耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌OXA基因检测及同源性分析

目的 了解台州地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、碳青霉烯酶基因型以及同源性.方法 63株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌经VITEK2 Compact进行细菌鉴定及药敏分析,用K-B法复核药敏结果,采用多重PCR扩增分析碳青霉烯酶的基因型;采用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分析其同源性.结果 63株菌株为多重耐药菌株,除多粘菌素、阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦外,对其他常用抗生素的耐药率均在70％以上.63株菌株检测出OXA-51基因60株(95.2％),OXA-23基因58株(92.1％),两个基因同时存在的有58株(92.1％).PFGE结果显示碳青霉烯类鲍曼不动杆菌主要分为5个克隆型,其中A、B两个为主型.结论 产OXA酶是台州地区耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的主要耐药机制之一,其中OXA-23是主要的基因型.     

鲍曼不动杆菌耐药性监测与碳青霉烯酶基因型研究

目的：对鲍曼不动杆菌耐药性及碳青霉烯酶基因型进行研究,以指导临床合理应用抗生素。方法：收集青岛市海慈医疗集团2009年6月至2010年6月从临床分离的鲍曼不动杆菌60株,用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度（M IC）,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,用PCR法检测OXA-23,OXA-24,OXA-58基因,并对PCR产物进行测序。结果：①鲍曼不动杆菌检出率前两位是ICU病房和呼吸科病房,分别占32.3%和27.4%,多重耐药鲍曼不杆菌阳性率最高的是ICU,为70.6%（12/17）,其次为呼吸科病房,为35.0%（7/20）,哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、庆大霉索、阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南耐药率分别为92.3%、55.4%、88.6%、86.3%、80.3%、30.0%、35.0%、76.6%、79.6%、75.1%、87.1%、48.3%、42.0%和79.6%.②在21株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌,有14株碳青霉烯酶表型阳性,检出率为66.7%,有18株PCR扩增出OXA-23基因,检出率85.7%,全部菌株blaOXA-24及blaOXA-58PCR扩增均为阴性,PCR产物测序表明与鲍曼不动杆菌（AY795964.1）blaOXA-23基因序列100%同源。结论：鲍曼不动杆菌多重耐药性严重;表型和基因型检测证实本院临床分离鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药机制主要是产OXA-23型酶。     

鲍曼不动杆菌耐药性监测与碳青霉烯酶基因型研究

目的:对鲍曼不动杆菌耐药性及碳青霉烯酶基因型进行研究,以指导临床合理应用抗生素。方法:收集青岛市海慈医疗集团2009年6月至2010年6月从临床分离的鲍曼不动杆菌60株,用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(M IC),改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,用PCR法检测OXA-23,OXA-24,OXA-58基因,并对PCR产物进行测序。结果:①鲍曼不动杆菌检出率前两位是ICU病房和呼吸科病房,分别占32.3%和27.4%,多重耐药鲍曼不杆菌阳性率最高的是ICU,为70.6%(12/17),其次为呼吸科病房,为35.0%(7/20),哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、庆大霉索、阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南耐药率分别为92.3%、55.4%、88.6%、86.3%、80.3%、30.0%、35.0%、76.6%、79.6%、75.1%、87.1%、48.3%、42.0%和79.6%.②在21株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌,有14株碳青霉烯酶表型阳性,检出率为66.7%,有18株PCR扩增出OXA-23基因,检出率85.7%,全部菌株blaOXA-24及blaOXA-58PCR扩增均为阴性,PCR产物测序表明与鲍曼不动杆菌(AY795964.1)blaOXA-23基因序列100%同源。结论:鲍曼不动杆菌多重耐药性严重;表型和基因型检测证实本院临床分离鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药机制主要是产OXA-23型酶。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌医院内感染流行的分子机制研究

目的研究耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的耐药谱特征及其医院内感染流行和耐药性产生的分子机制,为临床防治提供依据.方法4株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌分离自2002年10月至2003年1月外科重症监护病房的感染患者,采用纸片扩散法及E-test进行药物敏感性检测及MIC值测定,肠杆菌科基因组内重复一致序列聚集合酶链反应(ERIC-PCR)进行克隆株的DNA分型,耐药质粒转移及消除试验、等电聚焦电泳、PCR扩增β-内酰胺酶基因及其克隆测序以识别其耐药基因和进行质粒定位.结果4株菌除对头孢哌酮/舒巴坦复合制剂的MIC值较低外,对头孢菌素类、氨基糖甙类和氟喹喏酮类等抗生素均显示出了较高水平的多重耐药性;DNA分型证实为同一克隆株;产OXA-23型碳青霉烯酶和PER-1型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs);OXA-23定位在质粒上,PER-1定位在染色体上.结论本组耐亚胺培南鲍曼不动杆菌为多重耐药株,同一克隆株在不同感染个体间的相互传播导致了本次医院内感染的流行,产OXA-23和PER-1型β-内酰胺酶是其耐药性产生的重要原因.     

