动过缓副作用,有较好的临床疗效。     

几种实验性2型糖尿病动物模型制备方法的比较

2型糖尿病是一种严重影响人类健康的内分泌代谢性疾病,其患病人数多,病程缓慢。动物模型在2型糖尿病研究中发挥了重要作用,其中实验性动物模型因其价格便宜,易于诱导和维持而被广泛应用。本文对几种常见的2型糖尿病动物模型的建立方法进行综述和评价。     

周期性单轴拉伸力学刺激对哺乳动物细胞有丝分裂方向影响的研究

哺乳动物细胞的有丝分裂过程与细胞的增殖、分化以及生物体发育、组织器官形成、损伤组织的修复和疾病的发生有关．广泛存在的力学刺激能否对细胞有丝分裂方向产生影响,以及其影响有丝分裂定向的途径尚未完全阐明．采用小鼠成纤维细胞作为模型,研究周期性单轴拉伸力学刺激对细胞应力纤维排布和有丝分裂方向的影响．结果表明,周期性单轴拉伸诱导细胞有丝分裂与应力纤维垂直于拉伸方向排布．而阻断应力纤维的两种基本组成成分(微丝和肌球蛋白Ⅱ),会造成在周期性单轴拉伸条件下的应力纤维和有丝分裂方向重排．特别是,Y27632 (10 μmol/L) 和低浓度的ML7 (50 μmol/L)、Blebbistatin (50 μmol/L)可以诱导细胞有丝分裂与应力纤维平行于拉伸方向排布．统计结果表明,在不同实验条件下,应力纤维排布和有丝分裂方向均具有高度相关性．Western blot实验表明,肌球蛋白轻链磷酸化水平与周期性单轴拉伸刺激下的应力纤维排 布和有丝分裂方向密切相关．上述结果提示：周期性单轴拉伸力学刺激通过诱导应力纤维的排布,决定了细胞的有丝分裂方向．     

浙江长兴晚泥盆世几种羽状复叶植物的发现及其意义北大核心CSCD

晚泥盆世是植物叶片形态复杂化进程中的一个重要时期,前裸子、种子、似真蕨和楔叶这四类植物都独立演化出了片化的大型叶。本文研究浙江长兴上泥盆统(法门阶)五通组的几种羽状复叶植物(3属4种),包括Sphenopteris(楔羊齿),Rhodea(须羊齿)和Triphyllopteris(三裂羊齿)。它们大多具二次羽状复叶,小羽片具有不同程度、数目和形状的裂片。这里明确Rhodea的晚泥盆世起源,并给出Triphyllopteris的最早化石记录。这些植物的分类尚不清楚,但为大型叶尤其是复叶的早期演化提供了新证据。     

海南鹦歌岭轮叶三棱栎（Trigonobalanus verticillata）群落特征与保护对策

应用样方调查法,研究了中国分布新记录种——轮叶三棱栎(Trigonobalanus verticillata)种群结构及其所处森林群落特点。结果表明：轮叶三棱栎仅分布于海南鹦歌岭海拔1100~1400 m近山脊处的热带山地雨林及热带山地常绿阔叶林群落中,与陆均松(Dacrydium pectinatum)、海南阿丁枫（Altingia obovata）等树种伴生。在2个面积为1500 m2的调查样方中共记录了90种乔灌木树种,均匀度和Shannon-Wiener指数分别为0.81、0.86和3.20、3.27,轮叶三棱栎的重要值在群落中排在第9~10位;种群结构分析结果显示该种群数量小且无Ⅰ龄级和III龄级,属不稳定种群;轮叶三棱栎生态位宽度为1.69,在群落中仅排第19位,与陆均松和鸡毛松（Dacrycarpus imbricatus）的生态位重叠值分别为0.59和0.68,但与群落优势种的生态位重叠值多小于0.3。鹦歌岭在海拔1000 m以上具有较大面积的台地和人为破坏较少可能是该种群得以幸存的重要因素,加强就地保护,开展该种植物的生物学特性研究,并建立国家级保护区,将海南中部山区各保护区有机地联合在一起为保护良策。     

中心复合实验设计法优化重组毕赤酵母表达猪胰岛素前体的培养基和诱导pH

毕赤酵母中猪胰岛素前体(Porcine Insulin Precursor,PIP)的表达受到培养基组成及培养环境的影响。本文首先通过部分因子法设计实验,筛选出影响PIP表达的显著因子。实验结果表明,在试验范围内,甲醇补料量和硫酸铵浓度为正效应因子,诱导pH为负效应因子。在此基础上,经过快速登高法逼近显著因子的最优值后,再在此值附近利用中心复合法设计实验,最终得到了PIP表达的最佳条件。经过多批次实验验证,在此条件下PIP的表达量为120.4mg/L,比优化前的值41.5mg/L提高了将近两倍。