CRISPR/Cas基因编辑系统中gRNA表达策略

近日,宾夕法尼亚州立大学杨亦农(Yinong Yang)教授团队在a BIOTECH期刊在线发表题为"Efficient expression of multiple guide RNAs for CRISPR/Cas genome editing"的综述。总结了CRISPR/Cas基因编辑技术中引导RNA (gRNA)的表达策略,介绍了多重基因编辑中同时表达多个引导RNA的方法和技巧,为CRISPR/Cas技术的开发和应用提供了参考。     

不同棉蚜种群对棉花和黄瓜的适合度分化

通过室内转接试验,研究来源于越冬寄主花椒、木槿、石榴和夏寄主棉花、黄瓜共5个棉蚜Aphids gossypii Glover种群对棉花和黄瓜的适合度。结果表明:花椒棉蚜、木槿棉蚜、棉花棉蚜转接到棉花上的成虫留居率和种群繁殖率均明显地高于黄瓜;黄瓜棉蚜转接到棉花上的成虫留居率和种群繁殖率均显著地低于黄瓜;石榴棉蚜转接到棉花上的种群繁殖率显著低于黄瓜,但成虫留居率在2种寄主之间没有明显差异。     

欢迎订阅《英语科技论文撰写与投稿(第二版)》

<正>本书是科技论文写作与投稿的指南读物,书中全方位地分析和展示了科技论文写作的技巧与诀窍。从论文选题、科技写作的道德规范、拟投稿期刊的选择等方面阐述了科技论文写作前的准备工作,通过大量的实例分析阐述了论文题名和摘要撰写中应遵循的基本原则,分别从写作技巧、时态和语态的使用等角度介绍了科技论文正文的撰写,举例说明了致谢及图表制作的注意事项,总结了各主要参考文献体例的特点、格式及相关著录规范。     

书刊评介

1981年10月4日在美国冷泉港实验室Banbury中心举行了以“基因扩增”为主题的专门讨论会,在此会议的基础上编辑了本书。书前页是会议参加者名单。正文部分有序论:关于基因重复和扩增研究的前景。论文有     

影响葡萄组织培养中红叶现象发生的因素

在我们过去对葡萄(Vitis vinifera L.)无核品种"新葡4号"继代繁殖过程中产生红叶现象的基础上,设置转接后摆放在不同温度和光强下,初代培养和继代培养、壮苗和弱苗分开摆放,继续就产生红叶现象的因素作了探讨.得到如下结果:     

矮丛蓝莓叶片的愈伤组织诱导及植株再生

以矮丛蓝莓'Blomidon'品种的试管苗叶片为外植体,研究不同培养基、激素、转接时间以及转接方式对愈伤组织诱导及植株再生的影响.结果表明:WPM1/2为适宜的培养基;添加0.5 mg·L~(-1) CPPU+1.0 mg·L~(-1) ZT+0.5 mg·L~(-1) TDZ和0.5 mg·L~(-1) CPPU+0.5 mg·L~(-1) ZT+1.0 mg·L~(-1) TDZ诱导愈伤率较高达100%;ZT、CPPU与生长素IAA、IBA的配比诱导愈伤率效果不佳;添加ZT诱导的愈伤组织适合20 d后转接,CPPU诱导的愈伤组织适合50 d后转接;转接方式均以固体培养为宜.矮丛蓝莓'Blomidon'最适宜培养基为WPM1/2+0.5 mg·L~(-1) CPPU+1.0 mg·L~(-1) ZT+0.5 mg·L~(-1) TDZ,其诱导愈伤组织50 d后转接平均分化芽数最多达10.26个.     

书讯

欢迎订阅《英语科技论文撰写与投稿(第二版)》撰写中应遵循的基本原则,分别从写作技巧、时态和语态的使用等角度介绍了科技论文正文的撰写,举例说明了致谢及图表制作的注意事项,总结了各主要参考文献体例的特点、格式及相关著录规范。     

更正

正1)本刊2015年第11期《雌激素及其受体与肺癌的研究进展》一文中,第1页正文左栏第1段第5行中"1892年"更正为"1982年";2)本刊2015年第11期《疟疾、丝虫病与河盲症及药物治疗——兼谈2015年诺贝尔生理学或医学奖》一文中,第56页正文左栏第2段第15行"1987年"更正为"1887年"。3)本刊2015年第6期《水杉组织培养过程中     

