Opioid receptor antagonist affinity ligands: 6β-bromoacetamido-6-desoxynaltrexone and 6β-thioglycolamido-6-desoxynaltrexone

The present study, utilizing thioglycolamido as the reactive group, describes the synthesis and pharmacology of a new opioid antagonist affinity ligand, 6-thioglycolamido-6-desoxynaltrexone (TAN) and compares TAN with a related known compound, 6-bromoacetamido-6-desoxynaltrexone (BAN). Both compounds were tested for their reversible and irreversible inhibition of [³H]naloxone binding to calf brain membranes. Reversible binding of BAN and TAN had K_i values of 1×10^–9 and 1×10^–10 M, respectively as determined by log probit plots. Irreversible binding was determined after extensive washing to remove all non-covalently bound ligand. At a concentration of 5×10^–8 and 1×10^–8 M for BAN and TAN irreversible binding was inhibited 50% of the maximum value. A study of the time course of irreversible inhibition of [³H]naloxone binding revealed that maximal inhibition occurred within 5 min with a concentration of 1×10^–7 M of either agent. TAN but not BAN when administered systematically to mice produced an antinociceptive effect as measured by the writhing test. When administered intracerebraventricularly BAN did not block morphine-induced analgesia for more than 2 hr; whereas, with a single ED₅₀ dose of 20 nmoles of TAN i.c.v. morphine-induced analgesia was almost completely blocked for a period of over 24 hr, as determined by the tail flick test. Although the SH group of TAN were required for the covalent interaction with opioid receptors, the site of TAN's interaction appears to involve other than protein SH groups.     

6′-substituted and 6′,6″-disubstituted derivatives of raffinose

The reaction of 6′-chloro-6′-deoxyraffinose deca-acetate with a variety of nucleophilic anions (Br^-,I^-,N^-₃) gave the corresponding 6′-substituted raffinoses. The 6′-azide was further converted into 6′-amino-6′-deoxyraffinose, isolated as its N-acetyl derivative, and silver fluoride-induced elimination of hydrogen iodide from the 6′-iodide gave the 6′-deoxy-5′-ene. Treatment of 6′-chloro-6′-deoxyraffinose and 6′,6″-dichloro-6′,6″-dideoxyraffinose with base afforded, respectively, 3′,6′-anhydro-and 3′,6′;3″,6″-dianhydro-raffinose in high yields. In addition, the dichloride was converted into 6′,6″-diazido-6′,6″-dideoxyraffinose.     

成纤维细胞生长因子6(FGF6)的研究进展

成纤维细胞生长因子6(fibroblast growth factor 6,FGF6)是成纤维细胞生长因子家族(FGFs)的成员之一,主要通过与酪氨酸激酶受体(fibroblast growth factor receptor,FGFR)1和4结合发挥其生物学活性。研究发现,人FGF6几乎都积聚在肌源性细胞系中,参与肌源性细胞系的增殖及分化,在肌肉修复和再生过程中起重要作用,同时它还是一个重要的调节骨生成和骨重建的因子;FGF6在心脏中也有表达,进一步试验结果表明其具有促进心肌细胞增殖及保护心肌细胞凋亡的作用;在成体睾丸和乳腺癌中也检测到有FGF6的转录物,表明其在肿瘤发生发展中的作用。目前,FGF6在多种疾病中的功能和相关机制仍有待进一步研究和确认,但其所具备的生物学活性尤其是在肌肉再生方面具有重要的意义和巨大的应用潜力。     

锌指蛋白6(ZBED6)研究进展

锌指蛋白6(ZBED6)基因是新发现的一个转录调控因子,与肌肉的生长发育密切相关,可调控胰岛素样生长因子2(Insulin-like growth factor 2,IGF2)在内的多种基因的表达,为哺乳动物特有,序列高度保守。IGF2作为重要的生长调节因子,内含子3区域可与ZBED6结合,ZBED6的结合可抑制IGF2表达,进而调控细胞的增殖分化和肌肉的生长发育。总结了目前对ZBED6基因的生理功能研究进展,已有研究表明ZBED6可抑制IGF2的表达,促进骨骼肌、心脏、肝脏、肾脏等器官的生长发育,降低脂肪沉积,体内蛋白质、脂质等生物大分子的代谢过程也随之发生变化,ZBED6在糖尿病、癌症的发展过程中均发挥着重要的调控作用。此外,还总结了影响ZBED6表达的多种因素,包括碱基突变、DNA甲基化、组蛋白修饰以及回文序列等。最后,展望了ZBED6的实际应用潜力,其作为一个与肌肉生长发育密切相关的转录因子,可通过敲除ZBED6促进肌肉生长,为瘦肉型动物的遗传育种提供了新的思路。     

