植物抗细菌病害基因工程研究进展和展望

综述了利用基因工程提高植物对细菌病害抗性的各种方法,包括利用非植物抗菌蛋白,抑制细菌的致病或毒性因子,增强植物本身的抗病能力和人工诱导侵染点细胞程序化坏死。这些方法的成功都与抗菌化合物的作用机制及植物和病原细菌之间的相互作用的分子生物学的研究密切相关,还展望了这些方法的应用前景。     

ASK1 physically interacts with COI1 and is required for male fertility in Arabidopsis

Jasmonates are a new class of plant hormones that play important roles in plant development and plant defense. The COI1 gene was previously shown to be required for jasmonate-regulated plant fertility and defense. We demonstrated for the first time that COI1 interacts with the Arabidopsis SKP1-LIKE1 (ASK1) to form a complex that is required for jasmonate action in planta. Functional analysis by antisense strategy showed that ASK1 is involved in male fertility.     

苎麻疫霉激发蛋白基因断裂现象初探

苎麻疫霉（PhytophthoraboehmeriaeSaw．）可分泌具有诱抗作用的激发蛋白（α－elicihn）,根据α－elicitin第24～30和56～63位保守区氨基酸推导的寡核苷酸引物序列,对苎麻疫霉基因组DNA进行特异PCR扩增反应,发现其扩增的DNA片段大于预计的片段。回收纯化的特异扩增DNA,并进行克隆和测序分析,结果表明特异扩增的elicihn基因亚克隆DNA为570hp,大于预计的117bp。在特异片段中,存在3个内含子将基因断裂成4个阅读框架,即ORF1、ORF2、ORF3和ORF4,其中ORF1和ORF4含有与引物相同的序列,但与其它序列与已克隆的elicihn基因无同源性。因此,芒麻疫霉基因组中的elicitin基因可能存在断裂现象。     

ASK1 physically interacts with COI1 and is required for male fertility in<Emphasis Type="Italic">Arabidopsis</Emphasis>

Jasmonates are a new class of plant hormones that play important roles in plant development and plant defense. TheCOI1 gene was previously shown to be required for jasmonate-regulated plant fertility and defense. We demonstrated for the first time that COI1 interacts with theArabidopsis SKP1-LIKE1 (ASK1) to form a complex that is required for jasmonate action inplanta. Functional analysis by antisense strategy showed thatASK1 is involved in male fertility.     

烟草青枯病拮抗内生细菌的分离、鉴定及其田间防效

从病区健康烟草植株茎杆内分离到一株对烟草青枯罗尔氏菌(Ralstonia solanacarum)有强拮抗作用的内生细菌,命名为B-001菌株.拮抗性研究表明,B-001菌株对多种革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌以及病原真菌均有较强的抑制作用.形态和生理生化特征初步表明菌株B-001为芽孢杆菌属(Bacillus)细菌.经扩增、测序得到B-001的16S rDNA序列,GenBank接收号为DQ444283.用ClustalX进行多重序列对比,并通过MEGA3方法构建16S rDNA系统发育树,表明:菌株B-001与Bacillus subtilis (DQ415893)的相似性为99.2%,并处于同一分支;结合形态和生理生化指标,将其鉴定为枯草芽孢杆菌(B. subtilis).2005和2006年在湖南省桂阳县、宁乡县进行了田间试验,防效在40.03%～78.14%,防治效果良好,且明显优于农用链霉素.     

诱抗剂诱导水稻抗寒蛋白研究

诱抗剂是从中草药中筛选出来的植物性药剂,它能显著提高水稻抗寒和抗稻瘟病能力,为了进一步明确诱抗剂诱导水稻抗寒机制,进行了诱抗秀导水稻抗寒 蛋白研究,用1000倍诱抗剂浸种湘早籼9号,89－229和V56三个水稻品种或相合,三叶期喷1000倍诱抗剂经6度低温胁迫48h后,进行SDS－PAGE分析,结构表明三个水稻品种经诱抗剂诱导均未发现分子质量在14ku-97ku之间新的蛋白质。     

杂交水稻抗病性遗传研究初报

二年间,对大量的杂交水稻组合进行了抗病性遗传分析。结果表明,杂交水稻对稻瘟病和白叶枯病 的抗性受细胞核基因控制。抗病性在F：中的表现是：抗性显性、抗性隐性、中间类型（部分显性）,以及 出现双亲所没有的新类型。为了获得更多的抗病的杂交水稻F：,我们认为有必要将抗病性导入不育系 中去,以克服当前不育系抗性较差的缺点。     

苎麻疫霉诱抗激发蛋白的纯化及其特性

苎麻疫霉(Phytophthora boehmeriae Saw．)在Plich’s培养液中产生的蛋白质用硫酸铵沉淀后,经DEAE—sepharose F.F.阴离子交换柱层析和HPLC层析,分离纯化出可诱发甜椒和三生烟产生过敏性坏死反应的激发蛋白(boehmedaein),经HPLC鉴定达到液相色谱纯,其分子量约为10.6kD,pI为4．32,氨基酸组成和N-末端20个氨基酸序列与已报道的elicitin蛋白具有广泛的同源性。诱导抗病性测定表明,bochmedacin可诱导非寄主三生烟和茄门甜椒产生过敏性坏死反应,并可诱导辣椒对疫病的抗性,其效果为30～40％。     

拟南芥ASK1与COI1形成蛋白复合体并调控雄性不育

茉莉素(茉莉酸及其衍生物)是一类新的植物激素, 对植物的生长发育以及调控植物抗性起重要作用. COI1基因已被证明介导茉莉素所调控的植物育性和抗性. 用生物化学和分子生物学手段, 证明了ASK1与F-box蛋白COI1发生相互作用, 并在植物体内形成蛋白复合体. 利用反义RNA策略进行功能分析, 表明ASK1调控植物的雄性不育. 这为阐明茉莉素调控植物生长发育的分子机理提供了重要线索.     

麻疫霉诱抗激发蛋白的纯化及其特性

苎麻疫霉（ＰｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｂｏｅｈｍｅｒｉａｅＳａｗ．）在Ｐｌｉｃｈ’ｓ培养液中产生的蛋白质用硫酸铵沉淀后,经ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦ．Ｆ．阴离子交换柱层析和ＨＰＬＣ层析,分离纯化出可诱发甜椒和三生烟产生过敏性坏死反应的激发蛋白（ｂｏｅｈｍｅｒｉａｅｉｎ）,经ＨＰＬＣ鉴定达到液相色谱纯,其分子量约为１０．６ｋＤ,ｐＩ为４．３２,氨基酸组成和Ｎ－末端２０个氨基酸序列与已报道的ｅｌｉｃｉｔｉｎ蛋白具有广泛的同源性。诱导抗病性测定表明,ｂｏｅｈｍｅｒｉａｅｉｎ可诱导非寄主三生烟和茄门甜椒产生过敏性坏死反应,并可诱导辣椒对疫病的抗性,其效果为３０～４０％。