随机扩增多态性对白色念珠菌分型的估价

利用随机扩增多态性（ＲＡＰＤ－ＰＣＲ）的方法对４８株白念珠菌Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ Ｂｅｒｋｈ进行了分析。由初步试验中,随机选用了１８种引物?筛选出ＯＰＡ－１４引物,该引物扩增的带型清晰可辨,不同菌株之间扩增的带数６－１２条不等,共有６条主带。扩增片段的长度粗略估计在３００－２０００ｂｐ左右。除个别菌株的带型相同以外,大多数菌株之间呈多态性分布,其带型数目和扩增的片段存在差异。对简单的Ｄ     

我国北方地区裸胞壳属（Emericella）的种

对１４０２份来自于东北,华北及西北地区的土样进行裸胞壳属菌的分离。结合菌落开矿的扫描电镜下囊孢子的形态将各菌鉴定到种。结果表明我国北方地区分布有８个种,１个变种,分别是无冠裸胞壳,皱折裸胞壳,茴香裸胞索,宫治裸胞壳,构巢裸胞索,褶皱裸皱胞壳及波状裸胞,四脊裸胞索,褶皱裸胞索及波状裸胞壳。     

我国北方地区裸胞壳属(Emericela)的种

对１４０２份来自于东北、华北及西北地区的土样进行裸胞壳属（Ｅｍｅｒｉｃｅｌａ）菌的分离。结合菌落形态及扫描电镜下子囊孢子的形态将各菌鉴定到种。结果表明我国北方地区分布有８个种,１个变种,分别是无冠裸胞壳（Ｅｍｅｒｉｃｅｌａａｃｒｉｓｔａｔａ）、皱折裸胞壳（４Ｅｍｅｒｉｃｅｌａｃｏｒｒｕｇａｔａ）、茴香裸胞壳（Ｅｍｅｒｉｃｅｌａｆｏｅｎｉｃｕｌｉｃｏｌａ）、宫治裸胞壳（Ｅｍｅｒｉｃｅｌａｍｉｙａｊｉ）、构巢裸胞壳（Ｅｍｅｒｉｃｅｌａｎｉｄｕｌａｎｓｖａｒ．ｎｉｄｕｌａｎｓ）、构巢裸胞壳宽脊变种（Ｅｍｅｒｉｃｅｌａｎｉｄｕｌａｎｓｖａｒ．ｌａｔａ）、四脊裸胞壳（Ｅｍｅｒｉｃｅｌａｑｕａｄｒｉｌｉｎｅａｔａ）、褶皱裸胞壳（Ｅｍｅｒｉｃｅｌａｒｕｇｕｌｏｓａ）及波状裸胞壳（Ｅｍｅｒｉｃｅｌａｕｎｄｕｌａｔａ）。除银川地区以Ｅｍｅｒｉｃｅｌａａｃｒｉｓｔａｔａ为优势菌外,各地区以Ｅｍｅｒｉｃｅｌａｎｉｄｕｌａｎｓ最为常见。文中对常见菌种进行了简要的概述,对在我国较少见的种进行了详细的描述和讨论     

薇甘菊乙醇酸氧化酶基因的克隆、序列分析和原核表达

利用SSH和RACE相结合的方法获得了薇甘菊乙醇酸氧化酶基因cDNA全长,并对该序列进行了生物信息学分析。随后将该基因的cDNA编码区克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组表达质粒,转化到大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)中进行表达。序列分析表明,薇甘菊乙醇酸氧化酶基因cDNA全长1 363 bp,编码369个氨基酸,命名为MmGO（GenBank登录号EU716626）,推测的MmGO分子量为40.32 kDa,等电点为8.99。系统进化分析表明,MmGO与芸苔的GO序列亲缘关系比较近。将该基因重组到pET-32a(+)中进行原核表达,经0.1 mmol·L^-1 IPTG,25℃诱导4 h,获得了具有较高表达水平的融合蛋白6×His MmGO,Western-blot证实表达的6×His-MmGO能与抗6×His的单抗发生特异性反应,分子量约为60 kDa,与预测的融合蛋白6×His-MmGO分子量相符。为进一步研究融合蛋白6×His-MmGO的活性和功能奠定了基础。     

阿奇霉素治疗支原体肺炎的序贯疗法定量分析

利用室分析方法,建立了药物动力学模型,给出了静脉、口服多次用药后血药浓度,并绘制出药时曲线,分析了所给的阿奇霉素治疗支原体肺炎的序贯疗法用药方案可行性,提高了用药的依从性。     

严重贫血患者一过性感染放射状土壤杆菌

放射状土壤杆菌 (Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒａｄｉｏｂａｃｔｅｒ)是植物致病菌 ,主要存在于土壤 ,偶尔从人类标本中分离。 1999年 9月 11日我们自 1例贫血患者中分离出 1株放射状土壤杆菌 ,报告如下。患者 ,男 ,76岁 ,因进行性面色苍白 3年、发热半年于 1999年 9月 4日以“贫血查因”入院。体温 38℃ ,血常规 :ＷＢＣ 1.8× 10 9/Ｌ ,Ｎ 0 .71,Ｌ 0 .2 5 ,Ｍ 0 .0 1,Ｅ 0 .0 0 8,ＢＡ 0 .0 15 ;ＲＢＣ 1.17× 10 12 /Ｌ ;ＨＢ 33ｇ/Ｌ ,ＰＬＴ 5 6× 10 9/Ｌ ;尿常规 :外观稍混浊 ,蛋白 ( ) ,ＷＢＣ /ＨＰ。临床诊断为骨髓增生…     

