CLDN6对宫颈癌细胞凋亡、凋亡相关蛋白及Akt信号通路活性的影响

目的研究紧密连接蛋白6(claudin 6,CLDN6)对宫颈癌细胞凋亡的影响。方法收集46例宫颈癌患者宫颈癌组织及对应的癌旁组织,应用免疫组织化学、Western blot和RT-PCR检测宫颈组织中CLDN6的表达水平;应用Annexin V/PI双染法流式细胞术检测过表达CLDN6对人宫颈癌细胞系Si Ha细胞凋亡的影响;Western blot检测过表达CLDN6对Si Ha细胞Bcl-xl、Bax、Bcl-2、Akt和p-Akt等蛋白水平的影响。结果宫颈癌组织中CLDN6 m RNA水平及蛋白水平均明显低于癌旁组织;过表达CLDN6使Si Ha细胞凋亡率和促凋亡蛋白Bax水平明显增加,抑凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xl水平和Akt磷酸化水平明显降低。结论 CLDN6可能通过抑制Akt信号通路活性促进宫颈癌细胞凋亡,宫颈癌的发生可能与CLDN6表达减少有关。     

bFGF对卵巢癌CAOV3细胞Bcl-2、Bcl-xl、Bax、Bad表达的影响

目的 研究bFGF调控卵巢癌CAOV3凋亡的信号通路及对Bcl-2、Bcl-xl、Bax、Bad表达的影响.方法 无血清饥饿诱导细胞凋亡.分为饥饿对照、bFGF、bFGF ＋ PD98059、bFGF ＋ Wortmannin组.流式细胞术、DNA Ladder检测细胞凋亡;Western印迹法检测ERK、PKB、Bad活性以及Bcl-2、Bax表达,RTPCR检测Bcl-2、Bcl-xl mRNA变化.结果 bFGF促进p-ERK、p-PKB、p-Bad、Bcl-2表达,抑制Bax表达及饥饿诱导的细胞凋亡.激酶抑制剂PD98059可抑制bFGF对ERK、Bcl-2、Bax的调节作用,Wortmannin可抑制bFGF对PKB、Bad、Bax的调控作用,二者均可阻断bFGF对凋亡的抑制作用.bFGF对Bcl-xl表达无影响.结论 bFGF可能通过激活MEK/ERK、P13K/PKB信号途径通路调节Bcl-2、Bax、Bad表达,抑制饥饿诱导的卵巢癌CAOV3细胞凋亡.     

红托竹荪多糖诱导肿瘤细胞凋亡的作用初探

探讨红托竹荪多糖对小鼠腹水瘤S180细胞凋亡的作用。分别使用不同浓度的红托竹荪多糖处理S180细胞24h,Western blot法检测Bcl-xl、Bax、caspase-9和Caspase-3等蛋白表达,使用流式细胞仪检测细胞凋亡。Western blot 法检测结果显示Bcl-xl表达量随竹荪多糖剂量增加而降低,Bax表达量则相反,每组Bax/Bcl-xl的比值增加,Caspase-9、Caspase-3表达量增加;流式细胞仪检测结果显示：0、25、50和100mg/L组细胞凋亡率分别为5.12%±0.11%、9.61%±0.61%、16.39%±0.19%和17.05%±0.13%,与对照组相比细胞凋亡率增高,差异具有统计学意义（P<0.05）,推断红托竹荪多糖具有诱导S180细胞凋亡的功能。     

神经节苷脂GM1对帕金森模型小鼠黑质细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响

目的观察神经节苷脂GM1对帕金森模型小鼠黑质细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响,探讨其预防帕金森病的机制。方法成年C57-BL雄性小鼠分为正常对照组、模型组和神经节苷脂GMI治疗组。应用TUNEL法和免疫荧光组织化学染色技术观察各组小鼠黑质神经元凋亡及Bcl-2和Bax表达情况。结果TUNEL、Bcl-2和Bax阳性神经元主要位于黑质致密部。模型组黑质神经元凋亡数明显多于正常对照组,神经节苷脂GM1组黑质神经元凋亡数明显少于模型组。在模型组Bcl-2阳性神经元和Bax阳性神经元的数量均较正常对照组明显增多;在神经节苷脂GM1组Bcl-2阳性神经元的数量较模型组明显增多,但Bax阳性神经元的数量较模型组明显减少。结论神经节苷脂GM1可能通过增强黑质神经元内Bcl-2基因表达及抑制Bax基因表达的途径抑制黑质神经元的凋亡。     

