中药枳壳中环肽成分的研究

运用硅胶、凝胶和高效液相色谱进行分离纯化,根据理化常数和波谱数据鉴定化合物的结构。从中药枳壳中分离并鉴定了7个环肽成分:环-(亮氨酸1-异亮氨酸2-丙氨酸3-苏氨酸4-甘氨酸5-苏氨酸6-苯丙氨酸7)(1)、环-(甘氨酸1-亮氨酸2-缬氨酸3-亮氨酸4-脯氨酸5-丝氨酸6)(2)、环-(亮氨酸1-亮氨酸2-脯氨酸3-酪氨酸4-甘氨酸5-丝氨酸6-脯氨酸7)(3)、环-(甘氨酸1-甘氨酸2-亮氨酸3-亮氨酸4-亮氨酸5-脯氨酸6-脯氨酸7-苯丙氨酸8)(4)、环-(脯氨酸-丙氨酸)(5)、环-(丙氨酸-异亮氨酸)(6)、环-(丙氨酸-亮氨酸)(7)。除2和4外,其余环肽均为首次从中药枳壳中分离得到。     

三七环二肽成分

从三七(Panax notoginseng)的根中分离得到14个环二肽成分,通过波谱解析其结构分别鉴定为环-(亮氨酸-苏氨酸)(1)、环-(亮氨酸-异亮氨酸)(2)、环-(亮氨酸-缬氨酸)(3)、环-(异亮氨酸-缬氨酸)(4)、环-(亮氨酸-丝氨酸)(5)、环-(亮氨酸-酪氨酸)(6)、环-(缬氨酸-脯氨酸)(7)、环-(丙氨酸-脯氨酸)(8)、环-(苯丙氨酸-酪氨酸)(9)、环-(苯丙氨酸-丙氨酸)(10)、环-(苯丙氨酸-缬氨酸)(11)、环-(亮氨酸-丙氨酸)(12)、环-(异亮氨酸-丙氨酸)(13)、环-(缬氨酸-丙氨酸)(14)。其中化合物1为新化合物,化合物4～10为新天然化合物,化合物2～3、11～14为已知化合物;化合物2和11、3和4、12和13分别为一对混合物,比例分别为2：1、1：1和2：1。     

南海深海细菌Bacillus amyloliquefaciens GAS 00152抗菌代谢产物研究

采用多种色谱分离技术,从南海深海细菌Bacillus amyloliquefaciens GAS 00152发酵液中分离得到12个化合物,经波谱数据分析分别鉴定为4-苯基-3-丁烯酰胺(1)、苯乙酰胺(2)、苯乙酸-2-(4-羟苯基)乙酯(3)、对羟基苯乙醇(4)、环(甘氨酸-2-氨基丁酸)(5)、环(甘氨酸-亮氨酸)(6)、环(甘氨酸-L-脯氨酸)(7)、环(D-脯氨酸-L-缬氨酸)(8)、环(4-羟基脯氨酸-亮氨酸)(9)、环(N-甲基甘氨酸-苯丙氨酸)(10)、环(L-2-羟基脯氨酸-苯丙氨酸)(11)、环(2-哌啶酸-苯丙氨酸)(12)。其中,化合物1为新天然产物。测试化合物1~12对番木瓜炭疽菌和香蕉黑星菌的抑制活性,发现化合物9对两种热带水果致病菌显示出中等抗菌活性。     

海洋细菌Pseudomonas sp．抗菌代谢产物的研究

从海洋细菌Pseudomonas sp.发酵液中分离鉴定9个环二肽和2个苯环类化合物,经波谱鉴定为环(酪氨酸-脯氨酸)(1),环(酪氨酸-异亮氨酸)(2),环(苯丙氨酸-脯氨酸)(3),环(缬氨酸-脯氨酸)(4),环(异亮氨酸-脯氨酸)(5),环(亮氨酸-脯氨酸)(6),环(丙氨酸-脯氨酸)(7),环(缬氨酸-丙氨酸)(8),环(丙氨酸-亮氨酸)(9),对羟基苯甲醛(10),二-(2-乙基己基)邻苯二甲酸酯(11).其中化合物1～4对多种海洋细菌显示一定的抗菌活性.     