306株鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性监测

目的调查杭州市某医院鲍曼不动杆菌感染的临床分布及其耐药性现状。方法监测该院2004年1月至2006年12月临床分离的306株鲍曼不动杆菌的临床感染分布及耐药性,药物敏感试验采用琼脂纸片扩散法,耐药性数据分析采用WHONET 5软件。结果2004年至2006年3年间,鲍曼不动杆菌的检出率呈逐年增加趋势(从1.60%增至2.40%);临床分布以重症监护室(ICU)最高(84/306),老年患者多见(131/306);有184株(60.13%)来源于痰液标本。药敏试验结果显示鲍曼不动杆菌对美罗培南最敏感,耐药率为4.6%;其次是亚胺培南/西司他丁和头孢哌酮/舒巴坦,耐药率分别为7.2%及8.5%;对3代头孢菌素及环丙沙星的耐药率均>50.0%;同时发现185株(60.5%)为多重耐药菌株。结论鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素及头孢哌酮/舒巴坦较敏感,临床医师应注意合理使用抗菌药物,以减少多重耐药菌株的产生。     

鲍曼不动杆菌感染的分布特点及药敏分析

目的了解鲍曼不动杆菌感染分布情况及对20种抗生素耐药性分析。方法送检标本按照《全国临床检验操作规程》（第2版）微生物方法操作,用Vitek—Systems ATB法国生物,梅里埃微生物分析仪,并结合传统手工非发酵微量生化管编码补充试验进行菌种鉴定;药敏试验采用K—B琼脂纸片扩散法及法国梅里埃ATB试条。结果112株鲍曼不动杆菌中有93株（83％）来自于上呼吸道（痰液及咽拭子）：药敏结果显示鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类（阿米卡星、庆大霉索）,喹诺酮类（环丙沙星）,碳青酶烯类（亚胺培南）具有较高的敏感率。对β-呐酰胺类抗生素有较高的耐药性,在检测的112株鲍曼不动杆菌中,多重耐药菌株占54．5％（61／112）,三重耐药株占14．8％,而在这些多重耐药菌株中,大于三重耐药的菌株就占到69％。结论鲍曼不动杆菌对抗菌药物已产生多重耐药性,应重视该菌感染及耐药性监测,阻止多重耐药菌株的播散,预防医院感染的发生。     

危重病房耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌同源性研究

目的探讨杭州市第一医院危重病房耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌之间的同源性,进行分子流行病学调查,旨在为制定预防和控制其院内感染的措施提供依据。方法收集该院危重病房2005年1月至12月分离到的34株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌。采用全自动微生物分析系统VITEK-AMS60对34株耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌进行鉴定及药敏;用琼脂稀释法和E-test法测定14种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),脉冲场凝胶电泳(PF-GE)分析其耐药株的同源性,对碳青霉烯类基因OXA-23型、OXA-24型、IMP型、VIM型基因进行PCR扩增及序列分析。结果PFGE发现34株鲍曼不动杆菌菌株为同一耐药克隆株,在危重病房呈爆发流行。所有对亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌明确产OXA-23型碳青霉烯酶,未检出OXA-24、IMP、VIM基因型。34株菌株质粒提取未成功。结论该院同一个耐药克隆株在危重病房不同患者身上流行,可能与行气管插管、呼吸机、氧气湿化瓶、护士手操作有关。     

鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性分析

目的了解鲍曼不动杆菌的耐药情况,并检测耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的耐药基因,为指导临床合理用药、控制院内感染提供依据。方法利用K-B法检测45株鲍曼不动杆菌临床分离株的耐药情况,通过改良Hodge试验、Carba NP试验和EDTA协同试验对多重耐药鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶进行表型检测,并采用PCR技术检测鲍曼不动杆菌携带OXA-23和NDM-1型耐药基因的情况。结果 45株鲍曼不动杆菌临床分离株中共筛出42株多重耐药菌株;利用改良Hodge试验和Carba NP试验检出36株碳青霉烯酶阳性菌株;采用PCR扩增出OXA-23,未扩增出NDM-1。结论鲍曼不动杆菌耐药情况严重,且耐药基因OXA-23携带率高,治疗时应根据药敏试验结果合理用药。     

重症监护室耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的耐药性分析

目的探讨温州医学院附属第一医院重症监护室（ICU）耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的耐药特性。方法对2006年1月至2007年12月ICU分离的菌株采用常规方法进行菌株分离,经革兰染色、氧化酶试验等初筛,再经VITEK-32型全自动微生物分析仪进行菌株鉴定和药敏试验。结果共检测到98株鲍曼不动杆菌,其中耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌为50株（占51.0%）,标本来源大部分为痰液（占94.9%）。耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对常用16种抗菌药物耐药率〉50%的有15种,耐药率〉90%有3种,分别为氨苄西林（98.0%）、头孢唑林（99.0%）和呋喃妥因（99.0%）,对抗菌药物耐药率最低仅为头孢哌酮/舒巴坦（10.2%）,另外检测到对所用抗菌素泛耐为4株（8.0%）;而对亚胺培南敏感的鲍曼不动杆菌对常用16种抗菌药物耐药率〉50%的仅为4种,耐药率〉90%同样为氨苄西林（100%）、头孢唑林（97.9%）和呋喃妥因（97.9%）,耐药率比较低的为美罗培南（10.4%）、妥布霉素（16.7%）和环丙沙星（16.7%）,耐药率最低也为头孢哌酮/舒巴坦（6.3%）。结论 ICU分离耐亚胺培南鲍曼不动杆菌多重耐药性严重,出现了泛耐菌株;临床可根据药敏试验选用抗菌药物,一般条件下耐亚胺培南鲍曼不动杆菌建议选用头孢哌酮／舒巴坦。     

多重耐药鲍曼不动杆菌氨基糖苷类修饰酶与16S rRNA甲基化酶基因的研究

了解氨基糖苷类修饰酶、16S rRNA甲基化酶基因在多重耐药鲍曼不动杆菌中的流行情况。收集2014年12月至2015年3月厦门大学附属成功医院住院患者临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌共28株,采用VIKET Compact 2全自动细菌鉴定系统进行细菌鉴定,应用纸片扩散法(K-B法)检测鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药性,采用聚合酶链反应(PCR)法检测氨基糖苷类修饰酶、16S rRNA甲基化酶基因。结果显示,多重耐药鲍曼不动杆菌除对头孢哌酮/舒巴坦耐药率为21.4%外,对其他所测药物耐药率均50%,本组28株多重耐药鲍曼不动杆菌共检出5种氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6')-Ⅰb、ant(3")-Ⅰ、aph(3')-Ⅰ和1种16S rRNA甲基化酶基因arm A,阳性率分别为85.7%(24株)、7.14%(2株)、67.8%(19株)、92.9%(26株)、53.6%(15株)和82.1%(23株)。氨基糖苷类修饰酶、16S rRNA甲基化酶耐药基因是多重耐药鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类耐药的重要原因。     

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的临床分布及基因组流行病学分析

【背景】鲍曼不动杆菌是造成临床感染的重要病原菌之一,其对碳青霉烯类抗生素的耐药形势日益严重,利用基因组测序技术解析其临床分布特征和流行病学规律有助于临床感染的有效防治。【目的】研究沧州市中心医院2018年检出的200株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)的临床分布和基因组流行病学特征,以期为预防院内感染及抗感染治疗提供理论依据。【方法】选取2018年各临床科室的耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌,采用细菌鉴定及药敏分析仪对16种抗生素进行药敏试验;PCR扩增检测碳青霉烯酶基因;多位点序列分型技术(multilocus sequence typing,MLST)检测菌株序列型;基因组流行病学分析揭示菌株传播关系。【结果】本院CRAB主要分布在急诊重症加强护理病房(intensive care unit,ICU)(47.0%)、呼吸内科(19.5%)和重症医学科(12.0%),它们对亚胺培南、美罗培南、氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星、庆大霉素、左旋氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林/棒酸、阿米卡星及第三四代头孢类抗...     