硫酸化茯苓多糖对人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的影响

为了探讨硫酸化茯苓多糖(SP)对人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的影响,采用MTT法检测不同浓度、作用时间SP对乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用,倒置显微镜观察MCF-7细胞的形态学变化,RT-PCR检测SP处理MCF-7细胞凋亡相关基因(Bcl-2,Bax)的表达;Western blotting技术检测SP对乳腺癌细胞凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达变化。结果表明,SP对MCF-7细胞增殖有抑制作用,且在一定范围内呈剂量效应;细胞贴壁能力减弱,细胞间隙增大,胞膜褶皱;Bcl-2基因表达水平和蛋白表达水平明显降低(p0.05),Bax基因表达水平和蛋白表达水平明显升高(p0.05)。基于以上研究,SP通过促凋亡基因Bax的表达,抑制抗凋亡基因Bcl-2的表达来下调Bcl-2/Bax比值,激活凋亡途径,诱导MCF-7细胞的凋亡。     

急性铅应激诱导肝肾损伤及其分子机制初探

利用腹腔注射醋酸铅方法构建了铅染毒小鼠(Mus muscculus)模型,观察了染毒小鼠肝、肾的组织学变化,并通过免疫组织化学方法检测了染毒小鼠肝、肾组织中Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达量.结果发现,急性铅染毒可诱导肝和肾组织学损伤,且在诱导肝细胞和肾细胞凋亡、损伤过程中,随时间的延长,Caspase-3的表达量逐渐增加,而Bcl-2与Bax两蛋白表达量的比值呈逐渐下降趋势,有一定的时效性,染毒48 h后,与对照组相比,均差异极显著,表明铅可能通过影响Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达而诱导肝和肾细胞异常凋亡.     

镉诱导小鼠睾丸细胞凋亡与Caspase-3、Bcl-2和Bax mRNA的表达

一个月大雄性小鼠24只,随机分为6组,用30 μmol/kg CdCl2作用小鼠睾丸不同的时间(3 h、6 h、12 h、18 h、24 h)后,利用DNA电泳、免疫组化和半定量RT-PCR技术,分析生殖细胞凋亡过程中三种关键物质Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白和mRNA的表达量变化.结果显示:1) DNA各组 (除对照组外)均出现不同程度断裂.2)Caspase-3蛋白表达量一直上升,与对照组相比差异极显著;Bax蛋白在12 h前一直上升,与对照组相比差异显著,12 h后又开始下降,且与对照组相比无显著差异;Bcl-2蛋白在下降,与对照组相比差异显著.3)RT-PCR结果显示Caspase-3基因表达量减少;Bax基因表达量逐渐上升;Bcl-2基因表达量波动很大.综上所述,Caspase-3、Bcl-2和Bax三个基因可能参与了镉应激状态下小鼠睾丸组织细胞的凋亡过程.     

幽门螺杆菌感染促进胃炎儿童胃粘膜细胞的增殖

本研究旨在探讨幽门螺杆菌感染对小儿慢性胃炎患者细胞增殖的影响,使用内镜检查消化不良患者的上消化道症状,使用改良的Giemsa染色检测胃粘膜活组织中幽门螺杆菌,用苏木精/曙红和改良的吉姆萨染色活组织,并通过光学显微镜研究染色后胃粘膜样品组织病理学变化,RT-PCR检测各组胃粘膜细胞中调控细胞凋亡的Bcl-2、Bcl-xl、Bax和PCNA的mRNA表达,提取胃粘膜细胞蛋白质,利用蛋白质免疫印迹分析蛋白质浓度。组织化学染色结果表明,与对照相比,患有胃炎和幽门杆菌感染后的胃炎患者胃粘膜细胞明显增加,且幽门螺杆菌感染后细胞增殖更显著(p<0.05);幽门螺杆菌感染后Bcl-2和Bcl-xl,PCNA在患者体内表达显著上调(p<0.05),而细胞促凋亡因子Bax基因在胃炎患者感染幽门螺杆菌后被显著下调(p<0.05),蛋白免疫印迹分析Bcl-2,Bcl-xl,Bax和PCNA蛋白表达趋势与基因表达一致,说明结果可靠。幽门螺杆菌感染会显著提高慢性胃炎儿童患者胃粘膜细胞的增殖。     