铁皮石斛内生真菌次生代谢产物研究

为了解铁皮石斛(Dendrobium officinale)内生真菌Phyllosticta aristolochiicola的次生代谢产物,从该真菌中分离得到15个化合物,经波谱分析分别鉴定为N-methyl-2-pyrolidinone (1)、环-(甘氨酸-L-脯氨酸)(2)、环-(D-丙氨酸-L-脯氨酸)(3)、环-(L-缬氨酸-L-脯氨酸)(4)、环-(L-亮氨酸-L-脯氨酸)(5)、cyclo-(L-Leu-D-4-hydroxyprolinyl)(6)、环-(L-苯丙氨酸-L-脯氨酸)(7)、环-(L-苯丙氨酸-L-4-羟基脯氨酸)(8)、环-(L-酪氨酸-L-脯氨酸)(9)、环-(L-苯丙氨酸-L-亮氨酸)(10)、啤酒甾醇(11)、对羟基苯乙醇(12)、对羟基苯乙酸(13)、(2S,3R)-1-(4-羟基苯基)丁烷-2,3-二醇(14)和(2R,3S)-1-苯基丁烷-2,3-二醇(15)。采用MTS法检测抗肿瘤活性表明,化合物2、10和14对HL-60、A-549、SMMC-7721、MCF-7和SW-480细胞株具有一定的抑制活性。     

虫药美洲大蠊水溶性成分及其促血管生成活性

采用色谱手段从美洲大蠊中分离得到22个化合物,利用波谱解析鉴定了它们的结构,分别命名为甘油(1)、邻羟基苯甲酸(2)、苯丙氨酸(3)、色氨酸(4)、尿嘧啶(5)、腺嘌呤(6)、环(脯氨酸-苏氨酸)(7)、环(脯氨酸-丙氨酸)(8)、环(丙氨酸-缬氨酸)(9)、环(甘氨酸-异亮氨酸)(10)、环(甘氨酸-亮氨酸)(11)、腺嘌呤核苷(12)、次黄嘌呤核苷(13)、环(亮氨酸-丝氨酸)(14)、环(丝氨酸-苯丙氨酸)(15)、环(天冬酰胺-苯丙氨酸)(16)、环(酪氨酸-甘氨酸)(17)、环(酪氨酸-丙氨酸)(18)、环(酪氨酸-丝氨酸)(19)、环(酪氨酸-苏氨酸)(20)、环(酪氨酸-天冬氨酸)(21)和Cordyrrole A(22)。其中,化合物7~11、14~22为首次从美洲大蠊中分离得到,而化合物20和21为新的天然产物。此外,对化合物抗一氧化氮生成作用和促血管生成活性进行了测试。     

污损生物膜细菌Pseudoalteromonas issachenkonii YT1305-1的鉴定及其代谢物化学成分分析

【目的】对污损生物膜细菌YT1305-1进行菌种鉴定;研究其作为污损生物膜优势菌之一的代谢产物。【方法】通过16S rRNA基因序列分析,结合系统进化树和细菌生理生化实验对菌种进行鉴定,通过硅胶柱层析分离方法和核磁共振检测技术分析其代谢物的化学成分。【结果】发现生物膜中存在明显的优势菌株,假交替单胞菌属为优势菌属之一。16S rRNA序列比对分析表明Pseudoalteromonas issachenkonii为优势菌种之一,将目标菌种命名为Pseudoalteromonas issachenkonii YT1305-1,对其代谢物化学成分进行分析,共得到10个化合物,其中包括5个二酮哌嗪(DKPs)类信号分子,环(甘氨酸-丙氨酸)(1)、环(脯氨酸-甘氨酸)(2)、环(脯氨酸-酪氨酸)(3)、环(4-羟基-脯氨酸-亮氨酸)(4)和环(4-羟基-脯氨酸-丙氨酸)(5),以及尿嘧啶(6)、胸腺嘧啶(7)、胸腺嘧啶脱氧核苷(8)、己二酸二(2-乙基己)酯(9)和邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(10)。【结论】污损生物膜中存在明显的优势菌,其中之一为P.issachenkonii YT1305-1,在其代谢产物中发现了疑似信号分子的物质DKPs,有研究表明该物质能调控生物膜的形成,进而影响生物污损的形成,为探究生物污损现象奠定了物质基础。     

