灵芝孢子粉氨基酸,脂肪酸及元素组成的研究

从灵芝Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｃｈａｍ孢子粉中检出１８种常见氨基酸,总是为７．２９～７．７１ｍｇ／１００ｍｇ;其中甲硫氨酸含量高达３．３０～３．４８ｍｇ／１００ｍｇ人体必需氨基酸含量占总量的６９．４～７０．４％,灵芝孢子粉含有棕榈酸（１９．８％）油酸（５５．２％）,亚油酸（１６．５％）以及少量的肉豆蔻酸,硬脂酸,廿碳烯酸及廿二碳四烯酸等,对５６种元素进行定量或半定量分析,结果表明灵芝孢子粉碳氮比     

HPLC法测定灵芝孢子粉中三萜含量

为准确测定灵芝孢子粉中三萜的含量,运用高效液相建立适合孢子粉的分析测定方法。通过对前处理条件的优化,确定40%乙醇为孢子粉中等极性三萜酸类的最佳提取溶剂,浓缩倍数是子实体提取条件的50倍。通过色谱柱和洗脱条件的优化,建立了包括灵芝酸I、灵芝烯酸C、灵芝酸C2等13种标准品测定方法,方法学考察显示该分析方法精密度、重复性、稳定性的RSD值均小于5%,可以用于灵芝孢子粉中三萜类成分的定量检测。通过5组样品的分析发现,灵芝酸C6、灵芝酸G、灵芝酸A、灵芝酸D、灵芝酸F是灵芝孢子粉中的主要三萜类成分,其中灵芝酸A含量最高,平均占样品三萜总量的比例达19.71%;三萜类成分的溶出量与是否破壁没有相关性。三萜类成分在灵芝孢子粉和灵芝孢子油产品中的含量非常低,孢子粉的三萜含量为14.24-99.70μg/g,仅为子实体的1/100,灵芝孢子油中三萜含量也均低于50μg/g,因此三萜类成分不适合作为灵芝孢子粉及其相关产品的定量检测指标。     

玉米黑粉菌孢子粉的无机元素和氨基酸含量测定

对玉米黑粉菌(Ustilago maydisDC.Corola.)孢子粉的无机元素和氨基酸含量进行了测定。结果表明:玉米黑粉菌孢子粉含有丰富的无机元素,其中铁、钙、镁、磷、锌、锰含量分别为100μg/g、3 561μg/g、1 382μg/g3、500μg/g、101μg/g和24μg/g;同时含有8种必须由食物蛋白质提供的氨基酸,以苏氨酸含量最多,为340.18 mg/100 g。     

灵芝孢子粉中氨基酸和微量元素的分析

本文用氨基酸自动分析仪测定了灵芝孢子粉中的19种氨基酸,其总含量为7.20g/100g,其中牛磺酸(含0.02g/100g)为作者首次测得。我们还用电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES法)测定了灵芝孢子粉中14种微量元素和8种常量元素,其中Ge的含量为5.9mg/kg,Hg、As、Pb的含量依次为<0.01、1.5、2.2mg/kg,而P、Fe、Zn等有益元素的含量介于0.12×10~3mg/kg与6.22×10~3mg/kg之间。     

灵芝子实体和孢子粉三萜含量的测定及体外抗肿瘤活性的评价

目的测定灵芝子实体和破壁灵芝孢子粉中的三萜含量,并评价其醇提物的体外抗肿瘤活性。方法采用高氯酸显色法测定灵芝子实体和破壁灵芝孢子粉中的三萜含量,采用磺酰罗丹明B蛋白染色法(sulforhodamine B,SRB)评价灵芝子实体和破壁灵芝孢子粉醇提物对宫颈癌He La细胞、结肠癌HCT-116细胞和乳腺癌MCF-7-ADM细胞的体外抗肿瘤活性。结果研究的灵芝子实体中三萜质量分数为0.92%,破壁灵芝孢子粉供试品中三萜质量分数实测值为2.95%,但是灵芝孢子粉中脂肪油对高氯酸显色法有极大的干扰,因此破壁灵芝孢子粉三萜的实测值可能远高于实际值。活性评价结果显示,灵芝子实体的醇提物在100μg/m L时,其对人宫颈癌He La细胞和乳腺癌MCF-7-ADM细胞表现出了较强的抑制作用,抑制率分别为94.54%和71.30%;对结肠癌HCT-116细胞表现出较弱的抑制作用,抑制率为20.68%。破壁灵芝孢子粉的醇提物在100μg/m L和10μg/m L时,其对宫颈癌He La细胞表现出了弱的抑制作用,对另外2种细胞系仅在100μg/m L时表现出较弱的抑制作用。结论灵芝子实体的醇提物含有三萜并具有较好的抗肿瘤活性,可以将其开发为辅助治疗癌症的药物或保健品。含有脂肪油的灵芝孢子粉直接采用高氯酸比色法测定会高估其三萜的含量,需要进一步开发准确、可行的测定方法。     

