花楸体细胞胚发生过程中抗氧化酶活性的变化

花楸体细胞胚发生过程中,胚性愈伤组织可溶性蛋白含量高于其他类型的愈伤组织,非胚性愈伤组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性均高于其他类型的愈伤组织;SOD、POD活性均在胚性细胞向球形胚转化时下降,球形胚向心形胚发育时下降,心形胚向鱼雷形胚和鱼雷形胚向子叶形胚发育时再升高;CAT活性变化规律与SOD和POD活性变化不同,从胚性细胞到鱼雷形胚的3个发育时间内表现为下降-升高-下降的趋势,鱼雷形胚向子叶胚发育时略有回升。据此认为,SOD酶活性降低似可作为花楸胚性细胞分化以及胚胎早期发育的一个判断指标。     

花楸合子胚诱导体细胞胚胎发生研究

分别以完整成熟胚、切去一个子叶的成熟胚和切下的子叶为外植体,以MS为基本诱导培养基、1/2MS为基本分化培养基,进行了花楸体细胞胚胎发生研究。结果表明:以完整合子胚作为外植体的体胚诱导率最高,为100%,最佳植物生长调节剂组合为5 mg.L-1NAA+2 mg.L-16-BA;NAA和6-BA浓度及二者的交互作用对愈伤组织和体胚诱导率的影响极显著;光照配合延长继代间隔时间有利于体胚发生。实体观察结果表明,花楸体胚发生方式有直接发生和间接发生两种;体胚发育经历了球形期、心形期、鱼雷形期和子叶期。组织学观察结果表明,体胚具有两极性,子叶期体胚结构完整。     

黄山栾树体细胞胚的发生和组织学观察

黄山栾树无菌苗的节间和叶柄离体培养后,其体细胞胚发生的结果表明：节间愈伤组织可诱导产生体细胞胚,而叶柄愈伤组织则生根：节间愈伤组织诱导培养基为MS＋3．0mg．L～2,4．D＋0．5～3．0mg．L-1NAA;节间胚性愈伤组织诱导培养基为MS＋2．0nag．L-2,4-D;胚性愈伤组织转移到无植物生长调节剂的MS培养基上可发育成正常植株。组织学观察表明,体细胞胚在胚性愈伤组织中有的发生于愈伤组织表层细胞,有的发生在愈伤组织内部。黄山栾树体细胞胚的形成经历球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚几个阶段,这与合子胚的发育途径相似。     

栓皮栎体细胞胚胎发生的细胞组织学观察

以栓皮栎未成熟合子胚为外植体,在添加0.25mg/L 2,4-D和0.5mg/L 6-BA的MS培养基上6周可诱导产生2种类型的胚性愈伤组织,一种表面具光泽、白色;另一种表面光滑湿润具光泽,色泽淡黄或无色透明。组织切片表明,胚性愈伤组织的细胞体积小,细胞核大,细胞质浓,细胞排列紧密;非胚性愈伤组织细胞的体积大,细胞核小,细胞质稀薄。胚性细胞团培养在不含激素的培养基上可诱导产生体细胞胚。体细胞胚直接起源于胚性细胞团表皮或近表皮的单细胞,经历与合子胚相似的球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚发育阶段。所有发育时期的体细胞胚的胚轴、子叶均产生次生体胚,它们起源于细胞质较浓的表皮单细胞。     

枣树体细胞胚发生和组织学研究

以临泽小枣子叶切块为外植体,在附加０．２mg/L IBA 1．0mg/L 6-BA的ＭＳ培养基上１周后切块边缘可诱导出白色胚愈伤组织,继续培养１个月后愈伤组织中产生体细胞胚。体细胞胚发生不同步,经历球形胚、心形胚、子叶胚等阶段,与合子胚发育途径相似。组织切片表面胚性愈伤组织细胞体积小,细胞核大、细胞质浓,细胞排列紧密;而非胚性愈伤组织细胞体积大、细胞核小、细胞质稀薄,子叶胚时期体细胞胚内部出现维管束,并观察到螺纹导管。     

2,4-D诱导的花生体细胞胚发生的组织学研究

花生成熟胚胚叶在佃附加20mg/L 2,4-D的培养基上诱导20d后,转移至无激素培养基MS0继续培养,可获高频体细胞胚发生。组织学观察表明,体细胞胚起源于胚叶上表皮及表皮下数层细胞,这些细胞脱分化形成细胞质浓厚、细胞核大的胚性细胞团,胚性细胞团继续分裂形成体细胞胚。体细胞胚的发育过程经历球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚四个时期。     

2，4-D诱导的花生体细胞胚发生的组织学研究

花生成熟胚胚叶在MS附加 2 0mg/L 2 ,4_D的培养基上诱导 2 0d后 ,转移至无激素培养基MS0 继续培养 ,可获高频体细胞胚发生。组织学观察表明 ,体细胞胚起源于胚叶上表皮及表皮下数层细胞 ,这些细胞脱分化形成细胞质浓厚、细胞核大的胚性细胞团 ,胚性细胞团继续分裂形成体细胞胚。体细胞胚的发育过程经历球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚四个时期     