1939株革兰阴性杆菌的耐药监测分析

目的 了解广州华侨医院2007年至2009年分离的1 939株革兰阴性杆菌的耐药状况,为临床合理使用抗生素提供依据.方法 利用梅里埃VITEK-2 Compact微生物分析仪鉴定细菌,K-B法进行药敏试验,采用WHONET 5.4 软件统计分析药敏结果.结果 2007年至2009年分离出的革兰阴性杆菌1 939株,居前...     

鲍曼不动杆菌的耐药情况及碳青霉烯酶基因检测

了解佳木斯大学附属第一医院鲍曼不动杆菌耐药性及碳青霉烯酶包括苯唑西林酶和金属酶相关耐药基因分布情况,为临床抗菌药物的合理选择提供依据。2013年9月至2014年12月使用VITEK-II全自动微生物鉴定/药敏测试系统筛选出佳木斯大学附属第一医院临床标本鲍曼不动杆菌69株;采用多重PCR方法检测鲍曼不动杆菌携带的碳青霉烯酶相关耐药基因16SrRNA、OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、IMP、VIM、SIM,并对耐药基因扩增的阳性产物进行DNA 序列分析。69株AB对亚胺培南、美洛培南的耐药率分别为36.2%、37.68%,对其他抗菌药物的耐药率均高于50%。6种耐药基因的检测结果为69株(100%)携带OXA-51基因,32株(46.4%)携带OXA-23基因,17株(24.6%)携带OXA-24基因,5株(7.2%)携带OXA 58基因,1株（1.4%）携带IMP基因。25株碳青霉烯类药物耐药鲍曼不动杆菌中,22株(88%) 携带OXA-23,1株(4%)携带OXA-58,10株(40%)携带OXA-24,6株（24%）同时携带OXA-23、OXA-24。 DNA序列分析结果显示：OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58分别与NCBI的序列同源性均为99%。产OXA-23型碳青霉烯酶可能是佳木斯大学附属第一医院鲍曼不动杆菌对碳青霉烯酶类抗菌药物耐药的主要原因,另外佳木斯大学附属第一医院存在OXA-24型耐药基因鲍曼不动杆菌的区域性流行。     

The role of bla(OXA-like carbapenemase) and their insertion sequences (ISS) in the induction of resistance against carbapenem antibiotics among Acinetobacter baumannii isolates in Tehran hospitals

This study aimed to evaluate the occurrence and dissemination of bla(OXA-like) carbapenemase genes and their insertion sequences among Acinetobacter baumannii isolates, taken from different hospitals in Tehran city and also their roles in the induction of resistance to carbapenem drugs. A total number of 100 non duplicate Acinetobacter baumannii with different origins, were isolated from patients with proved nosocomial infections at eight university hospital in Tehran city. Antimicrobial susceptibility of these strains was done by E-test against 7 antimicrobial agents according to CLSI guideline. PCR of bla(OXA-51-like), bla(OXA-23-like), bla(OXA-24-like), bla(OXA-58-like), IS(ABA-1), IS(1133) was carried out by specialized primers and then these strains were typed by REP-fingerprinting. Colistin, imipenem and meropenem were the most sensitive antibiotics against Acinetobacter baumannii isolates with 96%, 51% and 51% sensitivity respectively. All the isolates had a bla(OXA-51-like) intrinsic to these species. The rates of bla(OXA-23), 23 and 58-like were 38%, 32% and 1% respectively. Coexistence of bla(OXA-51/23/24-like) was observed among 16% of these isolates. All bla(OXA-23-like) carbapenemase genes had only one IS(ABA1). REP fingerprinting showed 5 genotypes among carbapenem resistant isolates, 16 of them being genotype A. This study emphasized on the major role of bla(OXA-like) carbapenemase, particularly bla(OXA-23-like) carbapenemase and their IS(ABA1), in the dissemination of carbapenem resistant Acinetobacter baumannii. This study confirmed a presumptive role of IS element neighboring the carbapenemase gene in the elevation of resistance to carbapenem drug among Acinetobacter baumannii isolates for the first time in Iran.     

