活疫苗及其生产基质中Sendai病毒RT-PCR检测方法的研究

目的建立检测Sendai病毒的RT-PCR方法并应用于活疫苗及其生产基质中Sendai病毒的检测.方法将Sendai病毒E17株接种9日龄鸡胚尿囊腔,72h后收集尿囊液,用于提取病毒RNA,并逆转录成cDNA,用两对针对Sendai病毒NP基因设计的外引物和内引物分别进行扩增.扩增产物克隆于T-载体,并测序.尿囊液按10倍倍比稀释,进行敏感性实验.将该方法用于检测乙脑减毒活疫苗和用于生产疫苗用的普通级乳地鼠肾中的Sendai病毒.结果外引物和内引物的PCR分别扩增出684bp和248bp的片段,外引物PCR产物的测序结果与Genbank报告的序列完全一致.敏感性实验结果表明,第一次PCR可检测到10-4病毒滴度,巢式PCR可检测到10-7病毒滴度.乙脑减毒活疫苗和乳地鼠肾的检测结果为阴性.结论建立检测Sendai病毒的RT-PCR方法具有很高的特异性和敏感性.     

小鼠肝炎病毒抗体检测试剂盒的标准化研究

目的筛选适合制备检测试剂盒的抗原组合。方法用 ＥＬＩＳＡ方法,将５株小鼠肝炎病毒（ＭＨＶ）抗原分别组合作为包被抗原,研究ＭＨＶ抗原不同组合与标准毒株抗体的反应性,分析ＭＨＶ各毒株间的差别,进一步比较不同组台抗原的灵敏性、特异性。结果通过对１９９７～１９９９年送检２３８只普通级实验小鼠检测,结果表明,ＭＨＶ的感染率虽有下降趋势,但感染率仍然很高（５９％～８７％）。结论我国分离的ＭＨＶ－ＨＵ７９株,在本次研究中表明能够用于ＭＨＶ抗体检测试剂盒。     

小鼠腺病毒单克隆抗体的研制及初步应用

应用杂交瘤技术获得４株分泌抗小鼠腺病毒（ＭｕｒｉｎｅＡｄｅｎｏｖｉｒｕｓＭＡｄ）单克隆抗体细胞株,并对其特性进行分析。经鉴定,它们所分泌的抗体类型均为ＩｇＭ,腹水效价为１０－３～１０－６。相对亲和力分别为０．１μｇ／ｍｌ（Ａ９）、０．６５μｇ／ｍｌ（Ｂｌ）、１２．５μｇ／ｍｌ（Ｇ４）和２３μｇ／ｍｌ（Ｄ４）。与其他１０种鼠源性病毒均无交叉反应,表明ＭｃＡｂ具有良好的特异性。单抗标记ＦＩＴＣ后用于人用鼠源性单抗制品及各种传代细胞和原代细胞中ＭＡｄ检测,获得良好的实验结果。     

应用脾内直接免疫法制备鼠痘病毒单克隆抗体

采用脾内直接免疫法和杂交瘤技术获得５株杂交瘤细胞。杂交瘤细胞培养上清液和腹水中单克隆抗体效价分别为１∶８～６４和１０－３～１０－４（ＥＬＩＳＡ）。与其他１０种鼠源性病毒和ＢＨＫ２１细胞无非特异性反应。与传统免疫方法相比较,即节省了抗原、缩短了免疫时间,又可避免因免疫抗原致病性强而导致动物死亡的缺点,是一种具有实际应用的免疫方法。     

快速净化小鼠种群的新方法

本文报告不经剖腹产术,直接从大生产鼠群中挑选1—2日龄乳鼠,经0.4％新洁尔消毒处理后,引入清洁环境,用清洁级NIH小鼠作保姆,净化小鼠种群的简易快速新方法。     

中国分支杆菌类免疫调节剂的评述与展望

近年来,中国分支杆菌类制剂有多种,如治疗用卡介苗,卡介苗多糖核酸（已有三个品牌：卡提素、斯奇康和卡舒宁）,冻干卡介苗细胞壁,草分支杆菌注射液（高品名：乌体林斯注射液）及母牛分枝杆菌冻干制剂（即Vaccae苗）,这些制剂均有免疫调节功能,治疗用卡介苗及卡介菌细胞壁主要用于治疗浅表性膀胱癌;卡介苗多糖核酸制剂主要用于预防和治疗慢性气管炎,感冒和哮喘;单分枝杆菌及母牛分枝杆菌制剂以及卡介苗多糖核酸液主要用作结核病的辅助治疗,临床观察,均有明显疗效。