6C6鼠-人嵌合抗体的纯化及鉴定

采用基因工程技术 ,将小鼠 6C6单克隆抗体可变区基因与人抗体恒定区基因连接 ,构建了鼠 人 6C6嵌合抗体基因 ,并在CHO细胞中高效表达 .利用ProteinA亲和层析柱从细胞培养上清中分离纯化 6C6嵌合抗体 ,得到电泳纯度大于 98%的 6C6嵌合抗体 ,其重链 (5 5kD)和轻链 (2 4kD)符合IgG相对分子质量的理论值 .Western印迹、细胞免疫荧光和免疫组织化学实验结果均呈阳性 .表明6C6嵌合抗体可识别人乳腺癌细胞表面上的肿瘤相关抗原 ,保持了 6C6单克隆抗体的特性 ,为后续的研究工作奠定了基础     

怪兽猎人6

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抗白粉病6R(6B)染色体异代换系的选育

以中７９０２（６Ｂ）单体为母本,Ｈｏｌｄｆａｓｔ－ＫｉｎｇⅡ６Ｒ二体异附加系为父本配制杂交组合,经白粉病抗性追踪和细胞学鉴定,选育出抗白粉病６Ｒ（６Ｂ）二体异代换系。其与普通小麦中８６０１以及与“中国春”６Ｂ重双端体的Ｆ１植株,在减数分裂中期Ⅰ染色体构型分别为２０″＋２′和２０″＋１′＋２ｔ′ ,从而,证实６Ｂ染色体被 ６Ｒ染色体代换。同时,对６Ｒ染色体上抗白粉病基因的进一步利用进行了讨论。     

广西鸭源H6N6亚型禽流感病毒NA的序列分析

2009年至2014年间我单位在广西南宁、防城港和梧州三市活禽交易市场进行流行病学调查时,在鸭咽喉和泄殖腔中分离到10株H6亚型禽流感病毒(AIV)毒株。为了解这10株病毒的神经氨酸酶基因(NA)的分子特征和差异,我们运用RT-PCR对这10株H6亚型禽流感病毒的NA基因进行了扩增、序列测定及分析。结果显示,所分离的10株病毒均为H6N6亚型流感病毒。序列同源性分析结果表明A/DK/NN/6121/2013株的NA基因与其他9株NA基因差异性较大,差异性达到5.4%~5.9%,其余9株之间相似性在97.9%~100%;南宁与防城港、南宁与梧州以及梧州与防城港毒株相似性分别为94.5%~100%、94.1%~98.1%和97.8%~98.5%,这些数据表明不同毒株呈现一定的地域性差异。氨基酸序列分析发现10个毒株NA基因上潜在的糖基化位点也有所不同,表明这些毒株有异源性。遗传进化分析表明10株NA基因片段均属于欧亚谱系的禽源演化分支,除了南宁市的DK/NN/6121与福建相应毒株遗传进化关系较近外,其他9株与越南的相应毒株相互之间遗传进化关系都很亲近,且与越南A/duck/Vietnam/LBM235/2012(H3N6)株的NA基因存在很近的遗传关系,推测它们之间的基因可能存在基因交流;同时发现与台湾和韩国等的毒株关联不大。     

人疱疹病毒6型的研究进展

人疱疹病毒6型(HHV-6)是一种新发现的疱疹病毒,属于β亚科。HHV-6感染与一些疾病的发生相关。如幼儿急疹、器官移植后并发症、AIDS以及人类某些肿瘤等。就HHV-6的生物学特性、流行病学以及与人类疾病的关系等作一综述。     

贵州6种蝙蝠的核型

采用常规骨髓细胞空气干燥法,研究了贵州6种蝙蝠的核型。白腹管鼻蝠(Murina leucogaster)2n=44,染色体臂数(FN)为58;普通长翼蝠(Miniopterus schreibersi)染色体数是2n=46,FN为50,黄大蹄蝠(Hipposideros pratti)2n=32,FN为60;角菊头蝠(Rhinolophus cornutus)2n=62,FN为60;云南菊头蝠(R.yunnanensis)2n=44,FN是60;犬蝠(Cynopterus sphinx)2n=34,FN=58。其中白腹管鼻蝠、云南菊头蝠和犬蝠为国内首次报道。     

TRPC6在中枢神经系统的作用

TRPC6（Thetransientreceptorpotentialcanonical6）为瞬时受体电位（TRP）超家族的成员之一,编码钙可通透的非选择性阳离子通道。其具有六次跨膜结构。TRPC6同型或异型四聚体通道由TRPC6蛋白相互结合形成或与同在一个亚家族的TRPC3,TRPC7形成。TRPC6通道可被G蛋白耦联受体（GPCR）和受体酪氨酸激酶（receptortyrosinekinasesRTK）通过激活磷脂酶C（PLC）激活。其还可直接被第二信使DAG（diacylglycer01）激活。已有研究证实该通道通过激活上述信号传导通路参与了多种生理过程。TRPC6基因编码的蛋白在人体多个部位均有表达。TRPC6在中枢神经系统广泛表达。其在不同部位的表达量不同,并与TRPC家族的其他成员一起参与了多种生理过程。TRPC6引起的细胞阳离子浓度的变化可能参与了多种神经系统疾病的发生发展过程。因此。研究TRPC6在中枢神经系统中的作用对疾病发病机制的了解及治疗变得更有意义。本文就TRPC6在中枢神经系统中的作用进行综述,并主要介绍其在树突发育,神经元保护及细胞生长方面的作用。     