南海半红树植物黄槿内源真菌GT20036029代谢产物研究

应用多种色谱技术从半红树药用植物黄槿内生真菌GT20036029中分离得到9个化合物,通过波谱学方法并与已知化合物数据作比较,鉴定它们分别为N-(2-羟基苯乙基)乙酰胺(1)、环(L-脯氨酸-D-异亮氨酸)(2)、环(L-亮氨酸-L-脯氨酸)(3)、环(D-亮氨酸-L-脯氨酸)(4)、环(亮氨酸-酪氨酸)(5)、环(苯丙氨酸-丝氨酸)(6)、脑苷脂B(7)、(25S)-纽替皂苷元-3-O-α-L-鼠李糖-(1→2)-β-D-葡萄糖苷(8)和(25S)-异纽替皂苷元-3-O-α-L-鼠李糖-(1→2)-β-D-葡萄糖苷(9)。化合物1为首次从海洋真菌代谢产物中分离得到。化合物8显示了较好的肿瘤细胞生长抑制活性。     

紫苏内生真菌Aspergillus sp.12Y03化学成分研究

采用硅胶柱层析和Sephadex LH-20凝胶柱层析等分离方法,从紫苏内生真菌Aspergillus sp.12Y03发酵产物中分离鉴定了10个化合物,经现代光谱学技术鉴定为:环-(脯氨酸-甘氨酸)(1)、环-(脯氨酸-丝氨酸)(2)、环-(丝氨酸-4-OH-脯氨酸)(3)、环-(丙氨酸-4-OH-脯氨酸)(4)、环-(苯丙氨酸-甘氨酸)(5)、环-(丙氨酸-甘氨酸)(6)、亚油酸(7)、α-亚麻酸(8)、cerevisterol(9)和22E,24R-5α,6α-环氧麦角甾-8(14),22-二烯-3β,7α-二醇(10),均为首次从该菌种中分离得到,化合物3和4具有中等强度的海虾致死活性。     

丰肉结海绵相关放线菌LS-298活性产物

对分离自南海丰肉结海绵的相关链霉菌LS-298菌株的活性代谢产物进行研究,以抗菌活性和化学筛选相结合为指导,采用硅胶柱、凝胶柱以及制备HPLC等色谱方法对LS-298发酵产物进行分离纯化,通过核磁共振、质谱等波谱分析手段对分离得到的化合物进行结构鉴定,以滤纸片扩散法及MTT法分别检测其抗菌和抗肿瘤活性。共分离鉴定了17个化合物,其中1个新化合物,环(脯氨酸-4-羟基-缬氨酸)(1),16个已知化合物分别为尿嘧啶核苷(2),2′-脱氧尿嘧啶核苷(3),邻苯二甲酸正丁二酯(4),邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(5),3-甲酰胺-吲哚(6),环(脯氨酸-赖氨酸)(7),环(脯氨酸-苯丙氨酸)(8),环(脯氨酸-酪氨酸)(9),环(脯氨酸-亮氨酸)(10),meleagrin(11),5-hydroxyectione(12),棘霉素(echinomycin)(13),光黄素(14),N-[2-(1H-indo-l 3-yl)-2-oxo-ethyl]-acetamide(15),3-甲酰胺吡啶(16),替达霉素B(tirandamycin B)(17)。其中,棘霉素和替达霉素B为首次从同一株放线菌中分离得到,且后者目前仅在海洋放线菌中被发现,两者不仅具有较强的抗菌活性,亦具有很强的体外抗肿瘤活性。     

