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《生物技术通报》1992,(8)
922949在特定杆状病毒表达系统中生产具生物学活性的跳胺化eeeropin〔英〕/Andersons,H.…2 Bioe-liem.J一1091,250,Pt.1一219~224〔译自DB-A,1992,11(3),92一01388〕 构建了表达质粒pVL941一22一ceoA,其中含有:组织血纤维蛋白溶酶原激活子(t一PA)的信号肤、从金黄色葡萄球菌蛋白一A(22)衍生的合成性抗体结合部分、编码cecropin一A天然部分的合成片段(附加C末端甘氨酸密码子)。将此融合基因转入首着银纹夜蛾核多角体病毒载体基因组,再用重组病毒感染草地贪夜蛾Sfg细胞。对从细胞培养基获取的蛋白进行SDS一PAGE和blotting检测。采… 相似文献
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《生物技术通报》1988,(3)
881180感染性重组病毒,含有所述猫白血病病毒疫苗及其生产方法〔专,英〕/Nunbe-rg,J .H.…1 European Patent Appl.EP 0216564.Pub.01 .04 .87.Appl.US.774040,filed 09.09.86〔译自CBA,1957, (6),2576〕 含有一个嵌合猫白血病病毒(FeLV)外壳基因的感染性重组病毒可用作猫白血病疫苗。用病毒DNA和一个插人性载体转染易感的哺乳动物细胞来制备病毒。该载体带有由在细胞内具活性的启动子、翻译起始密码子和为FeLV病毒外壳蛋白编码的一个DNA片段组成的嵌合基因。编码蛋白的DNA受控干启动子。用这种感染性重组病毒和一个衍生载体或… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(3)
920944生产规模培养昆虫细胞〔英万Agathos,5.N.…了B ioteehnol.Ady一1901,9(i)一51一58〔译自DBA,1991,10(15),91一08839〕 文章讨论了以下内容:昆虫细胞培养在生物技术中的应用;昆虫细胞培养的生物加工开发状况,培养基开发;用于昆虫细胞培养的培养器构建及发展方向。昆虫培养是药物和农药有效生产的良好寄主,适合于大规模技术,以满足(A)昆虫病毒生防因子和(B)对人及动物有医疗价值的重组蛋白的有计划生产的需要。其间最重要的系统是用杆状病毒载体转染的鳞翅目昆虫细胞。双翅目品系也具有发展前途(如黄猩猩果蝇、Aedes azbo尹￡e乙。… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(12)
.,J一,J沪.J”‘舌尹.刁7.’试J、~宁.护理J.合忠‘J产奋「下,924392用杆状病毒表达载体生产分离的异型户半乳箱普酶多肚仁英〕/Lieari,P.…/Biotechnol.B ioeng一1092,39(9)一932~944〔译自DBA,1992,11(11),92一06397〕 在草地夜蛾连续细胞系IPL一Sfg中表达首藉银纹夜蛾核多角体病毒(AcMNPV),生产分离的异型户半乳糖普酶蛋白。在pol了hedrin启动子调控下,重组AeMNPV编码 polyhedrin一BG的融合蛋白。该启动子由转移载体质粒pAo36。和设计的360-lac构建。病毒侵染细胞后培养96小时,培养物经BG免疫沉淀放射自显影显示,有几条比B… 相似文献
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辽宁省农科院大连生物技术研究所张春发等人利用柞蚕核型多角体病毒(ApNpV)组建成转移载体,并以此载体携带外源基因(人白细胞介素-4、DE糖蛋白)在草地贪夜蛾Sf9昆虫细胞、柞蚕卵巢细胞以及柞蚕蛹活体中表达成功。实验表明,表达产物的确以非融合蛋白形式出现,从而建立了柞蚕NpV载体—柞蚕蛹活体宿主表达系统。这是继菌苜蓿纹夜蛾核多角体病毒(AcNpV)—Sf9细胞载体表达系统和家蚕核多角体病毒(BmNpV)——家蚕幼虫载体表达系统以后又一个昆虫杆状病毒载体达表系统。由于该系统是利用柞蚕蛹活体为宿主 相似文献
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《生物技术通报》1989,(3)
890690制备棒状病毒表达载体的方法〔专,英〕/Smith,G.E.…/US Patent US4745051.Pub。17.05.88.ApPI.US498s5a,filed 27.05.83〔译自CBA,1955, (8),3152〕 酶切棒状病毒DNA,产生一个含多角体蛋白启动子以及充足的两翼序列(以利于同源重组)的棒状DNA。将此片段插人到一种克隆载体中,并将一外源基因置子该启动子的下游,形成重组穿梭载体。(主璋瑜)890691链霉菌分泌载体仁专,英〕/USPatent US 4745056,.Pob.17.05.38,Appl.US 66384母,f呈lod 23一0.84〔译自CBA,1988,(8),3153〕 能在链霉菌(s考呷户加呷馏。中产生所需蛋白的DN… 相似文献