鸽子慢性电刺激用电极转接装置及其固定方法

慢性电极植入以及无线刺激技术被广泛应用于动物自由活动状态下的脑区功能研究。实现刺激器与脑内植入电极过渡连接的转接装置需固定在颅骨之上。鸟类特殊的骨质构造不利于转接装置的长期固定。以鸽子(Columba livia)为例设计制作了一种用于慢性运动诱导实验的9通道电极转接装置,长12.8 mm、宽9.5 mm、高5.5 mm,重0.42 g;根据鸽子颅骨特点在固定过程中对颅骨表面进行粗糙化处理增加固定时与牙科水泥的接触面积,并选取特定位点拧入螺钉进行固定,有效延长了转接装置的固定时间。经实验验证能够在鸽子头部稳定固定6个月以上,满足鸽子长期运动诱导研究的需求,未对动物正常活动产生影响。该装置及其固定方法亦可为其他小型动物的脑区功能研究提供借鉴。     

基因组编辑产品的安全管理

基因组编辑技术是指利用特异性核酸酶的定点剪切活性与细胞内源DNA损伤修复活性,在基因组水平上对目的核酸序列或单个核苷酸进行定点修饰的基因工程技术,该技术可以对生物体基因组进行精确敲除、插入、单碱基突变或置换等编辑。目前,基因组编辑技术具有精确性、高效性及易操作性,应用范围日益扩大。文中简要概述了3种主要的基因组编辑技术工具及基因组编辑类型,介绍了美国、欧盟等国家和地区对基因组编辑产品的监管体制。同时,基于我国对转基因产品的安全管理原则与体系,初步提出了基因组编辑产品的安全管理思路。根据中间材料或产品中是否含有外源编辑酶蛋白基因成分对基因组编辑产品进行分类管理,含有外源编辑酶的材料应按现有转基因安全管理办法进行管理;中间材料或产品中不含有Cas9等编辑酶的材料应根据被编辑位点的特征进行具体分类管理。     

Biological and Health Science courses in New Zealand technical institutes

Argumentation in science is the process of coordinating theory and evidence to justify conclusions. This practice is at the heart of scientific journal writing and communication, but little is known regarding the argument quality of college science majors, the future scientists. Studies on written arguments at the college level have focused primarily on non-majors and upper-level students. To investigate and describe these skills throughout the biology curriculum, majors (n = 243) in four levels of undergraduate biology courses at a public university were assessed using a short, written argument instrument based on a hypothetical data set and scenario. Using Toulmin’s argumentation pattern to assess the instruments for argument aspects and quality, very few differences were found in the scores across course levels. Students were able to generate simple arguments consisting of claim, evidence and reasoning. The ability to provide scientific principles as reasoning to connect evidence and claims was positively correlated with course level. However, advanced argumentation skills, such as creating alternative explanations and rebuttals, were lacking across all course levels. These findings imply the need for explicit attention to argument construction throughout the undergraduate biology curriculum.     

科技学术期刊国际化发展的思考与初探

结合办刊实践,提出了如下措施和建议:(1)明确读者定位,开拓优质稿源新渠道。(2)通过策划选题,充分体现知识的创新性;设置特色栏目,栏目内容具有科学性和实用性;增加载文的信息量,提高信息密度等途径优化期刊内容,努力创办特色期刊。(3)通过强化政策导向,建立合理机制吸引优秀稿件;跟踪国际科技前沿课题,掌握学术团队的发展动态;重视学术会议组稿,加强引进和派出访问学者的联系等措施提高稿件学术质量,增强刊物核心竞争力。(4)建立国际交换关系,提升刊物自身价值。(5)加强与国际重要检索系统的联系,重视进入专业数据库。(6)加快信息化建设,加大期刊的对外宣传。以此提升期刊的国际影响力,促进期刊的国际化发展。     

植物学类科技期刊插图的优化与规范化编排

作者结合自己的实践,详细叙述了科技期刊插图的分类与规范化要求,就如何优化插图、确保质量提出了精选插图、认真审读图稿的全部内容、精心标注的方法,并阐述了插图的编辑加工和技术处理,探讨了统一格式、规范化编排插图的具体做法:即合成、压缩或删除、分解、缩放、调整、重新设计等手段,以及精心描绘和认真校对。     

技能大赛背景下高职生物制药技术综合实训课程教学改革

综合实训是高职学生将理论知识与生产实践有机融合的重要教学环节。本文介绍了技能大赛背景下,学院生物制药技术专业立足“以赛促教、以赛促建、以赛促学、育训结合”特色,以青霉素发酵工艺实验为例,从教学目标、教学内容、教学方法、考核等内容进行的改革与实践,将发酵设备的实践操作与虚拟仿真软件相融合,双向交互式开展课程。突破发酵过程控制的主观依赖性,建立发酵过程参数控制的量化管理和评价,更有利于实现技能大赛与实践教学的高效融合。通过近几年的改革与实践,取得良好的教学效果,为同类课程基于技能大赛的教学实践改革提供了新的思路和借鉴。     

Interlinking journal and wiki publications through joint citation: Working examples from ZooKeys and Plazi on Species-ID

Scholarly publishing and citation practices have developed largely in the absence of versioned documents. The digital age requires new practices to combine the old and the new. We describe how the original published source and a versioned wiki page based on it can be reconciled and combined into a single citation reference. We illustrate the citation mechanism by way of practical examples focusing on journal and wiki publishing of taxon treatments. Specifically, we discuss mechanisms for permanent cross-linking between the static original publication and the dynamic, versioned wiki, as well as for automated export of journal content to the wiki, to reduce the workload on authors, for combining the journal and the wiki citation and for integrating it with the attribution of wiki contributors.     