灵芝悬浮培养中添加微颗粒Talc对灵芝酸产生的影响

灵芝酸是灵芝中重要的药理活性物质,其低产量限制了它的广泛应用和深入研究,高效提高液体发酵中灵芝酸的含量十分必要。以CGMCC 5.65为材料,在悬浮培养条件下,研究添加微颗粒Talc对灵芝酸产生的影响。结果表明,微颗粒Talc添加显著减小了灵芝细胞粒径,对照组为(3.33±0.16)mm,15g/L微颗粒Talc添加组为(2.04±0.12)mm。灵芝细胞中单体灵芝酸和总灵芝酸的含量在微颗粒Talc添加条件下也显著提高。15g/L微颗粒Talc添加组的总灵芝酸含量达到(1.51±0.02)mg/100mg细胞干重,GA-Mk、GA-T和GA-Me的含量最高为(6.02±0.29)、(5.08±0.14)和(1.71±0.09)μg/100mg细胞干重,分别是对照的1.6、4、1.9和1.4倍。另外,15g/L微颗粒Talc添加条件下鲨烯和羊毛甾醇的最大积累量分别为(3.69±0.23)和(34.86±6.41)μg/100mg细胞干重,是对照的2.6和4.2倍;灵芝酸生物合成途径关键基因fps和cyp-5150l8的表达量最高为对照的2.35和1.53倍。     

福建野生紫芝资源开发利用Ⅱ．“闽紫96”(中国灵芝)

由福建野生紫芝人工驯化得到的栽培菌株“闽紫96”,子实体中型,菌盖大小7．0～9．0×10．0～17．3cm,其担孢子形态饱满,6．84～7．37×10．26～11．05μm,较灵芝担孢子大;标本(HMAS 77207)经鉴定确认为紫芝(Ganoderma siruense J．D．Zhao,L．W．Hsu et X．Q．Zhang),是符合《中华人民共和国药典》记载的灵芝药材的来源菌物。2004-2005年,采用阔叶树枝桠材栽培“闽紫96”,推广栽培面积860m~3(菌材),平均年产量为12．70 kg/m~3(干品/菌材)。将“闽紫96”子实体超微粉碎加工成300目超细粉。扫描电镜观察可见:其超细粉呈纤维状,以分散、破碎的茵丝片段形态存在,长度范围为10～50μm,直径1．2～4．5μm不等;激光粒度检测结果表明:超细粉的表面积达到227．54 m~2/kg,D97=63．8μm。化学成分分析结果表明:“闽紫96”超细粉的水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、总糖、灰分及多糖含量分别为4．2 g/100g、10．84g/100g、3．71 g/100g、36．5g/100g、30．2g/100g、1．7 g/100g和1．3 g/100g;所含17种氨基酸总量为9．30 mg/100mg,其中必需氨基酸占65．7%;其脂肪酸构成以油酸(45．5%)、亚油酸(27．7%)及棕榈酸(18．8%)为主。此外,其重金属元素Pb,As,Hg,Cd等含量分别为＜0．2 mg/g、0．13 mg/g、0．072 mg/g、0．24 mg/g,符合国家商务部《药用植物及制剂外经贸绿色行业标准》(WM/T2-2004)要求。     

尖孢青霉(Penicillium splculisnorum 44)产生剌孢青霉酸的适宜条件

从7砷52株不同的青霉中筛选到6株能产生刺孢青霉酸的菌株。它们分属于尖孢青霉(P. sptcultsportum, 4株)和产紫青霉(P. purpurogenum, 2株),其中以P．Spiculisporum 44 的产酸量最高。产酸的适宜培养基组份为(g/L)：葡萄糖130—150,NH4NO3,0.6,KH2PO41.0,MgSO4·7H7O 0.2,玉米浆0.6一0.8,起始pH 6．0。摇床培养8—9天,发酵液中产酸量在40 g／L以上。酸的得率为消耗碳量的53％或更多。该酸溶液(8．765×103 mol／L)的表面张力及其对煤油的界面张力分别为38．1和6．68 mNm-     