宁前胡内生真菌Fusarium tricinctum次生代谢产物研究

为研究宁前胡内生真菌Fusariumtricinctum次生代谢产物,采用液体发酵法发酵内生真菌,利用硅胶、凝胶、MPLC、制备液相等多种方法分离获得13个单体化合物。利用波谱方法分别鉴定为cyclo-(L-pro-L-pro)(1)、cyclo-(S-pro-S-leu)(2)、cyclo-(L-phe-L-phe)(3)、cyclo-(D-pro-L-phe)(4)、cyclo-(L-pro-L-phe)(5)、cyclo-(D-pro-L-leu)(6)、cyclo-(S-pro-S-leu)(7)、cyclo-[D-(4-hydroxyprolinyl)]-(L)-leucine(8)、cyclo-[L-(4-hydroxyprolinyl)]-(L)-leucine(9)、cyclo-(trans-4-hydroxy-L-prolyl-L-phenylalanine)(10)、cyclo-(D-cis-hyp-L-phe)(11)、苯甲酸苄酯(12)和苯乙酸(13),所有化合物均首次从内生真菌F.tricinctum中分离得到。体外抗肿瘤活性显示,化合物4、6、7对CAR、CAL27、SCC-4、SCC-9、HSC-3五种口腔癌肿瘤细胞有一定的细胞毒活性。     

极地真菌Geomyces pannorum SA3-2-YM次级代谢产物的研究

采用聚酰胺柱层析、硅胶柱层析、反相硅胶柱层析、凝胶柱层析和高效液相HPLC等色谱技术,对极地真菌Geomyces pannorum SA3-2-YM的发酵液提取物进行分离纯化,共得到13个化合物,通过NMR和MS等波谱数据确定结构为:cyclo-(L-Trp-L-Pro)(1)、cyclo-(L-Trp-L-Tyr)(2)、cyclo-(Gly-L-Trp)(3)、cyclo-(L-Trp-L-Phe)(4)、cyclo-(L-Trp-L-Ser)(5)、cyclo-(L-Tyr-L-Pro)(6)、cyclo-(L-Trp-L-Ile)(7)、cyclo-(D-Ala-D-Trp)(8)、ergosterol(9)、(22E)-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol(10)、anicequol(11)、indazole(12)、p-hydroxybenzaldehyde(13)。其中,化合物1~9、11~13均为首次从地丝霉属的真菌中分离得到。抑菌试验表明化合物9对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌具有一定的抑制活性,其最小抑制浓度(MIC)均为90μg/mL。采用CCK-8法测试了13个化合物对四种肿瘤细胞株的体外细胞毒活性,化合物1~13对四株实验肿瘤细胞株表现出不同程度的抑制活性,其中环二肽化合物8对HeLa肿瘤细胞的抑制率可达62.28%,含有过氧基团的化合物10对SMMC-7721细胞的抑制率达到了68.13%。     

南海软海绵Halichondria sp.化学成分研究

为了寻找有生物活性的次生代谢产物,对从采集自中国南海的软海绵(Halichondria sp.)进行了化学成分研究,从中共分离得到了9个化合物,并对部分化合物进行了抗菌活性测试。根据现代波谱技术并结合文献数据,鉴定化合物的结构为:1,2,3,4-四氢-3-羧基-2-卡波林(1),色氨酸(2),环(异亮氨酸-脯氨酸)(3),开环(脯氨酸-缬氨酸)(4),环(丙氨酸-脯氨酸)(5),胆甾醇(6),二-(2-乙基己基)邻苯二甲酸酯(7),邻苯二甲酸正丁异丁酯(8)和邻苯二甲酸二异丁酯(9)。     

Design of novel bicyclic analogues derived from a potent oxytocin antagonist.