茴香组织培养中体细胞胚胎发生的组织细胞学研究

将茴香幼茎或叶柄的愈伤组织转入附加6-BA和低浓度2,4-D的MS培养基以后,愈伤组织逐步由松软状转变成为颗粒状的胚性愈伤组织,胚状体起源于胚性愈伤组织中的单个细胞或胚性细胞团。在含NAA和6-BA的培养基中,胚状体发育成熟,并再生小植株。茴香的胚状体主要以单细胞内起源方式发生。首先由胚状体单个原始细胞分裂形成2-细胞原胚,2-细胞原胚以三种方式进行分裂:1.T- 形分裂;2.直线形分裂;3.田字形分裂。不同的分裂方式决定了胚柄的有无。茴香胚状体的发育过程与合子胚基本相同。由原胚发育成为球形胚,依次经过心形胚和鱼雷胚阶段,形成成熟的子叶胚。在胚状体发育的每一个阶段,都有其分生组织的活动中心。球形胚期,两团分生组织位于胚体中部对应的两点;心形胚期,位于两侧和中部;鱼雷胚期,分生组织的分布在子叶形成区域呈倒“U”形,在下胚轴部位呈中空的梭形。到子叶期,分生组织从两片子叶伸向胚根,呈“Y”形分布。两子叶间产生茎生长点,由生长点分化出叶原基。胚状体最终发育成为完整植株。     

油茶子叶体细胞胚形成的细胞学观察

以油茶子叶块为外植体,在附加2.0mg·L-1 2,4-D和1.0mg·L-1KT的MS培养基上进行培养,观察诱导产生的体细胞胚性愈伤组织细胞学结构.结果表明:油茶体细胞胚可直接起源于表皮或近表皮的单细胞原胚或者多细胞团.其中,单细胞原胚先分裂形成二细胞原胚,二细胞原胚再进一步分裂后聚集形成多细胞团,最终经过球形胚、梨形胚、心形胚发育形成一个完整的体细胞胚.     

TDZ诱导花生幼叶的不定芽和体细胞胚发生的组织学观察

花生实生苗幼叶接种于MS TDZ 0.2mg/L NAA0.4mg/L诱导培养基上经诱导培养,继而转移到无激素培养基MS可获得不定芽和体细胞胚。组织学观察表明,花生不定芽和体细胞胚均起源于愈伤组织表层,不定芽为多细胞起源,而体细胞胚起源于单个胚性原始细胞。体细胞胚的发育经历多细胞原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚等时期发育成小植株。     

三七体细胞胚胎发生及人工种子研制

三七为五加科的重要药用植物。以三七的种胚为材料接种于MS 补加2,4-D、IAA、NAA 各1 mg/L的培养基上。接种后约二个月,在MS 补加IAA 或NAA 的培养基上可以产生体细胞胚;在MS 加2,4-D 的培养基上只产生愈伤组织而无器官分化。体细胞胚在MS+IAA 0.5 mg/L+GA_3 1 mg/L 培养基上可发育成小植株。体细胞胚用4%海藻酸钠和2%氯化钙进行人工种皮包埋后,在无菌条件下,人工种子可转换成苗,转换率达89.7%。三七的体细胞胚起源于愈伤组织内或近表层的单个胚性细胞。体细胞胚经球形、心型、鱼雷形及子叶期等诸阶段发育成植株。通过PAS 法染色发现,胚性细胞、球形胚、早心形胚阶段有明显地淀粉积累,淀粉颗粒大而密集;到晚心形胚及子叶期体胚,淀粉颗粒小而少或消失。淀粉消长变化的规律与体细胞胚的发育有着密切的关系。     

Localization of arabinogalactan-proteins in different stages of embryos and their role in cotyledon formation of <Emphasis Type="Italic">Nicotiana tabacum</Emphasis> L.

Arabinogalactan proteins (AGPs) have been implicated in plant development including sexual plant reproduction. In this paper, the expression of AGPs and the effects of β-glucosyl Yariv reagent (βGlcY, which binds arabinogalactan proteins) in embryo development and cotyledon formation were investigated. Immunofluorescence assay displayed that the expression of AGPs labeled with antibody JIM13 was developmentally regulated. In early stages, AGPs were evenly distributed in the whole embryo, except for a short polar expression in the basal suspensor cell. In the globular stage of embryo, AGPs were condensed in the embryo proper (EP), apex of the EP, and at the juncture of the EP and suspensor. In heart-shaped embryo, APGs were only present at the juncture of the EP and suspensor. Immunogold labeling assay showed that the strong expression of AGPs at the juncture of the EP and suspensor was localized in the cell wall. Provision of βGlcY to the in vitro ovule culture medium caused delayed growth of embryos, cotyledon defect and abnormal venation pattern. Consequently, βGlcY induced the death of defective seedlings with the characteristics of deformed or irregular single cotyledon. Our results suggested that AGPs play functional roles in embryo development, cotyledon formation and seedling morphology establishment in Nicotiana tabacum L.     

