高山红景天细胞悬浮培养中红景天甙生物合成代谢调控Ⅱ:真菌诱导物的影响

考察了6种真菌诱导物对高山红景天(Rhodiola sachalinensis A. Bor)细胞生长与红景天甙积累的影响。其中以黑曲霉诱导物效果最好。在细胞培养初期添加浓度为10mg(carbohydrate)/L的黑曲霉诱导物能使培养细胞中红景天甙含量提高到0.995％。前体与诱导物调控组合运用最终使红景天甙产量达到167.4mg/L,是对照培养的3.5倍。另外,对真菌诱导物的作用机理也进行了探讨,真菌诱导物添加促进红景天甙的积累应该与激活培养细胞中的苯丙烷类代谢途径有关。     

利用高山红景天培养细胞生物转化外源酪醇生产红景天甙的研究

高山红景天（ＲｈｏｄｉｏｌａｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓＡ．Ｂｏｒ．）培养细胞中,甙元酪醇在细胞生长静止期大量积累,而此时糖基化反应的效率很低,因而红景天甙（ｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅ）产量较低。考虑到培养细胞中酪醇葡萄糖基转移酶的活性在指数生长期达到最高,考察了在指数生长期添加外源酪醇生物转化生产红景天甙的可能性,并探讨了酪醇添加浓度、添加方法及细胞密度对酪醇转化率及红景天甙产量的影响。结果表明,细胞在酪醇浓度为１ｍｍｏｌ／Ｌ的培养基中培养２４ｈ后可使酪醇转化率达到９５％;过高的酪醇浓度（＞３ｍｍｏｌ／Ｌ）对细胞生长及酪醇转化率都有明显抑制作用;通过较低浓度酪醇的３次重复添加,可使细胞密度为６ｇＤＷ／Ｌ、１２ｇＤＷ／Ｌ及１８ｇＤＷ／Ｌ的培养物中的红景天甙产量分别达到１３２０ｍｇ／Ｌ、１７４０ｍｇ／Ｌ和１９８０ｍｇ／Ｌ。     

德钦红景天的化学成分

从云南产德钦红景天Ｒｈｏｄｉｏｌａ ａｔｕｎｔｓｕｅｎｓｉｓ（Ｐｒａｅｇ．） Ｆｕ 的根及根茎中首次分离得到８ 个化合物。根据各项光谱数据及化学反应鉴定其中一个新黄酮甙的结构为３ , ５ , ７ , ８ － 四羟基－黄酮４′－ 氧－ α－ Ｌ－ 鼠李糖吡喃甙, 命名为德钦红景天甙（ｒｈｏｄｉｏｌａｔｕｎｔｏｓｉｄｅ, ２） , 另外７ 个已知化合物分别是草质素－ ８ － 甲醚（ｈｅｒｂａｃｅｔｉｎ － ８ － ｍｅｔｈｙｌｅｔｈｅｒ,１） , 槲皮素（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ,３） , 芦丁（ｒｕｔｉｎ,４） , 酪醇（ｔｙｒｏｓｏｌ,５） , 红景天甙（ｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅ,６） , 没食子酸（ｇａｌｌｉｃ ａｃｉｄ,７） 和β－谷甾醇（ － ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ,８） 。     

高山红景天细胞悬浮培养中pH值对红景天甙胞外释放及细胞活性…

高山红景天细胞悬浮培养中,通过降低培养基ＰＨ值能有效地诱导培养细胞中红景天甙的胞外释放。红景天甙的跨膜运输是一个有与Ｈ对运的动态过程,培养基ＰＨ值决定了红景天甙在胞内外含量的分布。细胞组织在ＰＨ值大于３的培养基中处理３ｈ以内,对细胞活性的影响不大。将诱导释放处理过的细胞转入到新鲜的生产培养基中,细胞仍具有合成红景天甙的能力。     