Eleven new analogues were synthesized by modification of the potent oxytocin antagonist (OTA) [(S)Pmp(1), D-Trp(2), Pen(6), Arg(8)]-Oxytocin, or PA (parent antagonist), in which (S)Pmp = beta,beta-(3-thiapentamethylene)-beta-mercapto-propionic acid. By internal acylation of Lys, Orn, L-1,4-diaminobutyric acid (Dab), L-1,3-diaminopropionic acid (Dap) at position 4 with the C-terminal Gly of the peptide tail, we prepared cyclo-(4-9)-[Lys(4), Gly(9)]-PA (pA(2) = 8.77 +/- 0.27), 1, and cyclo-(4-9)-[Orn(4), Gly(9)]-PA (pA(2) = 8.81 +/- 0.25), 3, which are equipotent with PA (pA(2) = 8.68 +/- 0.18) in the rat uterotonic assay and cyclo-(4-9)-[Dab(4), Gly(9)]-PA, 4, cyclo-(4-9)-[Dap(4), Gly(9)]-PA, 5, and cyclo-(4-9)-[Pmp(1), Lys(4), Gly(9)]-PA, 2, which were weaker OTAs. Neither 1 nor 3 had activity as agonists or antagonists in the antidiuretic assay. In the pressor assay, both analogues 1 and 3, with pA(2) = 7.05 +/- 0.10 and pA(2) = 6.77 +/- 0.12, respectively, are somewhat weaker antagonists than PA (pA(2) = 7.47 +/- 0.35) showing significant gain in specificity. The [desamido(9)] PA-ethylenediamine monoamide, 6, and the dimer ([desamido(9)]-PA)(2) ethylenediamine diamide, 7, had lower potency in the uterotonic assay than PA. Additionally, we synthesized cyclo-(1-5)-[(HN)Pmp(1), Asp(5)]-PA, 8, inactive in all tests, which suggests that the intact Asn(5) side chain may be critical in the interaction of the OTAs with the oxytocin (OT) receptor. Similarly, cyclo-(5-9)-[Dap(5), Gly(9)]-PA, 9, had very low uterotonic potency. Two derivatives of PA truncated from the C-terminus were internally cyclized to Lys(4), giving rise to cyclo-(4-8)-desGly-NH(2)(9)[Lys(4), Arg(8)]-PA, 10 (pA(2) = 8.35 +/- 0.20), which maintains the high potency of PA and has no activity in the rat antidiuretic assay, and in the rat pressor assay it is about ten times weaker (pA2 = 6.41 +/- 0.15) than PA (pA2 = 7.47 +/- 0.35), thus showing gains in specificity, and to cyclo-(4-7)-desArg-Gly-(NH)(2)(8-9)[Lys(4), Pro(7))-PA, 11, which has much weaker potency than PA. Synthesis of cyclo-(4-6)-desPro-Arg-Gly-(NH)(2)(7-9)[Lys(4)]-PA failed.     

麦冬块根化学成分的研究

从麦冬(Ophiopogon japornicus)块根中分得两个环二肽类化合物,一个酰胺类化合物和一个多羟基脂肪酸类化合物。通过光谱数据分析,分别鉴定为eyclo-(Phe-Tyr)(1),cyclo-(Leu-ILe)(2),N-(2．(4-hydroxyphenyl)ethyl)-4-hydroxycinnamide(3)和天师酸(4)。这四个化合物均为首次从沿阶草属植物分得。环二肽类化合物为首次从沿阶草属植物中分得的化合物类型。     

Studies on cyclic peptides. III. The specific interaction of cyclic peptides with benzene and an application of the solvent-induced Nmr shift to the conformational analysis of cyclo-(Pro-Sar-Gly).