北柴胡胚和胚乳的发育及对其种子萌发的影响

利用常规石蜡制片技术对北柴胡胚和胚乳的发育及对其种子萌发的影响进行了观察。结果表明北柴胡胚的发育属于茄型,基细胞进行一次横分裂后不再分裂,因而胚柄不发达,且很早解体。胚乳的发育属于核型,初生胚孔核的分裂远远早于受精卵的分裂。对果实采收时期胚发育状况进行统计发现,在被测采收期果实中有20%的果实的胚处于球形胚阶段,70%处于心形胚,只有10% 处于鱼雷胚,说明北柴胡种子采收时胚处于不同的发育阶段,存在形态后熟现象,这是北柴胡种子萌发难、萌发率低且出苗不整齐的主要因素。     

黄顶菊的大孢子发生、雌配子体与胚胎发育

用常规石蜡制片对黄顶菊(Flaveria bidentis(L.) Kuntze)大孢子发生、雌配子体和胚胎的发育过程进行了观察.黄顶菊雌蕊柱头二裂,2心皮,1室,单胚珠,基生胎座,单珠被,薄珠心,倒生胚珠,具发达的珠被绒毡层.珠心表皮下分化出孢原细胞,孢原细胞直接发育为大孢子母细胞,大孢子母细胞减数分裂形成直列四分体...     

Glutathione metabolism and antioxidant responses during Eleutherococcus senticosus somatic embryo development in a bioreactor

Compared to non-embryogenic callus, proembryonic mass, globular, and heart-shaped embryos of Eleutherococcus senticosus had higher levels of endogenous reduced glutathione (GSH). GSH content declined during the course of the embryo development (torpedo and cotyledon). Similarly, glutathione reductase that is involved in the recycling of GSH providing a constant intracellular level of GSH was also higher in globular and heart-shaped embryos. The transient increase in GSH contents also correlated with the changes in measured γ-glutamylcysteine synthetase activity over the same period. The endogenous levels of oxidized glutathione showed similar trend during development of the somatic embryos, whereas it declined in maturing somatic embryos. A pronounced increase in glutathione-S-transferase, glutathione peroxidase, catalase, and guaiacol peroxidase activity was observed during somatic embryo maturation. Ascorbate-glutathione cycle enzymes (ascorbate peroxidase; dehydroascorbate reductase and monodehydroascorbate reductase) activities also induced indicated that antioxidant enzymes played an important role during embryo development. These results suggested that the coordinated up-regulations of the antioxidant enzymes and glutathione redox system provide protection during somatic embryo development in E. senticosus. Antioxidant responses through alterations of the glutathione redox systems, have been described in the present studies have a significant role in somatic embryo development.     

茶（Camellia sinensis Kuntze）离体培养体细胞胚胎发生的组织细胞学研究

以茶树叶片为外植体．以ＭＳ培养基附加４ｍｇ·Ｌ－１６－ＢＡ,２ｍｇ·Ｌ－１ＩＡＡ．３ｍｇ·Ｌ－１ＧＡ３和０．２—０．３％活性碳诱导出愈伤组织和胚状体,进一步形成小植株．切片观察表明．茶叶愈伤组织胚状体的发生,起源于愈伤组织表层及其内部的单个细胞和细胞团,胚状体发育顺序与合子胚大致相似．经球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚阶段．但发育过程中常有畸形胚出现．     

北柴胡胚和胚乳的发育及对其种子萌发的影响

利用常规石蜡制片技术对北柴胡胚和胚乳的发育及对其种子萌发的影响进行了观察。结果表明北柴胡胚的发育属于茄型,基细胞进行一次横分裂后不再分裂,因而胚柄不发达,且很早解体。胚乳的发育属于核型,初生胚孔核的分裂远远早于受精卵的分裂。对果实采收时期胚发育状况进行统计发现,在被测采收期果实中有20％的果实的胚处于球形胚阶段,70％处于心形胚,只有10％处于鱼雷胚,说明北柴胡种子采收时胚处于不同的发育阶段,存在形态后熟现象,这是北柴胡种子萌发难、萌发率低且出苗不整齐的主要因素。     

柽柳胚和胚乳发育的观察

利用常规石蜡制片技术,对柽柳（Tamarix chinensis Lour.）胚和胚乳的发育过程进行了观察。结果表明,胚发育属茄型,其基细胞先行纵裂。胚柄基部发育迅速,具吸器作用,球形胚期胚柄最为发达,其细胞质丰富,贮藏淀粉类物质,至晚心形胚期胚柄依然存在。助细胞被受精产生多胚现象。胚乳发育属核型,初生胚乳核常常晚于合子分裂,胚乳核的分裂速度慢于胚体细胞的分裂速度。当胚乳游离核为 32个时,以自由生长细胞壁的方式进行胚乳细胞化。胚乳细胞进一步增殖极少。珠心细胞只有两层,细胞核大,胞质丰富,内含贮藏物质,至心形胚期逐渐解体。