Distribution of blaOXA genes among carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii nosocomial strains in Poland

Acinetobacter baumannii is an important nosocomial pathogen occurring particularly in intensive care (ICU) as well as burn therapy units (BTU). A. baumannii strains have emerged as resistant to almost all antimicrobial agents, including carbapenems. b-lactamase-mediated resistance is the most common mechanism for carbapenem resistance in this species. Carbapenem-hydrolysing class D b-lactamases - OXA are widespread among A. baumannii strains. It is suggested that ISAba1 plays an important role in drug resistance. The aims of the study were detection of OXA encoding genes and presence of ISAba1. The study included the total of 104 isolates of carbapenem-resistant A. baumannii, obtained from patients hospitalized in ICU and BTU of Specialized Hospital in Krakow. Multiplex PCR was applied for detection of selected OXA carbapenemases encoding genes. PCR analysis showed the presence of bla OXA-51-like gene and ISAba1 in all isolates. 46 strains carried bla OXA-51-like and bla OXA-23-like genes while 48 bla OXA-51-like and bla OXA-40-like genes. 3 isolates carried: bla OXA-51-like , bla OXA-23-like and bla OXA-40-like genes. 7 strains encoded an OXA-51-like carbapenemase but were negative for enzymes belonging to the other families tested. Comparative analysis of ICU and BTU isolates revealed the dominance of: bla OXA-51-like and bla OXA-40-like among ICU while bla OXA-51-like and bla OXA-23-like in BTU.     

鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性及其基因的分析

目的研究23株鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药情况及对耐药基因分析,为临床用药提供依据。方法用珠海迪尔DL-96鉴定系统进行细菌鉴定及K-B法进行药敏试验,用碳青霉烯酶4种基因的特异性引物对其进行聚合酶链反应(PCR)扩增和基因型分析,并通过网上GenBank进行比对以确定编码酶基因的类型。结果 23株鲍曼不动杆菌对哌拉西林/他唑巴坦、左旋氧氟沙星、丁胺卡那霉素、多黏菌素B的耐药率分别为80%、45%、30%、10%,对其他抗生素的耐药率均在90%以上。携带D类碳青霉烯酶OXA-23基因有18株(78%),携带OXA-51基因有15株(65%),OXA-24、OXA-58基因引物PCR扩增为阴性,随机各抽取3株OXA-23基因阳性株进行测序后通过在网上GenBank比对与OXA-23标准株99%同源,OXA-51基因阳性株与OXA-51标准株98%同源。结论耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌对多黏菌素的耐药率最低,其次是丁胺卡那霉素,其中以携带OXA-23型碳青霉烯酶基因为主,应引起临床高度关注,防止在院内广泛传播。     

嗜麦芽寡养单胞菌临床分布特征与耐药分析

目的了解湖州市中心医院嗜麦芽寡养单胞菌临床分布特征与耐药性。方法采用常规方法分离,用VITE-COMPACT2全自动微生物分析仪进行菌种鉴定,用K—B法进行药敏试验。结果分离到嗜麦芽寡养单胞菌810株,复方新诺明耐药菌株48株（分离率5．9％）。标本来源主要来自ICU室,其次呼吸科,大部分来自痰液标本（约占89．2％）,年龄段以中老年人比率最高。嗜麦芽寡养单胞菌对亚胺培南、美罗培南、头孢吡肟、哌拉西彬他坐巴坦、庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星高度耐药;头孢他啶、替卡西林／克拉维酸、环丙沙星耐药率为33．7％～58．2％;头孢哌酮／舒巴坦、左氧氟沙星、米诺环素、复方新诺明耐药率低于30．0％。复方新诺明耐药菌株对头孢哌酮／舒巴坦、左氧氟沙星和米诺环素耐药率分别为60．4％、91．7％和2．0％,对其余抗菌药物耐药率达100．0％。复方新诺明耐药菌株与复方新诺明敏感菌株相比,耐药情况更严重,其中对三、四代头孢菌素、喹诺酮类耐药率显著高于复方新诺明敏感菌株（P〈0．01）;对碳青霉烯类、青霉素类、氨基糖苷类抗菌药物耐药率与复方新诺明敏感菌株相比,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论嗜麦芽寡养单胞菌呈高度耐药,对头孢哌酮／舒巴坦、左氧氟沙星、米诺环素、复方新诺明尚敏感,但对复方新诺明耐药的嗜麦芽寡养单胞菌耐药现象更严重。应重视嗜麦芽寡养单胞菌引起的院内感染,尽量减少不必要的侵人性操作,加强抗菌药物的合理规范使用。