基因编辑之“新宠”—单碱基基因组编辑系统

近年发展起来的人工核酸酶可通过引起特定位点的DNA双链断裂实现对目的片段的有效编辑。为进一步提高碱基修改的效率和精确度,2016年研究者们利用CRISPR/Cas9识别特定DNA序列的功能,结合胞嘧啶脱氨酶的生化活性发明了将胞嘧啶高效转换为胸腺嘧啶(C>T)的嘧啶单碱基编辑系统(base editor)。这一系统虽然能精准实现嘧啶直接转换,大大提高精确基因编辑效率,但美中不足的是无法对嘌呤进行修改。近期,Nature报道了将细菌中的tRNA腺嘌呤脱氨酶定向进化形成具有催化DNA腺嘌呤底物的脱氨酶,将其与Cas9系统融合发明了具有高效催化腺嘌呤转换为鸟嘌呤的新工具—腺嘌呤单碱基编辑系统(ABEs, adenine base editors)。本文总结了单碱基编辑工具的发展历程和最新研究进展,着重介绍ABEs的研发过程,并对单碱基编辑工具今后的应用方向和研发方向进行展望。     

On-the-Job Evidence-Based Medicine Training for Clinician-Scientists of the Next Generation

Clinical scientists are at the unique interface between laboratory science and frontline clinical practice for supporting clinical partnerships for evidence-based practice. In an era of molecular diagnostics and personalised medicine, evidence-based laboratory practice (EBLP) is also crucial in aiding clinical scientists to keep up-to-date with this expanding knowledge base. However, there are recognised barriers to the implementation of EBLP and its training. The aim of this review is to provide a practical summary of potential strategies for training clinician-scientists of the next generation.Current evidence suggests that clinically integrated evidence-based medicine (EBM) training is effective. Tailored e-learning EBM packages and evidence-based journal clubs have been shown to improve knowledge and skills of EBM. Moreover, e-learning is no longer restricted to computer-assisted learning packages. For example, social media platforms such as Twitter have been used to complement existing journal clubs and provide additional post-publication appraisal information for journals.In addition, the delivery of an EBLP curriculum has influence on its success. Although e-learning of EBM skills is effective, having EBM trained teachers available locally promotes the implementation of EBM training. Training courses, such as Training the Trainers, are now available to help trainers identify and make use of EBM training opportunities in clinical practice. On the other hand, peer-assisted learning and trainee-led support networks can strengthen self-directed learning of EBM and research participation among clinical scientists in training. Finally, we emphasise the need to evaluate any EBLP training programme using validated assessment tools to help identify the most crucial ingredients of effective EBLP training.In summary, we recommend on-the-job training of EBM with additional focus on overcoming barriers to its implementation. In addition, future studies evaluating the effectiveness of EBM training should use validated outcome tools, endeavour to achieve adequate power and consider the effects of EBM training on learning environment and patient outcomes.     

小鼠及猕猴胚胎MECP2基因T158M单碱基突变体系的建立

目的:利用单碱基编辑技术定点修饰MECP2基因T158M位点,获得单一定点突变类型的啮齿类及非人灵长类胚胎,为建立模拟临床上Rett综合征的疾病动物模型奠定基础。方法:利用单碱基编辑技术构建3对T158M-sgRNA质粒,并分别与BE系统(BE3或BE4max)质粒共转染293T细胞筛选高效的sgRNA,通过显微注射将体外转录的mRNA以不同的浓度组合注射到ICR小鼠和猕猴受精卵中,检测小鼠和猕猴胚胎发育率和编辑效率,评估BE3和BE4max的工作效率及最优浓度组合。结果:小鼠胚胎上BE4max(ng/μl)∶sgRNA(ng/μl)=100∶50浓度组合时,小鼠胚胎发育率和编辑效率最佳,同时该浓度组合在猕猴胚胎上也获得了有效编辑效率。结论:成功在小鼠及猕猴胚胎上实现了MECP2基因T158M位点上C→T的转变,为后期建立T158M突变的RTT动物模型建立了稳定的胚胎编辑体系。