高山红景天细胞悬浮培养中pH值对红景天甙胞外释放及细胞活性的影响

高山红景天(Rhodiola sachalinensis A.Bor.)细胞悬浮培养中,通过降低培养基pH值能有效地诱导培养细胞中红景天甙的胞外释放。红景天甙的跨膜运输是一个与H~ 对运的动态过程,培养基pH值决定了红景天甙在胞内外含量的分布。细胞组织在pH值大于3的培养基中处理3h以内,对细胞活性的影响不大。将诱导释放处理过的细胞组织转入到新鲜的生产培养基中,细胞仍具有合成红景天甙的能力。     

影响高山红景天细胞悬浮培养中细胞生长和红景天苷积累的几个…

高山红景天细胞悬浮培养过程中３ｍｇ·Ｌ＾－１６－ＢＡ,０．３ｍｇ·Ｌ＾－１ＮＡＡ,６０ｍｍｏｌ·Ｌ＾－１氮源、０．５￣１．２５ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＫＨ２ＰＯ４和２０ｍｇ·Ｌ＾－１蛋白胨,较适合于细胞生长和红景天苷的积累。在适宜的接种量下细胞培养２４ｄ后,生物量达１４．０４ｇ·Ｌ＾－１,干细胞中红景天苷含量为５．６６ｍｇ·ｇ＾－１。     

真菌诱导子对悬浮培养西洋参细胞的生理效应

报道了不同真菌诱导子对悬浮培养的西洋参（Ｐａｎａｘｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ）细胞生长、皂甙和多糖合成,以及细胞内和培养液中过氧化物酶活性的生理效应。悬浮培养的西洋参细胞经刺盘孢菌（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｎｉｃｏｌｔｉａｎａｅ）丝体诱导子处理后,总皂甙产率可由对照的２９６ｍｇ／Ｌ增加到６７９ｍｇ／Ｌ（约占细胞干重的（１６．３％）,比对照提高约１．３倍,而且总皂甙的８５％排放在培养液中;经黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｒａｎ）诱导子处理后,细胞多糖含量可达到１１．７９％（细胞干重）,比对照增加１倍多。初步纯化的刺盘孢菌丝体诱导子和尖孢镰刀菌（Ｆｕｓｕｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）滤液诱导子在诱导处理前期能明显促进西洋参细胞生长,同时细胞内及培养液中过氧化物酶活性显著增加;随时间延长,细胞生长和酶活性逐步受到抑制。     

红景天的育苗技术

红景天的育苗技术秦佳梅,张卫东（通化市园艺研究所１３４００１）红景天（ＲｈｏｄｉｏｌａｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓＡ．Ｂｏｒ．）种子细小,数量繁多,千粒重为０．１４～０．１５克,是扩大繁殖的主要材料。但种子自然发芽率较低（１０％左右）,发芽势不整齐,于...     

高山红景天生长规律观察

高山红景天生长规律观察张卫东,秦佳梅,张增江（通化市园艺研究所,通化１３４００１）高山红景天（ＲｈｄｉｏｌａｓａｃｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓＡ;Ｂｏｒ。）为景天科红景天属多年生草本植物。是目前较人参、刺五加更为理想的滋补强身药。因资源贮量小,目前正大面积...     

保健食品中红景天甙含量测定及其稳定性研究

测定保健食品中红景天甙的含量以控制产品质量。采用十八烷基硅烷键合硅胶柱;以乙腈-水（1：9）为流动相,流速为1.0mL／min,检测波长为280nm。结果表明红景天甙在0．4—4．0μg范围内呈线性关系,平均回收率（n=6）为98．96％（RSD=1.16％）。该方法简便、准确、重现性好,可用于保健食品中红景天甙的质量控制。     

