十例染色体结构畸变携带者的SCE分析

一般认为,SCE 反映 DNA 的损伤,SCE分析可作为哺乳动物突变形成的重要指标,也可作为研究染色体稳定性的较好指标。近年来,SCE 分析在检测突变剂、致癌剂对染色体的效应等研究中得到广泛应用,关于 SCE 的研究已成为细胞遗传学领域中一个十分活跃的方面。但对于染色体结构畸变携带者的 SCE 分析,文献中尚不多见,在国内则还未有报道。     

培养条件下发菜的形态建成

固体培养基培养的发菜(Nostoc flagelliforme)在黑暗与低光强(2·s)条件下细胞发育受到抑制,在光强10、20、30、60 μmol/m2·s 条件下细胞生长良好, 但在60 μmol/m2·s 条件下藻丝体易变黄; 液体充气培养的发菜在光强20、60、180 μmol/m2·s 条件下生长速率、类胡萝卜素与多糖含量均随光强升高而增加。发菜在低营养水平时形成的异形胞较多, 异形胞的发生位置也多样, 有端生、间生和连生。当琼脂浓度为0.5%—4%时发菜具有相同的形态发育特征, 从藻殖段发育至丝状聚集体状态, 再从聚集体中释放藻丝; 当琼脂浓度为6%—8%时发菜发育至丝状聚集体状态, 藻丝包裹在厚胶鞘中, 观察不到藻丝和藻殖段的释放。以上结果表明光照和培养基的含水量对发菜细胞发育具有重要影响。       

Ⅰ型胶原蛋白在云母表面自组装的AFM研究

目的：利用原子力显微镜(AFM)观察不同浓度、pH值的I型胶原溶液在云母表面的自组装情况,从而研究样品浓度和酸度对胶原蛋白自组装的影响。方法：配制0．8μg/ml、8μg/ml、0．5mg/ml、1．0mg/ml、4mg/ml的胶原醋酸溶液(pH值2．7—3.0)和0.2mg/ml、0．5mg/ml、1．0mg/ml的胶原PBS溶液(pH值7．2—7．4)。取5μl的胶原蛋白溶液,滴于新剥离的云母表面,空气中在25℃室温下自然干燥后用AFM观察。结果：酸性条件下,低浓度时胶原蛋白在云母表面只是简单的吸附,随着浓度的增加,胶原分子在云母表面开始组装形成网状的结构,当浓度达到饱和浓度时,胶原形成无规线团结构。在中性条件下,胶原更容易行成纤维,随着浓度的增加,纤维的直径和长度都随着增加。结论：胶原蛋白分子有在固体表面进行自组装的特性,自组装的结果与样品的浓度、样品溶液的pH值有着很大的关系。     

肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7紧密粘附素免疫保护性片段(Intimin-C)的克隆表达纯化及部分生物学活性研究

克隆表达并纯化肠出血性大肠杆菌 (EHEC)O15 7∶H7紧密粘附素免疫保护性片段 (Intimin C) ,并对其部分生物学活性进行研究。设计引物采用PCR自O15 7菌基因组扩增紧密粘附素免疫保护性片段 (Intimin C)的编码基因eae C ,T A克隆测序后构建原核表达质粒 pET 2 8a(+) eaeC并转化E .coliBL2 1(DE3) ,诱导表达破菌及包涵体洗涤后采用离子交换柱和亲和层析柱对目的蛋白进行纯化 ,PAGE电泳初测目的蛋白的分子量、滴定法初测目的蛋白的等电点 ,并以纯化蛋白Intimin C免疫家兔制备多抗血清。采用PCR法自O15 7菌基因组扩增出了约 90 0b…     

压电生物传感器研究进展

作为一项新兴综合型科学技术,生物传感器是近年来生物化学、分子生物学、传感器技术等领域的研究热点之一。本介绍了压电生物传感器的基本原理、组成、分类,并对近年来国内外的研究进展、生物识别元件的固定化技术以及压电生物传感器的发展趋势作综合评述。     

