非结核分枝杆菌肺病临床分离株的菌种鉴定及临床特征分析

为探究非结核分枝杆菌（nontuberculous mycobacterium,NTM）肺病临床分离株的菌种分布及临床特征, 对2017年5月―2018年10月就诊于复旦大学附属中山医院的90例NTM肺病患者的样本进行分析。采用快速全自动分枝杆菌培养和药物敏感检测系统（BACTEC MGIT960 System）或改良罗氏培养法对90例患者的采集样本进行培养,利用基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS）进行菌种鉴定,并对回顾性分析收集的90例患者的临床资料进行分析。结果NTM菌种鉴定为9种,其中慢速生长分枝杆菌65例,以胞内分枝杆菌（54.4%,49/90）占多数;快速生长分枝杆菌25例,以脓肿分枝杆菌（22.2%,20/90）占多数。90例患者中确诊67例、疑似23例。确诊患者中少见菌种所占比例较低（6.0% vs 26.1%,P = 0.016）。确诊与疑似患者在临床表现方面未见显著差异,但确诊患者有抗NTM治疗史的比例显著高于疑似患者（85.1% vs 4.3%,P < 0.001）。确诊患者中,快速生长NTM肺病患者既往抗结核治疗史的比例显著高于慢速生长组（52.9% vs 24.0%,P = 0.036）。本研究结果为NTM肺病的临床诊治提供了数据参考。     

敲除含α-Arrestin结构域蛋白3对肾癌细胞PI3K/AKT信号通路及增殖能力的影响

目的:探究敲除含α-Arrestin结构域蛋白3 (α-Arrestin-Domain-Containing-3,ARRDC3)对肾透明细胞癌786-O细胞PI3K/AKT信号通路和增殖能力的影响及作用机制。方法:使用Crispr-Cas9技术构建稳定敲除ARRDC3的786-O细胞系;通过免疫印迹检测敲除ARRDC3对AXL蛋白水平的影响;借助免疫沉淀技术研究敲除ARRDC3对AXL泛素化水平的影响;利用免疫印迹、shRNA干扰蛋白表达技术和及构建的敲除ARRDC3细胞检测ARRDC3和AXL表达水平对PI3K/AKT信号通路活性的影响;CCK-8技术检测ARRDC3和AXL表达水平对肾癌细胞增殖能力的影响。结果:与野生型786-O细胞相比,稳定敲除ARRDC3的786-O细胞内AXL的蛋白水平显著升高。进一步检测细胞内AXL的泛素化水平发现,ARRDC3稳定敲除组细胞内AXL蛋白的泛素化水平显著降低;免疫印迹和CCK-8实验结果显示,敲除ARRDC3会显著增加AXL/PI3K/AKT信号通路磷酸化和细胞增殖能力,而在ARRDC3缺陷细胞内降低AXL蛋白的表达,会导致AXL/PI3K/AKT的活性和细胞增殖能力恢复到与野生型相似的水平。结论:在786-O细胞内敲除ARRDC3可通过降低ARRDC3对AXL的泛素化降解,上调AXL蛋白水平和PI3K/AKT信号通路的活性,并促进肾癌细胞的增殖。     

车桑子幼苗生物量分配与叶性状对氮磷浓度的响应差异

调整叶性状和生物量分配格局是植物适应环境变化的主要途径, 研究车桑子(Dodonaea viscosa)幼苗生物量分配与叶性状对氮磷浓度的响应对认识车桑子在氮磷浓度变化下的适应策略具有重要意义。该研究通过砂培法, 测定不同氮浓度(3、5、15、30 mmol·L^-1)与不同磷浓度(0.25、0.5、1、2 mmol·L^-1)下车桑子幼苗的生长、生物量分配、叶性状的响应特征及其相互关系。结果表明: 高浓度氮(30 mmol·L^-1)促进了车桑子幼苗生长、叶片氮含量和生物量积累, 其余氮添加条件(3、5、15 mmol·L^-1)下车桑子幼苗各性状无显著差异, 但相比高氮水平, 其生物量积累和叶片氮含量显著降低, 根冠比和氮利用效率显著增加。随着磷添加浓度的增加, 车桑子幼苗生物量显著增加, 低磷条件(0.25、0.5 mmol·L^-1)限制了车桑子幼苗生长和生物量积累, 其根冠比和磷利用效率均没有发生显著变化, 但比叶面积和叶/茎生物量比例显著增加, 叶干物质含量显著降低。氮处理下, 叶片氮含量与根冠比显著负相关; 磷处理下, 叶片氮含量与比叶面积显著正相关。同时, 氮处理下, 车桑子幼苗株高、基径、总生物量等生长性状均与根冠比显著负相关, 与叶片氮含量显著正相关, 表明根冠比和叶片氮含量的调整在车桑子适应氮限制中发挥重要作用; 而磷处理下, 株高、基径、总生物量与比叶面积显著负相关, 与叶干物质含量显著正相关, 表明叶片结构性状的调整在车桑子适应低磷环境中具有重要意义。该研究表明, 车桑子幼苗生物量分配和叶性状及性状间的权衡策略对氮、磷的响应具有明显差异性, 在今后的研究中, 应关注氮和磷对植物性状影响的差异性。     