大海林地区不同生境高山红景天根部红景天甙含量的差异

在黑龙江省大海林地区海拔１４００－１６２０ｍ的高山上,依据高山红景天的生境于岳桦林内、高山草甸、苔原上选择了６个样地,测定了高山红景天根部的红景天甙含量。生境不同的高山红景天,根部红景天甙的含量有明显差异,红景天甙含量范围内０．１０１％－０．６８４％。从测定结果看,光照条件好、土壤肥沃的生境下高山红景天根部的红景天甙含量较高。     

利用FRET技术在活细胞内研究红景天甙对Aβ25-35诱导PCI2细胞凋亡的抑制作用

为研究红景天甙（salidroside）对β淀粉样肽25-35（β amyloid peptide25-35,Aβ25-35）诱导PC12细胞凋亡的抑制作用,采用Cell Counting Kit-8（CCK-8）分析细胞的存活率,通过光镜检测细胞形态并配以Hoechst染色检测细胞核固缩,利用荧光共振能量转移（fluorescence resonance energy transfer,FRET）技术在单个活细胞中检测caspase-3和caspase-8活性的动态变化。结果表明,红景天甙可剂量依赖性抑制Aβ25-35引起的细胞凋亡,提高细胞的存活率;红景天甙对caspase-3的活性有明显的抑制作用,而且Aβ25-35诱导细胞凋亡不依赖于caspase-8的激活。这些结果提示抑制caspase-3的活性是红景天甙抑制Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡的机制之一。     

高山红景天细胞悬浮培养中红景天甙生物合成代谢的调控：Ⅰ …

探索了高山红景天细胞培养中红景天甙生物合成的途径,认为甙元酪醇是红由莽草酸途径的。在此基础上研究了酪醇,Ｌ－酪氨酸与Ｌ－苯丙氨酸三种前体加入对就天甙生物合成的调控作用。结果表明,酪醇,酪氨酸等前体易被酚氧化成褐色,用与前体浓度为１：１的ＶＣ来防止褐化效果显著;     

高效液相色谱法测定红景天根中红景天甙的含量

建立了一种高效液相色谱法测定红景天根中红景天甙的含量。色谱柱为Hypersil—C18（5μm,150mm×4．6mm）,甲醇-水为流动相,梯度洗脱,柱温25℃,在250nm波长处检测。研究结果表明：红景天甙的检测限为50μg/L,线性范围为4—40mg／L,回归方程为Y=5．6348X-4．0931,r=0．9996,加样回收率为98．05％。方法操作简便、快速、准确。     

温室栽培光强和光质对高山红景天生物量和红景天甙含量的影响

为探讨光强及光质对高山红景天(Rhodiola sachalinensis)生物量和红景天甙含量的影响。于2000年4月至6月在东北林业大学温室内以移栽于大兴安岭加格达奇圃地人工种植生长3a的高山红景天为材料,通过纱布遮荫及遮以不同颜色的滤光膜分别进行了光强、光质控制实验(处理45d)。随着光强的降低,高山红景天全株生物量、根生物量、根的红景天甙含量和产量以及叶中叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素的含量均有降低的趋势,但叶绿素含量变化很小,不同光强及对照之间的差异均未达到显著水平。相对光强为67．75％和44．71％的两种处理下的全株生物量、根生物量、根的红景天甙含量和产量差异不显著,它们的全株生物量和红景天甙含量与对照(全光照)的差异也不显著,但根生物量和红景天甙产量与对照的差异显著。当相对光强减弱至31．96％,全株生物量、根生物量、根的红景天甙含量和产量均大幅度下降,根冠比显著增加。4种滤光膜处理均使高山红景天的全株生物量及根生物量显著降低,蓝膜和绿膜处理的降低幅度大于红膜和黄膜处理的。红膜处理的红景天甙的含量和产量均高于对照,但黄膜、蓝膜和绿膜处理的红景天甙含量和产量则低于对照。通过计算去除4种滤光膜的光强因素,仅从光质的作用看。4种滤光膜处理仍是减小了全株生物量和根生物量,红膜和绿膜处理提高了红景天甙的含量和产量,而黄膜处理降低了红景天甙的含量和产量,蓝膜处理几乎没有效果。4种滤光膜处理均使叶绿素含量增加,但只有蓝膜处理的与对照差异显著。红膜处理不仅显著提高根中红景天甙的含量(为对照的3．42倍),而且对根生物量的影响较小(为对照的90．24％)。因而提高了高山红景天根的红景天甙产量,这意味着在生产上可能会有一定的实践意义。     