The interaction between cyclic peptides [cyclo-(Sar₄), cyclo-(Pro-Sar-Gly)₂, cyclo-(Sar-Sar), and cyclo-(Sar-Gly)] with benzene has been investigated by nmr spectroscopy. The experiment with cyclo-(Sar₄) showed that benzene interacted preferentially with the trans peptide bond in a similar manner to the dimethylformamide–benzene interaction. The solvent-induced nmr shift was then applied to the conformational analysis of cyclo-(Pro-Sar-Gly)₂ with the aid of the molecular model. The major conformation was proved to possess the C₂ symmetry with internally hydrogen-bonded glycine residues, in which all peptide bonds were trans. The interaction of cyclo-(Sar-Sar) and cyclo-(Sar-Gly) with benzene was also studied. The association constant was 0.115-kg solution per mole of cyclo-(Sar-Sar) and 0.089-kg solution per mole of cyclo-(Sar-Gly) in chloroform.     

大黄鱼共生菌Bacillus coagulans LL1103的代谢产物研究

[目的]研究大黄鱼共生菌Bacillus coagulans LL1103的次生代谢产物及其抑菌活性。[方法]利用色谱层析技术对B.coagulans LL1103发酵液乙酸乙酯和正丁醇提取物进行分离纯化;运用波谱技术鉴定化合物的结构;采用微量肉汤稀释法对化合物进行抗菌活性测定。[结果]从大黄鱼内生菌B.coagulans LL1103发酵液中分离并鉴定9个环二肽类化合物,分别为:(1)环(4-羟基-脯氨酸-亮氨酸)、(2)环(异亮氨酸-丙氨酸)、(3)环(脯氨酸-缬氨酸)、(4)环(脯氨酸-苯丙氨酸)、(5)环(脯氨酸-亮氨酸)、(6)环(甘氨酸-丙氨酸)、(7)环(脯氨酸-甘氨酸)、(8)环(脯氨酸-丙氨酸)和(9)环(络氨酸-甘氨酸)。活性评价显示化合物3、7和9对大肠埃希菌(Escherichia coli)具有较强抑制作用,最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)分别为8.0、4.0和16.0μg/mL。[结论]从大黄鱼共生菌B.coagulans LL1103的发酵液中分离得到3个对大肠埃希菌(E.coli)具有较好抑制活性的化合物。     

Transfer of chirality by dithiophosphate ligands and chiral discrimination in the stereoselective formation of square-planar Ni(II) complexes

In the formation reaction of Ni(2+) with the chiral racemic ligand, (R)(R)bdtp(-)/(S)(S)bdtp(-), bdtp(-) = [SSPOCH)CH(3))CH(CH(3))O](-), cyclo- O,O'-[1,2-dimethylethylene] dithiophosphato ion, the meso-complex Ni[(R)(R)(lambda)bdtp][(S)(S)(delta)-bdtp] is stereoselectively produced. The meso-complex was compared with the enantiopure crystals of (+)(589)Ni[(R)(R)(lambda)bdtp](2) or (-)(589)Ni[(S)(S)(delta)bdtp](2), as well as racemic crystals, rac-(+/-)Ni[bdtp](2), which were prepared from the solution containing the two enantiomers in a 1:1 ratio. Dissociation constants in solutions indicate different stability of the meso and enantiopure complexes depending on the solvent, whereas a more efficient crystal packing, weak H-bonding, and nonbonding interactions contribute to stabilization of the meso-species over the racemic one. Molecular structures show that the outer five-membered ligand ring adopts the half-chair conformation C(2) with either the lambda or the delta chirality and the methyl groups are in equatorial (e) positions. Enantiopure ligands of (+)(589)Ni[(R)(R)(lambda)bdtp](2) and (-)(589)Ni[(S)(S)(delta)bdtp](2) induce chirality into the symmetric SSNiSS chromophore with slightly helical distortion. Thus, their CD spectra exhibit weak negative or positive Cotton effects at 662 nm. CD spectra in L(+)- and D(-)diethyltartrate of the meso-complex and racemic crystal, rac-(+/-)Ni[bdtp](2), exhibit different weak Cotton effects of opposite sign. Complexes dissociate in methanol; rac-(+/-)Ni[bdtp](2) in methanol undergoes a crystallization-induced second-order asymmetric transformation which finally yields crystals of the meso-Ni[(R)(R)(lambda)bdtp][(S)(S)(delta)bdtp] complex.