甲硫氨基酸对亚热带森林土壤硝化作用和N2O排放的影响

为探讨甲硫氨基酸对亚热带红壤硝化作用和N₂O排放的影响,选择福建省建瓯市万木林保护区的山地红壤为研究对象,在土壤饱和持水量(WHC)60%和90%的条件下,开展室内培养试验.试验分为对照(CK)、添加甲硫氨基酸(M)、甲硫氨基酸和硫酸铵(MA)、甲硫氨基酸和亚硝酸钠(MN)、甲硫氨基酸和葡萄糖(MC)5个处理.结果表明: 与对照相比,M处理使土壤NH₄⁺-N平均含量显著提高0.8%～61.3%,而NO₃^--N含量显著降低13.2%～40.7%;60%WHC条件下,MC处理土壤NO₂^--N含量高于M处理,MA、MN处理NO₃^--N含量高于M处理,且MN处理高于MA处理,M处理于试验后期最低,表明甲硫氨基酸抑制了硝化作用的亚硝化过程.碳添加处理使甲硫氨基酸在一定程度上降低NH₄⁺-N含量,抑制了土壤自养硝化,并且甲硫氨基酸和碳源共同作用下NO₃^--N含量变化与土壤水分条件有关,在90%WHC条件下,碳加入后反硝化作用更明显;而NO₃^--N含量降低不足以表明是异养硝化受到抑制所致.甲硫氨基酸在一定程度上促进土壤N₂O的释放,90%WHC条件下较60%WHC条件下释放量更大,且葡萄糖添加的促进效果更明显.     

黄色羊驼皮肤细胞周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)完整CDS区结构域分析

用RT-PCR法获得了黄色羊驼皮肤的CDK5完整CDS区,其长度为891bp,与其他哺乳动物相比,高度保守。通过对其结构域分析,发现羊驼CDK5编码区在第10-203位氨基酸间含有多个激活位点如ATP结合位点和P25底物结合位点(?)第1-9位氨基酸和第204-292位氨基酸为两个非活性部位,其中在第204-292位氨基酸中,亮氨酸排列与亮氨酸拉链结构相似,而且位于羊驼CDK5的C-端,可能是与基因转录调控有关。     

镉和铅对鲫鱼肝胰脏过氧化氢酶活性的影响

采用急性毒性实验方法,研究了不同ρCd2+和ρPb2+及二者混合溶液,染毒24、48、72、96 h后,对鲫鱼肝胰脏过氧化氢酶(CAT)活性的影响.结果表明:在实验剂量范围(ρCd2+为0.5～6.0 mg/L,ρPb2+为10.0～40.0 mg/L),0.5、2.0 mg/L的Cd2+对CAT活性有诱导作用,6.0 mg/L的Cd2+对CAT活性有抑制作用;Pb2+胁迫对CAT活性随着染毒时间的延长而逐渐降低;2.0 mg/L Cd2+与20.0 mg/L Pb2+混合胁迫对CAT活性有明显的诱导作用;0.5mg/L Cd2++10.0 mg/L Pb2+,6.0 mg/L Cd2++40.0 mg/L Pb2+混合胁迫对CAT活性有明显抑制作用.Cd2+和Pb2+胁迫对CAT活性的影响呈剂量效应,二者关系曲线为抛物线,抛物线顶点是鲫鱼对Cd2+和Pb2+污染从适应到中毒反应的阈值,可间接作为检测环境污染情况的指标.     

森林与气候变化的赛跑

碳循环：森林采伐每年释放出全世界17%的碳和其他温室气体。在印度尼西亚,80%的碳排放都是由于森林采伐造成的。大自然保护协会（TNC）正在帮助当地建立能为公益团体保护森林、减少碳排放提供资金支持的市场。     

利用Red重组系统敲除大肠杆菌 O157:H7的waaL 基因

目的:利用λ噬菌体Red重组系统敲除大肠杆菌O157:H7的waaL基因。方法:以pKD4为模板扩增出与waaL基因上下游同源的、含有卡那霉素抗性基因的PCR产物。然后电击转化到大肠杆菌 O157:H7 中,利用Red重组系统,通过卡那霉素抗性基因两侧的waaL基因序列在体内与waaL基因发生同源重组,置换了 O157:H7 基因组中的waaL基因。并进一步利用卡那霉素抗性基因两侧的FRT位点,通过FLP位点专一性重组将卡那霉素抗性基因敲除。结果:成功构建了敲除waaL基因且不带卡那霉素抗性基因的菌株。     

续随子的组织培养与快速繁殖

本文对能源植物续随子（Euphorbia lathyris L．）进行离体培养与快速繁殖技术研究。结果表明：以种子、茎段和顶芽为外植体均能诱导获得无菌苗,其中以茎段或顶芽的芽诱导率较高;幼芽继代增殖的最佳培养基是White＋TDZ0．05mg·L。＋IBA0．01mg·L^（-1）＋0．1％活性炭,培养25d的增殖系数约为4．5;而最适生根培养基为1／2MS＋NAA1．0mg．L^（-1）＋0．1％活性炭,炼苗移栽后,成活率约为60％。培养过程中,通过控制细胞分裂素浓度能有效解决续随子培养中的玻璃化问题,添加0．1％的活性炭对缓解外植体和无菌苗褐化效果较好。     

不同的高温模式对不同密度棉蚜存活和繁殖的影响

为探索趋近自然状态的渐变性高温胁迫对不同密度棉蚜Aphis gossypii Glover的影响,室内研究了4种不同高温模式下,不同密度(5、10、20、40)棉蚜的存活和繁殖。结果表明:随着最高温度值的升高和密度的增加,棉蚜存活率和繁殖率均呈下降趋势。当最高温度值升至40℃以上时,棉蚜存活率和繁殖率均显著下降,不同密度棉蚜存活率和繁殖率均没有差异。即随着温度的升高,密度对棉蚜的作用逐渐减弱。最高温度值为42℃时,棉蚜在3～4 d内全部死亡。研究结果为提高棉蚜种群预测准确性、科学决策防治措施提供依据。