狭叶红景天愈伤组织中红景天甙含量及相关代谢酶活力的研究

室温下分别对狭叶红景天的茎和叶进行愈伤组织诱导,在24C和4C进行继代培养,测定其苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸-4羟化酶和酪氨酸解氨酶的活性,并利用高效液相色谱法测定其红景天甙含量。结果表明：培养温度和愈伤组织的外植体来源均影响红景天甙的含量和3种代谢酶的酶活力;在24C和4C温度条件下,相同外植体来源的愈伤组织叶中和相同培养温度条件下的茎和叶2种不同来源外植体的愈伤组织中,红景天甙含量和3种代谢酶活力之间均存在显著性差异。     

光强和光质对野外栽培高山红景天生物量和红景天甙含量的影响

为探讨野外条件下光强及光质对高山红景天 (Rhodiola sachalinensis)生物量和红景天甙含量的影响 ,于 2 0 0 1年 5月 8日至 9月 16日在大兴安岭加格达奇的高山红景天种植圃地 ,利用纱布及红色、蓝色和绿色的滤光膜遮光处理 ,对生长 3a和 4 a的高山红景天进行了光强、光质控制实验。与温室实验类似 ,遮荫显著抑制高山红景天根的生长 ,并使红景天甙的含量略有提高。红膜处理使光强大约降低一半 ,但仅从光质的角度而言 ,红膜处理对根的生长影响不大 ,却显著增加了根中的红景天甙含量和产量 ,不过效果不如温室实验明显。绿膜处理未表现出对红景天甙积累的促进作用 ,这与温室实验结果不同。红膜处理不同天数的结果表明 ,处理时间对红景天甙含量提高的程度影响很小。这意味着在野外种植的情况下 ,可以在临近收获的最后一段时间用红膜对高山红景天进行处理 ,这样既可避免红膜处理对高山红景天根生长的抑制 (由于减弱了光照 ) ,又可显著提高根的红景天甙含量 ,从而达到大幅度提高红景天甙产量的目的。     

高山红景天年龄与根部红景天甙含量的关系

对1998年8月和1999年7月采自吉林省长白山自然保护区内共14个天然居群和人工栽培于黑龙江省大兴安岭的高山红景天的年龄和根部红景天甙含量的关系进行了研究。高山红景天的年龄根据其根茎上芽磷痕的数量判断。结果表明,人工栽培的高山红景天的年龄与其根部红景天甙的含量呈显著正相关,而长白山自然保护区内自然生境下的高山红景天,其根部的红景天甙含量与年龄的正相关性则较弱。     

红景天叶片诱导再生植株

红景天片接种在ＭＳ培养基上,诱导形成愈伤组织,再稳定在ＭＳ附加６－ＢＡ２ｍｇ／１＋ＩＡＡ０．２５ｍｇ／ｌ的培养基上产生大量丛生芽,丛生芽培养于Ｂ５附加ＩＡＡ０．５ｍｇ／ｌ的培养基上可导生根形成完整植株。     

帕里红景天的化学成分研究

从帕里红景天根茎的石油醚和乙醇提取部分共分得１４种结晶性化合物,经光谱分析和化学反应,分别鉴定为二十二醇、二十六酸、十九醇、β－谷甾醇、二十九醇、红景天甙、麦芽糖、棉皮素－８－葡萄糖甙、胡萝卜甙、酪醇、咖啡酸、没食子酸、形花内酯和新化合物帕里甙。