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《生物技术通报》1994,(3)
941136全长和平截的苏云金芽抱杆菌晶体蛋白基因在杆状病毒中的表达及重组病毒的致病性〔英〕/Ri-beiro,B。M。…了J。Invertebr。Pathol。-1993,62(2)一121〔译自DBA,1993,12(22),93一12837〕 构建了分别含全长苏云金芽抱杆菌kurstakiDH一1亚种晶体蛋白cryIA(b)基因(质粒pAc-Btm)、该菌kurstaki HD一73亚种eryIA(e)基因(pAeBt73)、和eryIA(b)基因5尹平截形 (pAeBts)、3了平截形(pAeBt3)及5尹/3尹平截形(P AoBts/3)‘基因的重组转移载体。用之与重组杆状病毒AoRPS一刀一gal或野生型首蓓银纹夜蛾核多角体病毒DNA一道共转染草… 相似文献
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<正>预防接种是保护个体对抗日本脑炎病毒感染的最有效的手段。目前在中国使用了2种日本脑炎病毒疫苗;即Vero细胞衍生性灭活疫苗和弱毒活疫苗。在这项研究中,作者在小鼠模型中鉴定了由灭活疫苗、弱毒活疫苗以及DNA疫苗侯选物〔(pCAGJME),它表达了JEV-prM-E蛋白〕诱导的免疫应答的 相似文献
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《生物技术通报》1992,(12)
924368产生黄热病毒prM和E蛋白的重组牛痘病毒防治致死的黄热脑炎〔英〕/pineus,5.…了Virology一1992,157(i)一290一297〔译自DBA,1992,11(11),92一06158〕 为了在HeLa细胞培养物中表达17D黄热病毒 (YFV一17D)开读框不同部分,构建了四种重组牛痘病毒(vP766:表达C、prM、E、NSI、和NSZA,vPs6g:表达prM和E;vP729:表达E、NSI、NSZA和NSZB;vP725:表达NSI和NSZA)。表达PrM和E的vP869在小鼠中诱导高效价的中和抗体和血凝抑制抗体,保护水平与YFV一17D疫苗病毒免疫的保护水平相同。表达E和NSI、C prM、E、NSI或仅NSI的… 相似文献
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含2A片段的重组黄热病毒17D疫苗表达载体的构建 总被引：1，自引：0，他引：1
黄热疫苗是一种减毒的黄热病毒17D(YF-17D)活疫苗,是现有疫苗中最安全、最有效的疫苗之一,适于发展为疫苗载体。用RT-PCR法扩增出覆盖YF-17D全长基因组的3个cDNA片段:5′cDNA(A)、3′cDNA(B)和中间cDNA(C),同时引入SP6增强子序列、酶切位点和重复序列。顺序将A和B同E.coli-yeast穿梭质粒pRS424连接,再与C共转染酵母菌,利用缺少色氨酸和尿嘧啶的选择性固体培养基筛选出含YF-17D全长基因组的cDNA质粒。以该质粒为模板,经过DNA重组和酵母同源重组,获得含有口蹄疫病毒蛋白水解酶2A片段的重组YF-17D表达载体。将该表达载体体外转录后,电击转染BHK-21细胞。间接免疫荧光检测结果表明,RNA转录体在BHK-21细胞中进行了稳定的表达;滴度测定与形态学观察结果表明,重组病毒在细胞中的生长曲线等特征同母本YF-17D十分相似。结果提示,利用酵母菌同源重组在2A部位引入异种抗原基因,重组YF-17D表达载体pRS-YF-2A1具有成为高效活疫苗表达载体的潜力。 相似文献
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《生物技术通报》1992,(9)
923208通过逆转录病毒载体介导的签因转移在人异染性脑白质营并不良成纤维细胞中恢复芳荟硫酸菌脚A (ASA)活性〔英〕/Rommerskireh,W.…了Bioehem。J扩1991,250.Pt.2厂459~461〔译自DBA,1992,11(5),92一02414」 将人的ASA cDNA克隆到逆病毒载体质粒pXTI(含单纯疤疹病毒胸昔激酶启动子及小鼠Moloney白血病病毒5‘长末端重复片段)中,形成pXTASA。转染双嗜型PA317包装细胞培养,产生复制缺陷型逆病毒。用重组逆病毒感染MLD患者的成纤维细胞(2301培养)。受染细胞比正常人的对照细胞表达多10倍的ASA。由整合型原病毒编码的ASA被正… 相似文献
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《生物技术通报》1988,(3)
