模式生物衣藻及其研究进展

单细胞衣藻（Chlamydomonas）由于其生活周期简单,培养方法简便,易于分离得到系列的突变体,并已建立了分子遗传学研究技术与遗传分析系统,成为植物光合作用、鞭毛组装与功能、细胞周期及节律、细胞信号传导与光感受、细胞识别等重要生物学过程研究的模式生物体。本文对模式生物衣藻及其相关生物学途径的研究进展作一综述。 Abstract:The unicellular alga Chlamydomonas offers a simple life cycle,easy culture and isolation of series of mutants,established the techniques and tool kit for molecular genetics and genetics analysis.It is now becoming the model organism for studies on photosynthesis in plant,flagellar assembly and function,cell cycle and circadian rhythms,signal transduction,light perception and cell recognition.It is summarized the progress of study on Chlamydomonas as a model organism in this paper.     

酵母菌表达倍菲隆发酵工艺研究

目的 :为了探索用酵母菌表达乙型干扰素 (倍菲隆 )的大批生产的发酵工艺流程及优化的重要参数。选用 1 5L不锈钢发酵罐作为乙型干扰素发酵工艺研究系统。方法 :探索了种细胞密度对初始发酵期 (甘油利用期 )的影响 ,启动甘油补充期的溶解氧浓度 ,诱导目的蛋白表达时添加甲醇的速率条件控制 ,pH对酵母菌生长与蛋白表达的影响以及发酵时间对乙型干扰素表达量影响等重要发酵工艺参数。结果 :接种高密度的种菌 (OD60 0为 9)时酵母菌增殖快 ,湿细胞重量于1 8h即达到 1 5 7g L。当DO恢复至 67%时即开始补充甘油可使酵母菌在 5h内增殖达到 2 1 9g L。添加甲醇速率从 2 %(甲醇终浓度为 0 0 3%)开始 ,逐步增加 ,在 2 4h内达到 33%的添加速率 (甲醇终浓度为 0 5 %)。甲醇诱导前pH为 6时最有利于酵母菌生长 ,在蛋白表达时期 ,控制发酵罐内pH值在 3 0 ,可得最高蛋白表达量。发酵 70h乙型干扰素表达量达到高峰。结论 :接种高密度种菌可促进工程菌生长 ,当DO恢复至 67%时开始补充甘油可加快酵母菌生长 ,在诱导期中缓慢添加甲醇并维持发酵罐pH为 3 0 ,发酵 70h可获得最佳蛋白生产量。     

大麦1H特异性SAPs标记和ASA标记的创制

选取大麦1H染色体的STS标记MWG913特异性扩增小麦,把得到的片段进行克隆。用Taq Ⅰ酶切分类并测序,把得到的序列同大麦的序列进行比较,依据比较结果,选取对大麦特异的内切酶,用该酶来酶切大麦、小麦、黑麦、长穗偃麦草、中间偃麦草、簇毛麦的MWG913扩增产物,获得对大麦1H染色体特异的CAPs标记。同时,依据酶切位点碱基的差异设计引物对扩增的产物进行第二次扩增,得到该位点的一对染色体特异性ASA标记。     

喜树内生真菌的分离及其抗肿瘤活性代谢产物的筛选方法

从喜树(Camptotheca acuminata Decne.)的根、枝条、叶和果实中分离纯化了48株内生真菌,通过对各个菌株的少量发酵培养,HPLC分析结合色谱峰紫外扫描检测方法,以紫外扫描图谱的相似性为依据,对喜树内生真菌产生喜树碱结构类似物进行初步筛选,并进一步以抑瘤实验确证其抗肿瘤活性.结果证明,以该方法筛选到的10个内生菌株中有7个菌株发酵液对HL-60细胞增殖具有显著的抑制活性.相对于常规的生物活性筛选,高效液相色谱结合色谱峰紫外光谱的方法,在药用植物内生真菌活性次生代谢产物筛选研究中具有快速、高效的特点.     