灵芝孢子粉中脂溶性成分分析方法的建立

运用高效液相建立灵芝孢子粉中脂溶性成分的分析测定方法。通过色谱柱、洗脱条件、ELSD参数的优化,建立了12种脂溶性成分的测定方法,结果表明,该方法简单、准确、稳定,可以实现孢子粉中甘油三酯、脂肪酸、甾醇三类脂溶性成分的同时提取、分析;破壁孢子粉中脂溶性成分为301.49-397.37mg/g,孢子油产品中脂溶性成分的含量为626.00-713.07mg/g,远高于三萜含量;1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯、甘油三油酸酯、1,2-二油酸-3-亚油酸甘油酯是主要的脂溶性成分,脂肪酸以不饱和脂肪酸亚油酸及油酸为主,甾醇中麦角甾醇含量最高。研究结果明确了灵芝孢子粉中脂溶性成分的物质基础,为深入研究其活性成分、全面评价孢子粉质量提供了依据。     

灵芝线粒体及其对菌丝生长、主要活性成分影响的分析

线粒体是为细胞提供能量（ATP）的细胞器,携带着自己的DNA——mtDNA,已有多种灵芝属菌株的线粒体基因组相继报道,但对于种内的线粒体基因组的分析较少,对核相同、线粒体不同的菌株间差异的研究也鲜有报道。本研究对两株灵芝线粒体基因组进行组装注释,根据差异片段构建分子标记进行种间分类。结果显示：两株灵芝线粒体基因组大小分别为49 233bp、61 563bp的闭环结构,含有15个常见蛋白编码基因,rRNA大小亚基基因及26个携带氨基酸的tRNA基因,其差异区段主要为内含子序列、大亚基及基因间区。根据cob、cox2基因序列能够进行灵芝种间区分,用于灵芝种间鉴定。本研究还根据灵芝119、灵芝无孢的单核菌株构建同核异质体（TY-119、TY-W）,分析线粒体对菌落形态、菌丝生长速度及多糖、三萜成分的影响,结果显示：同核异质体TY-W与TY-119菌落形态上有一定差异,同核异质体TY-W菌丝生长速度为4.77mm/d,是TY-119菌丝生长速度4.50mm/d的1.06倍,同核异质体TY-119菌丝、子实体阶段多糖含量分别为4.45mg/g、12.14mg/g是TY-W菌丝体多糖含量（3.23mg/g）的1.38倍、子实体多糖含量（10.24mg/g）的1.19倍;同核异质体TY-W菌丝、子实体阶段的三萜含量分别为6.82mg/g、11.45mg/g是同核异质体TY-119菌丝体三萜含量（9.26mg/g）的0.74倍,子实体三萜含量（9.10mg/g）的1.26倍。利用高效液相色谱分析同核异质体中灵芝酸含量显示同核异质体TY-W灵芝酸A、灵芝酸E、灵芝酸F含量分别为3.77μg/mL、14.29μg/mL、12.91μg/mL;是TY-119灵芝酸A含量（2.59μg/mL）的1.46倍、灵芝酸E含量（13.65μg/mL）的1.17倍、灵芝酸F含量（12.72μg/mL）的1.06倍。对同核异质体菌丝、子实体阶段多糖、三萜合成通路关键基因（pgm、ugp、gls、hmgs、hmgr、mvd、fps、sqs）表达量进行检测,显示两菌株间多数基因具有显著性差异。结果表明线粒体的不同会影响灵芝菌落形态、菌丝生长速度及多糖、三萜的含量,有助于我们进一步研究线粒体基因组。     

双歧杆菌培养滤液中核酸的提取及对肠癌细胞cAMP,cGMP的影响

实验观察了对数期长双歧杆菌、青春双歧杆菌培养滤液中提取的总核酸对肠癌细胞ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ的影响。结果发现,双歧杆菌培养中滤液中存在大量核酸,将双歧杆菌培养滤中的核提取纯化作用于大肠癌细胞ＣＣＬ１８７,ｃＡＭＰ增高,ＣＧＭＰ没有变化,提示核酸可能作为细胞膜外的第一信使物质腺苷环化酶活性。     

三线闭壳龟肌肉氨基酸分析

应用美国ＢＥＣＫＭＡＮ １２１ ＭＢ型全自动氨基酸分析仪对三线闭壳龟肌肉中的氨基酸种类及含量进行了分析。三线闭壳龟肌肉中能检出的氨基酸有１７种,每种氨基酸的含量如下：天门冬氨酸６９０５ｍｇ／１００ｇ,苏氨酸３２４０ｍｇ／１００ｇ,丝氨酸２９２９ｍｇ／１００ｇ,谷氨酸１２７４０ｍｇ／１００ｇ,脯酸２６８５ｇｍ／１００ｇ,甘氨酸２９５３ｍｇ／１００ｇ,丙氨酸３４８３ｍｇ／１００ｇ,酪氨酸２９１０ｍｇ／     