白术抑制胃癌细胞SGC-7901增殖并促进其凋亡

目的观察白术对胃癌SGC-7901侧群细胞及非侧群细胞增殖及凋亡的影响。方法流式细胞仪分选SGC-7901中的侧群细胞;制备含白术药物血清;CCK-8法检测白术药物血清对细胞增殖能力的影响;流式细胞仪检测含白术药物血清对细胞凋亡的影响;Western blot检测药物血清对细胞中Bax及Bcl-2蛋白表达的影响;异种移植BALB/C小鼠成瘤实验观察白术对细胞体内成瘤能力影响;免疫组织化学检测白术对小鼠肿瘤组织中Bax及Bcl-2蛋白表达的影响。结果离体实验表明,含白术药物血清培养可明显降低SGC-7901侧群细胞的增殖率,同时可诱导其凋亡、分别上调和下调细胞中Bax和Bcl-2水平;在体实验显示,白术汤剂灌胃可显著抑制SGC-7901侧群细胞小鼠成瘤能力,分别上调和下调肿瘤组织中Bax和Bcl-2水平。非侧群细胞也有上述表现。结论白术可通过上调促凋亡蛋白Bax及下调抑凋亡蛋白Bcl-2从而促进胃癌SGC-7901侧群细胞及非侧群细胞凋亡,并抑制其增殖及体内成瘤能力。     

PTSD与杏仁核神经元细胞凋亡的关系

目的观察创伤后应激障碍（PTSD）大鼠杏仁核神经元细胞凋亡相关基因的表达与细胞凋亡的发生,从杏仁核神经元细胞凋亡揭示PTSD的部分发病机制。方法成年健康雄性Wister大鼠50只,随机分为连续单一刺激（single prolonged stress,SPS）模型的1d、4d、7d、14d组及正常对照组。应用免疫组化和Western Blotting技术检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2在PTSD杏仁核神经元的表达;采用TUNEL法检测PTSD大鼠杏仁核神经元细胞凋亡。结果PTSD大鼠杏仁核神经元凋亡相关基因Bax于4d达高峰,Bcl-2于1d表达最高,Bax／Bcl-2比值逐渐升高,于4d达到峰值,之后渐趋下降。TUNEL阳性细胞在SPS各组模型均出现,4d达最高峰。结论PTSD大鼠杏仁核神经元细胞凋亡中,凋亡相关基因Bax、Bcl-2各自发挥促进凋亡和抑制凋亡的作用,Bax／Bcl-2比值升高促进细胞发生凋亡,可能与杏仁核调节的PTSD恐惧异常的发病机制相关。     

Apoptosis regulators

Over the last decade, a great deal of attention has been directed at elucidating the role of apoptosis regulators in governing survival decisions in neoplastic cells, particularly those of hematopoietic origin. A major focus of this work has involved investigation of the function of pro- and anti-apoptotic members of the BCL-2 family, and the relationship between these proteins and mitochondrial integrity. Currently, these proteins can be classified into two broad categories: those that modulate mitochondrial function and those that regulate the activation of caspases responsible for activation and execution of the apoptotic cascade. Within the first category, certain proteins (e.g., BCL-2, BCL-xL) act to preserve mitochondrial integrity by preventing loss of mitochondrial membrane potential and/or release of pro-apoptotic proteins such as cytochrome C into the cytosol. Other proapoptotic proteins (e.g., BAX, BAK, BIM) promote release of cytochrome C. These proteins are therefore primarily involved in regulation of the intrinsic, mitochondrial apoptotic pathway. Within the second category, proteins such as the inhibitors of apoptosis proteins (e.g., XIAP) or FLIP block the activation of caspases, particularly those involved in engagement of the receptor-related, extrinsic apoptotic pathway. Cross-talk between the intrinsic and extrinsic pathways exists. For example, the BH3-domain only protein BID is cleaved by the activation of pro-caspase-8 through the extrinsic pathway, and translocates to the mitochondrion to promote cytochrome C release. Apoptosis is also regulated by various signal transduction pathways, possibly through post-translational modifications in BCL-2 family proteins. For example, phosphorylation of BCL-2 through a JNK-dependent mechanism has been postulated to contribute to apoptosis induced by the taxane class of cytotoxic agents. Finally, attempts to modulate apoptotic pathways with small molecules have recently received much attention. For example, small molecule inhibitors of BCL-2 or mimetics of SMAC/DIABLO, which opposes the actions of XIAP, have recently been shown to promote the antineoplastic activity of conventional cytotoxic agents. It is likely that an improved understanding of apoptosis regulation will lead to new insights into neoplastic transformation, and may also provide important leads for the development of novel antileukemic strategies.     