TRPC6 在中枢神经系统的作用

摘要：TRPC6(The transient receptor potential canonical 6)为瞬时受体电位(TRP)超家族的成员之一,编码钙可通透的非选择性阳离 子通道。其具有六次跨膜结构。TRPC6 同型或异型四聚体通道由TRPC6 蛋白相互结合形成或与同在一个亚家族的TRPC3, TRPC7 形成。TRPC6 通道可被G 蛋白耦联受体（GPCR）和受体酪氨酸激酶（receptor tyrosine kinases RTK）通过激活磷脂酶C (PLC)激活。其还可直接被第二信使DAG (diacylglycerol)激活。已有研究证实该通道通过激活上述信号传导通路参与了多种生理 过程。TRPC6 基因编码的蛋白在人体多个部位均有表达。TRPC6 在中枢神经系统广泛表达。其在不同部位的表达量不同,并与 TRPC家族的其他成员一起参与了多种生理过程。TRPC6 引起的细胞阳离子浓度的变化可能参与了多种神经系统疾病的发生发 展过程。因此,研究TRPC6 在中枢神经系统中的作用对疾病发病机制的了解及治疗变得更有意义。本文就TRPC6 在中枢神经系 统中的作用进行综述,并主要介绍其在树突发育,神经元保护及细胞生长方面的作用。     

白细胞介素6的神经生物学效应

自１９８７年以来,白细胞介素６（ＩＬ－６）的神经生物学研究日益增多,研究表明：（１）ＩＬ－６可在中枢神经系统肿瘤细胞株中表达;（２）ＩＬ－６可在中枢神经系统正常细胞中表达;（３）ＩＬ－６具有维持神经元的生存及促分化效应;（４）ＩＬ－６在神经内分泌免疫调节网络中起一定作用;（５）ＩＬ－６对下丘脑体温调节中枢具有一定的作用;（６）ＩＬ－６与中枢神经系统病毒损伤后的修复密切相关,在非感染性中枢神经系统炎症中起一定作用,与早老性痴呆的发病有关。     

噻虫嗪对意大利蜜蜂6种CYP6AS基因表达的影响

细胞色素P450单氧酶(cytochrome P450 monooxygenase,CYP)是昆虫体内重要的解毒酶。CYP6AS亚家族基因特异性的存在于膜翅目昆虫中,一些特异性的CYP6AS基因已经被证实参与到蜜蜂对某些外源物质和杀虫剂的解毒和代谢过程中。本研究主要探测了亚致死浓度噻虫嗪对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica CYP单氧酶活性及CYP6AS亚家族基因表达水平的影响。首先测定了噻虫嗪LC_(10)和LC_5经口处理4日龄意大利蜜蜂后48 h CYP酶活性,然后应用荧光定量PCR技术检测了6种CYP6AS基因(CYP6AS3,CYP6AS4,CYP6AS5,CYP6AS10,CYP6AS14和CYP6AS15)表达变化情况。结果表明,噻虫嗪LC_(10)和LC_5处理后,意大利蜜蜂CYP酶活性均极显著增加(P0.01)。噻虫嗪LC_(10)和LC_5处理对意大利蜜蜂CYP6AS4,CYP6AS10和CYP6AS15基因表达没有显著影响;LC_(10)和LC_5处理后CYP6AS3基因表达量显著增加(P0.05); LC_(10)处理能够显著诱导CYP6AS5基因上调表达(P0.05);而LC_(10)和LC_5处理极显著抑制CYP6AS14基因的表达(P0.01)。这为进一步探究蜜蜂对噻虫嗪的解毒机制提供了新的线索。     

棉铃虫细胞色素P450 CYP6B6多克隆抗体的制备

利用核酸免疫蛋白加强法制备兔抗棉铃虫CYP6B6的多克隆抗体。构建重组质粒pcDNA3-CYP6B6并测序验证序列的正确性后,采用皮下多点注射法将重组质粒注射到新西兰大白兔体内,免疫3次后,第4次使用融合蛋白MBP-CYP6B6加强免疫。用ELISA法检测抗体的效价,并利用免疫组化法对抗体的特异性进行检测,得到的兔抗CYP6B6血清的效价达到1︰50 000。免疫组化法检测显示此抗血清能与棉铃虫不同组织中存在的CYP6B6蛋白特异性结合,说明利用核酸免疫蛋白加强法制备了高滴度、特异性强的兔抗棉铃虫CYP6B6的多克隆抗体。