鱼类脂肪与脂肪酸的转运及调控研究进展

由于鱼油资源短缺, 植物油在水产饲料中广泛使用。然而, 随之而来的鱼体脂肪异常沉积等问题也日益突出, 严重危害养殖鱼类健康。脂肪的沉积是一个复杂的过程, 主要包括脂肪的合成、转运和分解。到目前为止, 在鱼类中已经进行了大量关于植物油替代鱼油影响脂肪沉积的研究。但是, 这些研究主要集中于脂肪的合成和分解, 有关脂肪转运的研究十分缺乏。脂肪转运不仅是影响组织脂肪沉积的重要因素, 而且在机体脂稳态和能量平衡中起着重要作用。因此综述了鱼类脂蛋白的种类和组成, 鱼类对脂肪和脂肪酸的转运, 营养因素对脂肪和脂肪酸转运的影响, 指出了脂类转运研究的重要性和紧迫性, 并且提出了未来需要努力的方向。     

有机酸在疫霉营养中作用的进一步研究

利用放射性同位素标记的~(14)C-琥珀酸跟踪,进一步证明有机酸在晚疫病菌的营养中作为碳架与铵盐结合而合成菌体的氨基酸,同时也进入三羧酸循环参加呼吸。所以其作用不仅仅是缓冲作用。所试6个生理小种19株国内外晚疫病菌都对有机酸有迫切需要而旺盛生长,只有两株国外菌种长势太弱。其他测试过的疫霉P.boehmeriae,P.capsici,P.cinnamomi,P.citrophthora,P.colocasiae,P.erythroseptica,P.fragariae,P.megasperma f.sp.glycinea,P.palmivora,P.parasitica,P.sinensis和P.syringae 12种包括A_1与A_2交配型共18株菌都对有机酸有需要,只在迫切程度上不同。但有机酸在疫霉属营养上有普遍意义则是显而易见的。     

温光对稻米蛋白质及氨基酸含量的影响

研究水稻结实期的温、光条件对稻米蛋白质与氨基酸含量的影响,其结果表明：同一品种作为早季栽培时,稻米氨基酸含量比作晚季栽培时低,分期播种时,以结实期日平均气温为２４℃时蛋白质含量为最高;不同海拔高度种植时,以８００ｍ处蛋白质含量为最高;结实期人工高温处理,稻米蛋白质和氨基酸含量降低,低温（２１／２０℃）处理时,粳稻的氨基酸含量增加而籼稻则有所降低,籼稻氨基酸形成的适温在２４￣２６℃之间,弱光下,糙米     

加速侵蚀对土壤腐殖酸动态变化的影响

土壤腐殖酸的流失是土壤退化的标志之一。林地被开垦破坏后,土壤腐殖酸的流失程度在坡面上的空间分布与侵蚀方式和侵蚀强度相对应,坡面中部和中下部浅沟沟槽处最为严重,细沟侵蚀区次之,梁峁上部片蚀区相对最弱。侵蚀土壤中的腐殖酸总碳、胡敏酸碳和富啡酸碳含量随开垦年限的增加呈指数减少,其减少程度受侵蚀强度和侵蚀方式的影响。腐殖酸的流失程度与加速侵蚀造成的土壤剖面破坏密切相关。恢复植被可使土壤腐殖酸逐渐增加,土壤肥力得到恢复,土壤退化过程得到逆转。     

海洋真菌多不饱和脂肪酸的快速检测

从海水中分离了一种产EPA和DHA的真菌,并建立了微生物油脂的快速提取、甲酯化及其多不饱和脂肪酸的含量的气相色谱测定方法。结果表明：采用CHCl3-KOH-CH3OH一步提取甲酯化适合于产多不饱和脂肪酸菌株的快速检测。对其油脂的提取,采用湿菌丝魏氏盐酸水解法较为合适;并用KOH－CH3OH法对所得油脂进行了甲酯化。最后,运用毛细管气相色谱采用外标法测定了甲酯化样品中多不饱和脂肪酸的含量,其油脂中EPA和DHA的含量分别为7.32％和7.58％。     

樟科植物中脂肪酸成分的分布

本文报道了樟科11个属49种种子油和‘种果肉油的脂肪酸成分。其中樟族和木姜子族的各属种(滇新樟除外)种子油脂肪酸成分以 C_(10)、C_(12)和 C_(14)饱和或烯酸为主。而厚壳桂属、润楠和楠属种子油脂肪酸成分主要为棕榈酸、油酸和亚油酸。山苍子、天目木姜子、大果山胡椒、山橙、红脉钓樟、鸭公树和锈叶新木姜子种子油中的 C_(10)、C_(12)和 C_(14)烯酸经分离鉴定均是顺式Δ~4烯酸。