硫矿硫化叶菌P2分子伴侣基因的克隆表达及其性质

[目的]研究重组表达的硫矿硫化叶菌P2分子伴侣β亚基体外同源聚合体的结构和生化功能.[方法]利用PCR技术从硫矿硫化叶菌P2的基因组DNA中克隆得到分子伴侣β亚基的基因,将该基因克隆到表达载体pET-21a( )上并在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了表达.对纯化后的β亚基单体进行体外聚合,利用透射电镜观察β分子伴侣的结构,并对其促蛋白折叠性质进行了研究.[结果]硫矿硫化叶菌P2分子伴侣β亚基基因在大肠杆菌BL21中实现了高效表达,纯化后的分子伴侣β亚基单体在ATP和Mg2 存在的条件下可自组装形成分子伴侣聚合体.透射电镜观察表明:该β分子伴侣具有Ⅱ型分子伴侣典型的双层面包圈结构,每个环由8个亚基构成.该β分子伴侣具有ATPase活性,最适反应温度为80℃;它不仅能够促进变性的绿色荧光蛋白(GFP)重新折叠,而且还能有效的提高木聚糖酶的热稳定性.[结论]本文根据P2基因组序列分析预测的分子伴侣基因设计引物,克隆表达了硫矿硫化叶菌P2分子伴侣的β亚基,纯化后对其进行体外聚合,透射电镜观察表明该聚合体具有Ⅱ型分子伴侣的经典结构,功能分析表明该β分子伴侣能够在体外促进异源蛋白质的折叠、提高其它酶分子的热稳定性.这为进一步深入研究嗜热古菌耐热抗逆的分子机制,奠定了良好的基础.     

牡山羊草Aegilops juvenalis Puroindoline b基因的克隆

Puroindoline a（Pina）和puroindoline b（Pinb）是控制小麦籽粒硬度的主效基因。根据已报道的小麦Pinb基因的保守序列,设计合成了一对特异性引物,对六倍体牡山羊草Aegilops juvenalis（UUMMDD）的基因组DNA和胚乳eDNA进行Pinb基因扩增、克隆和序列测定,发现了两个新型Pinb等位基因Pinb-allele-1和Pinb-allele-2。该基因全长360bp,编码119个氨基酸残基。它编码的蛋白和麦类作物Puroindoline B（PinB）的成熟蛋白有非常高的同源性,具有麦类作物PinB蛋白所特有的WPTKWWK的色氨酸结构域和10个半胱氨酸所形成的5个二硫键结构。与软粒小麦ev．Capitole的Pinb-D1a相比较,其核苷酸同源性为93．1％、93．3％,氨基酸同源性为90．8％、92．4％。Pinb。allele。1和Pinb—allele一2分别含有11和9个氨基酸变异位点。RT—PCR证实了Pinb—allele一2基因在籽粒胚乳中的表达。SouthernBlot分析结果表明,牡山羊草中含有两个拷贝的Pinb基因,其中包含着与小麦差异较大的籽粒硬度控制基因。     

两种赤眼蜂对小菜蛾卵的寄生能力和种间竞争

在实验室内研究了本地天敌拟澳洲赤眼蜂和外来天敌短管赤眼蜂在不同卵龄和不同空间条件下对小菜蛾卵的寄生和种间竞争.结果表明,在0～62 h的小菜蛾卵上,拟澳洲赤眼蜂和短管赤眼蜂单独接蜂时对小菜蛾卵的寄生率、子代羽化率、子代雌蜂百分率随卵龄下降,而后代发育死亡率则随卵龄增加.短管赤眼蜂对各龄小菜蛾卵的寄生率、子代羽化率、子代雌蜂百分率均较拟澳洲赤眼蜂高,而子代蜂的发育死亡率则较拟澳洲赤眼蜂低.两种蜂对小菜蛾卵龄的要求都不太严格,在小于48 h的小菜蛾卵上都能产卵寄生,且寄生率高于50%,但短管赤眼蜂寄生对小菜蛾卵龄的要求更宽松.在两种蜂混合接蜂时,后代中短管赤眼蜂的比例在各处理中都高于50%,且随寄主卵龄增加,当小菜蛾卵龄大于48 h后,短管赤眼蜂的比例高达100%,说明短管赤眼蜂对小菜蛾有更强的寄生能力和竞争能力.拟澳洲赤眼蜂和短管赤眼蜂单独接蜂时,在4～22cm^3空间范围内,各处理间对小菜蛾卵的寄生率没有显著差异,而短管赤眼蜂的寄生率(76.4%～86%)略低于拟澳洲赤眼蜂(88.7%～92.3%).当空间大于53 cm^3时,寄生率显著下降,在102cm^3空间时显著降低到50%.混合接蜂时各处理间寄生率差异不显著.两种接蜂方式对后代羽化率和雌蜂百分率没有太大影响,蜂的后代发育死亡率在两种蜂单独接蜂时随空间而增加.在4～102cm^3空间范围内,混合接蜂后代雄蜂中短管赤眼蜂从80%以上降低到20%以下,说明短管赤眼蜂的竞争能力随接蜂空间的加大而降低.     

生命现象中的耗散导致有序性

生命系统和人类社会是一种更为高级的耗散结构组织体。研究并维持其有序性,对于生物进化的研究,生命现象的深入阐述,乃至改善人类生存状态,改善人类与自然的关系都有重要意义。