凋亡信号调节激酶1对细胞凋亡的调节作用

细胞存活与凋亡之间的平衡是多细胞生物正常发育与稳态的关键。细胞凋亡是受多种因素高度调控的细胞程序性死亡过程。凋亡信号调节激酶 1 (ASK1 )是促分裂原活化蛋白激酶激酶激酶家族的成员之一 ,它分别激活SER1 JNK和MKK3 MKK6 p38途径 ,在细胞因子及应激诱导细胞凋亡过程中起着关键作用。TNF受体和Fas信号转导系统在抗凋亡与促凋亡过程中发挥重要作用 ,其中包括TNF受体Ⅰ相关死亡域蛋白 (TRADD)、Fas相关死亡域蛋白 (FADD)等多种蛋白因子。细胞色素C是线粒体依赖性死亡信号 ,受Bcl 2家族蛋白的调节。反应性氧化合物的氧化激活使硫氧还蛋白 (Trx)氧化 ,并与ASK1分离 ,从而激活ASK1造成细胞凋亡。总之 ,许多促凋亡与抗凋亡因子组成复杂的、相互拮抗的机制。在信号转导的各种不同的关卡上 ,这些因子的平衡作用最终决定细胞的生与死。     

Apoptosis in Plants

Apoptosis is a feature of animal cells that explains some aspects of programmed cell death in plants. Differences between plant and animal cell development require that concepts be reexamined to signify how plant cells have evolved the need for cell elimination in the meristematic growth habit, life cycle, and alternation of generations. Central to this theme is the regulation of divisional cycles for mitosis, meiosis, apomeiosis, and their related sexual and asexual reproductive processes. Apoptosis depends on the coordinated expression of genes regulating divisional cycles and apoptotic pathways so that irreversible nuclear and cytoplasmic elimination occurs. Cellular degradation products are salvaged to sustain adaptation, viability, structural function, and ontogeny. The cell wall is usually retained and further differentiated or eliminated. A model of factors predisposing apoptosis and comprising checkpoints in cell divisional cycles is presented for comparisons among plant and animal cells.     

Apoptosis in oncology

INTroDUCTIONApoptosis, also known as programmed celldeath, is a highly orchestrated form of cell deathin which cells neatly commit suicide by choppingthemselves into membrane-packaged bits. It is critical not ohly to the development but also to thehomeostasis and normal functioning of the adultfor a multiple cellular organism. The malfunctioning of apoptosis during the development willlead to abortion or abnormalities, while failure ofDNA-damaged cells to kill themselves via apoptosismay …     

Caspase蛋白酶与细胞凋亡

自从发现线虫死亡基因ced-3编码产物与哺乳动物白细胞介素-1β-转化酶(ICE)结构、功能上的相似性以来,一系列半胱氨酸蛋白酶基因相继被克隆,并显示出在细胞凋亡执行阶段中的重要功能.激活的ICE/CED-3家族蛋白酶（因其为Asp特异的半胱氨酸蛋白酶,又被称为caspase）能降解细胞中多个底物,进而引发随后的细胞学事件.     

神经酰胺与细胞凋亡

细胞凋亡 (apoptosis) 又称细胞的程序性死亡,参与机体许多生理和病理过程.近年来的研究表明细胞凋亡与鞘脂质代谢有密切的关系,鞘磷脂的水解产物神经酰胺作为脂质第二信使在诱导和抑制细胞凋亡中起着重要的作用.     

细胞凋亡（Apoptosis）与癌基因

细胞凋亡是细胞衰老、死亡过程的主要形式.最近研究发现有多种癌基因与抑癌基因参与细胞凋亡过程.因此目前认为癌基因与抑癌基因不仅控制细胞增殖、分化,而且调节细胞凋亡.细胞凋亡受阻或缺陷可能是肿瘤发生的基础之一.