应用微量免疫荧光法检测IgM抗体对乙脑病人早期诊断

本文报告了用免疫荧光技术检测乙脑病人血清中lgM抗体的方法,用乙脑病毒感染BHK21传代细胞固定后作为间接免疫荧光染色的抗原底物,对60例经常规血清学捡查确诊为乙脑病人的急性期血清进行了检测,其中57例为阳性。同时对26例非乙脑病人及32例健康人血清的检测皆未发现特异性lgM抗体。检测时采用微量法,特异性强,敏感性商,节省试剂,手续简便。     

检测流行性出血热病毒滴度和中和抗体效价的半微量空斑法

建立了检测流行性出血热病毒滴度和中和抗体效价的半微量空斑法。小牛血清与胎牛血清的培养效果无差异。7株不同来源的出血热病毒均能在E6细胞上形成空斑。接种的病毒浓度与形成的空斑数呈直线关系。用空斑法测得的病毒滴度稍低于荧光TCIE50滴定法。空斑减少中和试验的敏感性较荧光中和试验高30倍左右。同时还初步表明了本方法可用于流行性出血热病毒的抗原性分析。     

应用BHK21细胞检测汉坦病毒中和抗体方法的建立

本文报道应用汉坦病毒（HV）Ⅰ型76－118、Chen、J3、J5、J12,和Ⅱ型UR、R22、L99等8株病毒在BHK21细胞上培养和观察,发现病毒感染BHK21细胞后可规律出现病变,且可测出病毒滴度。分别应用BHK21细胞与Vero-E6细胞同时做空斑减少中和试验（PRNT）检测同批血清的抗体中和效价,结果一致,且稳定性特异性好,因此BHK21细胞可作为研究HV的另一个敏感实验细胞系,对研究HV的某些生物学特性及实验方法均有实用价值。     

肾综合征出血热双价纯化疫苗（Vero细胞）病毒株的筛选及其免疫原性研究

选用在Vero细胞上初步适应的LR1（Ⅰ型）、R22（Ⅱ型）株病毒,经乳鼠脑或腹腔接种,收剖感染鼠脑并在Vero细胞传代适应,此收获病毒与直接以Vero细胞传代的病毒比较表明：抗原效价、毒力滴度有明显提高。用LR1、LR22株病毒感染的Vero细胞培养物制备单价粗制疫苗和双价精制纯化疫苗免疫家兔,经空斑减少中和试验检测中和抗体,结果表明经乳鼠和Vero细胞交替传代适应后的LR1、R22株病毒具有良好的抗原性和免疫原性。     

森林脑炎中和抗体蚀斑减少试验方法的建立及疫苗免疫人体后抗体检测

为评价森林脑炎疫苗的免疫效果,采用森林脑炎病毒的BHK细胞适应株,以BHK细胞为培养基质,建立了检测森林脑炎中和抗体的蚀斑减少试验方法,并用蚀斑减少法、小鼠法及ELISA法检测了原制森林脑炎灭活疫苗免疫人体后的中和抗体水平;免疫血清为按疫苗免疫程序免疫健康志愿者采血分离而制备。结果表明蚀斑减少法与小鼠法的特异性相近且敏感性较好、简便快速,缩短检测周期,为疫苗流行病学调查及新型疫苗的研究提供了快速的检测方法;原制灭活疫苗人体二针免疫后,人体血清中和抗体阳转率仅30％左右,急需提高现用原制灭活疫苗的质量。     

我国新分离乙型脑炎病毒株毒力特征研究

将分离自不同年代的17株乙脑毒株在小鼠脑内传代,然后将病毒在BHK21细胞单层上观察不同毒株的空斑形成大小形态,小鼠脑内和皮下途径接种观察病毒的毒力,结果显示不同毒株在BHK21细胞上形成的噬斑大小不尽相同,减毒株形成的噬斑最小。所有毒株对小鼠的脑内毒力都很强,病毒滴度高达lg8.0/mL以上,毒株间无明显差异。毒株对9～11g小日龄小鼠的皮下毒力有一定差异但不明显,但对14～16g较大日龄小鼠则差别明显。PFU/LD50的对数值差异除一株(M47株)为8.44外,其余各株差别在3.94～0.45间。本研究结果证明自然界乙脑毒株存在明显的神经外毒力差异,毒力差异与分离年代和病毒基因型无关,但从人体分离到的毒株毒力表现较强。     

流行性乙型脑炎组织培养中和试验方法研究

1．组织培养中和试验可以先将血清、病毒、维持液混合,然后一次加到细胞瓶中,简化操作,可节省人力、物力。 2．在血清稀释的中和试验中,可使用乙脑P,株鼠脑病毒,合适的病毒稀释度为10～,试验后第5—6日即可判定结果。 3．病毒稀释、血清稀释两种组织培养中和试验方法都可用于测定乙脑抗体,所得到的中和指数与中和效价,在强度上与小鼠脑内法所得到的中和指数是可比的。 4．血清稀释这个组织培养中和效价法,已证明适用于测知乙脑活疫苗免疫豚鼠、马匹、儿童血清中的乙脑中和抗体水平。     

乙型脑炎减毒株活疫苗对预防母猪流产的进一步观察

1．以BHK21 细胞系为基质生产的乙脑14—2株活疫苗,经免疫孕猪后,对母猪本身无任何不良反应,对仔猪亦无不良影响,证明该活疫苗对猪是安全的。 2．乙脑减毒活疫苗免疫猪后,产生乙脑中和抗体显著,阳转率为80—100％。14-2株的抗体阳转率和门何均情均较5—3株高。     

新生牛血清中乙脑抗体的检测及其方法的建立

对新生牛血清中的抗乙型脑炎病毒的抗体进行检测,并且建立一种有效可行的检测方法。以四个厂家共16批新生牛血清用蚀斑减少中和法(PRNT)对其中的乙脑抗体进行了检测。结果显示该方法检测出部分批次的新生牛血清中含有抗乙脑病毒抗体,且乙脑抗体阳性牛血清可将乙脑病毒抗原中和,对蚀斑数有较明显影响。证明作为检测牛血清中乙脑抗体的有效方法,PRNT法具有灵敏度高、重复性好的优点。以上检测说明新生牛血清中存在乙脑抗体,能将乙脑病毒中和。用于乙脑减毒活疫苗生产的新生牛血清除按照《中国生物制品主要原辅材料质控标准》进行质控外,还应进行乙脑抗体的检测。     

逆向溶血斑法检测小鼠睾丸间质细胞睾酮的分泌

用逆向溶血斑法检测单个小鼠睾丸间质细胞睾酮的分泌,为进一步研究单个睾丸间质细胞的结构和功能提供一种有效的途径,结果表明,分泌睾酮的睾丸间质细胞周围形成空斑,空斑面积随睾酮分泌增加而增大,说明只要获得抗体,逆向溶血斑法就可以检测任何细胞的分泌物。