双歧杆菌制剂对大鼠肝硬化模型的影响

目的探讨肠道环境改变与大鼠肝硬化的关系.方法 90只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、预防组、晚期治疗组和模型组.预防组和晚期治疗组分别从不同时期开始给予喂服双歧杆菌制剂.实验第11周末处死所有大鼠,HE染色观察肝脏病理改变,测定血清转氨酶(ACT)、白蛋白水平及血浆内毒素、一氧化氮(NO)含量.结果预防组肝硬化病变程度轻,晚期治疗组病变程度介于模型组和预防组之间.预防组、晚期治疗组血清ALT和血浆内毒素、NO水平明显低于模型组(P＜0.05～001),白蛋白水平高于模型组(P＜0.05).结论双歧杆菌制剂通过改变肠道环境,对肝硬化病变起到了稳定和缓解作用,提示肠道细菌过度生长等肠道环境改变是肝硬化病变发展的重要机制之一.     

枯草芽孢杆菌JA脂肽类及挥发性物质抑菌效应的研究

枯草芽孢杆菌JA产生的脂肽类抗生素对植物病原真菌有广谱抗性.将发酵液经过酸沉淀、甲醇抽提以及反相高效液相色谱等步骤,分离得到脂肽类抗生素的纯品.经IC50实验和抗菌谱测定,考察了脂肽类抗生素对多种植物病原菌的作用,确定了脂肽类抗生素的抗菌谱.深入研究表明,枯草芽孢杆菌JA还产生未知成分的挥发性抑菌物质,能够抑制灰霉病菌孢子的萌发和菌丝的生长.脂肽类抗生素和挥发性抑菌物质的协同作用,有助于提高枯草芽孢杆菌的生物防治效果.     

L-乳酸高产菌株的选育和产酸条件的研究*

为了获得更适于工业生产的产乳酸菌株 ,采用低能离子诱变方法 ,对出发菌米根霉(Rhizopusoryzae)PW35 2进行改良 ,获得高产L ( + ) 乳酸菌株RE330 3,其产酸比亲株提高75 %。用正交试验方法对突变株适宜产酸条件进行了研究 ,在最优条件下 ,其产酸量可达1 31～ 1 36g L ,最高可达 1 40g L ,糖转化率为 86%～ 90 %。     

红豆杉细胞周期时相与紫杉醇诱导合成的关系初探

利用植物细胞培养生产药用次生代谢产物 ,普遍存在着次生代谢物产量不稳定的问题。次生代谢物是一大类无明显生理功能或者非生长发育所必需的小分子有机化合物 ,其生物合成与积累一般发生在植物某些器官和组织发育的某个时期。因此 ,植物细胞的生长发育状态与次生代谢物产量有密切的关系。细胞周期时相在很大程度上反映细胞本身所处的状态 ,对细胞周期时相进行调控可能对次生代谢物产量具有重要影响 [1 ] 。诱导作用是提高植物次生代谢物产量的有效方法之一 [2 ,3]。我们以 2种经典同步化方法 ,建立红豆杉悬浮细胞初始周期时相模型 ,对不同…     

H~+、N~+、Ar~+注入对啤酒酵母存活率的影响及SEM和ESR研究

研究了H+ 、N+ 、Ar+ 低能离子注入酵母菌剂量对存活率的影响 ;离子注入对酵母细胞的刻蚀损伤作用和离子注入后对细胞内自由基产生的影响。结果表明 :酵母的存活率随着注入剂量的增加而减少 ,离子注入对其存活率影响程度是H+ >N+ >Ar+ ,其半致死剂量分别是 2 .1× 10 1 4 ions cm2 ,5 .5× 10 1 4 ions cm2 ,6 .8× 10 1 4 ions cm2 。随着离子注入剂量的增加对酵母细胞的损伤和刻蚀作用逐渐增大 ,刻蚀损伤作用具有不均匀性 ;离子注入后酵母细胞内自由基产额明显增加 ,随着注入剂量的增大 ,自由基的强度也增大 ,逐渐呈饱和趋势     

微生物CoQ合成途径及CoQ10生产菌株的分子生物学改造

CoQ10具有呼吸链电子传递者、抗氧化性、调控基因表达等多种生理生化功能,目前不仅用作药物也用作食品添加剂。微生物发酵法是目前生产CoQ10最有效的方法。本文就有关微生物CoQ合成途径及基于CoQ合成途径的CoQ10生产菌株分子生物学改造的策略与研究进展进行了综述和展望。