干热法对人血浆血管性假血友病因子冻干品中病毒灭活效果的观察

目的探讨干热灭活法(dry heat treatment)对血管性假血友病因子(von willebrand factor,v WF)中猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)和脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)的灭活效果。方法以PPV或EMCV作为灭活指示病毒与v WF混合,并分别在(80±1)℃4、8、12、24、36、48、72 h,(90±1)℃4、12、24、36、48 h以及(99±1)℃5、15、30 min进行干热灭活处理。将在干热灭活前以及干热灭活后不同温度时间段的v WF样品接种ST细胞(swine testis)或Vero细胞培养,观察细胞病变(cytopathic effect,CPE),用Reed-Muench法计算残余PPV和EMCV的病毒滴度。对无CPE的样品进行盲传3代培养,验证其灭活效果,并检测干热处理前后的v WF活性。结果v WF中EMCV滴度在(80±1)℃、(90±1)℃以及(99±1)℃灭活条件下,均下降超过4.0 lg TCID_(50)/0.1 m L,v WF中PPV的滴度下降也均超过4.0 lg TCID_(50)/0.1m L。干热法灭活后v WF的活性下降20%,质量稳定。结论干热法可以灭活v WF中的PPV以及EMCV,且对样品的活性影响在允许范围之内。     

妇女生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型和人乳头瘤病毒的感染及其相关关系的研究

为探讨妇女生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨｅｒｐｅｓＳｉｍｐｌｅｓＶｉｒｕｓ２,ＨＳＶ２）和人乳头瘤病毒（ＨｕｍａｎＰａｐｉｌａｍａｖｉｒｕｓ,ＨＰＶ）的感染及其相关关系,我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对４８例患有性病、生殖道感染的妇女和３９例正常妇女进行了下生道ＨＳＶ２、ＨＰＶ的检测。ＨＳＶ２在实验组和对照组妇女中的感染率分别是７２９％和２５６％,两组有极显著性差异（Ｐ＜００１）;ＨＰＶ在实验组和对照组妇女中的感染率分别是５３３％和３３３％,两组无显著性差异（Ｐ＞００５）;两组中ＨＳＶ２、ＨＰＶ双阳性率分别是４５８％（２２／４８）和２３１％（９／３９）,有显著性差异（Ｐ＜００５）;在两组共８７份标本中,ＨＳＶ２和ＨＰＶ双阳性者占３１例,阳性率是３５６％。统计学分析表明：ＨＳＶ２和ＨＰＶ感染之间有极显著的相关性（Ｘ２＝２４０８,Ｐ＜００１）。研究表明：患有生殖系感染和性病妇女其ＨＳＶ２或ＨＰＶ和ＨＳＶ２混和感染的机率显著高于正常妇女,ＨＳＶ２和ＨＰＶ的感染具有协同作用。由于这两种病毒均与宫颈癌的发生有关,它们在生殖道中感染的相互作用机理有待于进一步研究。     

紫背天葵保健果冻加工工艺研究

以新鲜紫背天葵为主要原料研究紫背天葵保健果冻的生产工艺。对紫背天葵预处理、复合胶凝剂和果冻主要原辅料配比进行了重点研究,结果表明：适宜加工紫背天葵果冻的胶凝剂为卡拉胶、明胶、魔芋胶的复合胶凝剂;紫背天葵保健果冻的最佳配方为20%紫背天葵汁、1.0%复合胶（卡拉胶∶明胶∶魔芋胶/m∶m∶m=4∶3∶3）、20%白砂糖、0.15%柠檬酸。在此工艺条件下所得产品色泽紫红,具有紫背天葵特有清香气,酸甜可口,口感软滑。     

薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因的分离鉴定及表达分析

为研究水杨酸羧甲基转移酶基因在植物防御系统中的作用,采用RACE法从薇甘菊(Mikania micrantha)cDNA文库中克隆到薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因SAMT全长cDNA,并进行外源表达以及水杨酸诱导模式分析.结果表明,该基因cDNA全长1 299 bp,其中编码区长1 089 bp,编码362个氨基酸,Blast显示该基因编码的氨基酸序列与仙女扇(Clarkia breweri)的相似性为74%,证实其主要功能是将水杨酸(salicylic acid,SA)甲基化成水杨酸甲酯(methyl salicylate,MESA),由此将该基因命名为MmSAMT,GenBank登录号为FJ869889.将MmSAMT编码序列克隆至pET-32a(+)载体,转化Rosetta-gami(DE3)中表达,SDS-PAGE显示单体分子量在40 kD左右,与预测结果一致.Western bolt显示在20℃、0.05 mmol/LIPTG和180 r min-1下诱导6 h,可获得较多的可溶性蛋白质.对喷施100μmol/L SA薇甘菊叶片中MmSAMT的转录谱进行研究,该基因的诱导受到SA的激活,48 h的表达水平达最高,暗示MmSAMT可能通过催化合成MeSA引发系统获得性抗性,提高抗性防御的警戒等级. 89.将MmSAMT编码序列克隆至pET-32a(+)载体,转化Rosetta-gami(DE3)中表达,SDS-PAGE显示单体分子量在40 kD左右,与预测结果一致.Western bbt显示在20℃、0.05 mmol/LIPTG和180 r min-1下诱导6 h,可获得较多的可溶性蛋白质.对喷施100μmol/L SA薇甘菊叶片中MmSAMT的转录谱进行研究,该基因的诱导受到SA的激活,48 h的表达水 达最高,暗示MmSAMT可能通过催化合成MeSA引发系统获得性抗性,提高抗性防御的警戒等级. 89.将MmSAMT编码