881137生长因子[专,英j,/Larsen,B.R.…了European Patent:气P尸1 .EP0216742.Pub.01.04.87.Appl.US7 77217,filed 17.09.85[译自CBA,1 987,(6),2580〕 该发明涉及可用于促进动物生长或乳汁分泌的新肤、加工和用干生产新肤的有关DNA以及使用新肤促进动物生长或乳汁分泌的方法。它是类牛胰岛素因子且生物学活性的肤类,这些肤类的生产及其影响某类细胞(如哺乳动物表皮或肌肉细胞)增殖或增加牛或其他动物乳汁分泌的使用方法。(戴顺志)881138世界上第一个用于防治新城疫的重组病毒痰苗〔英〕/未署名了Animal Pharm一298了,(126)一20〔译… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(3)
920941使用杆状病毒载体在昆虫细胞内台成的人绒毛膜促性腺激素a亚单位具生物学活性〔英〕/Nakhai,B.…厂FEBS Lett一1991,253(i)一104~x08仁译自DBA,1992,10(15),91一08562」 用HCGa亚基的编码cDNA置换核多角体病毒基因,构建了首落银纹夜蛾核型多角体病毒重组载体vAc一a一hCG。草地夜蛾Sfg病毒感染的细胞约分泌11.3声ga一HCG/2。。万细胞·Inl,这些a-HCG在电泳移动力、免疫反应性以及与声亚基的生物反应性上均与天然激素相同。分泌到培养基中的a一HCG占vAc一a一hCG感染昆虫细胞所合成的HCG总量的20~30%。超量产生如“一HCG… 相似文献
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目的获得纯化的诺如病毒(NV)衣壳蛋白VP1,免疫动物制备多克隆抗体。方法提取粪便样品中诺如病毒RNA,逆转录得到cDNA文库,通过PCR扩增获取VP1基因序列,构建到大肠埃希菌原核表达系统中诱导表达重组VP1蛋白。使用镍柱亲和层析法对重组蛋白进行纯化,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和考马斯亮蓝法(BSA)对重组蛋白的纯度与浓度进行分析,以重组的VP1蛋白为抗原,免疫雄性SPF级SD大鼠获得多抗血清,用ELISA测定抗体效价、Western blot检测抗体特异性。结果成功地构建出重组表达载体VP1-pET28a,并将其在大肠埃希菌BL21(DE3)中稳定地表达诱导重组蛋白。ELISA测其多抗血清的平均效价为1∶200 000,Western blot检测抗体在原核和真核特异性很高。结论本实验成功地利用原核表达系统表达诺如病毒衣壳蛋白VP1,为进一步研究诺如病毒的诊断和疫苗开发提供了条件。 相似文献
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水稻矮缩病毒外壳蛋白基因S8在昆虫细胞中的表达 总被引：3，自引：1，他引：2
将水稻矮缩病毒 (RiceDwarfVirus,RDV)外壳蛋白基因S8克隆到杆状菌毒转移载体 pVL1 393中 ,重组转移载体 pVL1 393 S8与线性杆状病毒RP2 3.LacZ共转染草地夜蛾细胞sf9,经过细胞体内同源重组、PCR筛选得到重组病毒RP2 3 S8。重组病毒RP2 3 S8感染sf9细胞后 ,收集细胞 ,并进行SDS PAGE及Western blot检测。结果表明 ,S8基因在昆虫细胞中成功表达 ,且在感染后 96h表达量最高 相似文献
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利用双杂交系统对SeNPV泛素与抗细胞凋亡蛋白相互作用的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
本文报道利用酵母双杂交系统研究甜菜夜蛾核多角体病毒(SeNPV)的泛素(Ubiqutin)与抗细胞凋亡蛋白(IAP2, IAP3)相互作用的结果.使用Clontech 公司的MACHMAKER GAL4 Two-hybrid system 3,以病毒ubiquitin基因与酵母GAL4的DNA结合域重组表达"诱饵"蛋白,以病毒iap2或iap3基因与DNA活化域重组表达"猎物"蛋白,在低严谨型筛选培养基上均得到阳性克隆.这一结果表明,甜菜夜蛾核多角体病毒泛素与IAP2或IAP3在体外能进行相互作用,这种作用利用了酵母内源性E1和E2.SeNPV的抗细胞凋亡蛋白(IAPs)可能是泛素-蛋白酶水解途径(UPP)中的泛素连接酶(E3),或者是泛素依赖性蛋白水解酶的靶底物. 相似文献
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《生物技术通报》1992,(2)
920691外渊签因在植物中的表达方法:工程病弃的潜在利用〔英〕/Joshi,R.L.…1 FEBS Lett一1901,281(i~2)一i~s〔译自DBA,1091,10(12),91一06876〕 表达外源基因的植物病毒可能对植物生物技术相当重要。但确保防止工程病毒在环境中的扩散却是一个重要的安全向题。讨论了下列问题:1.高等植物的基因转移方法(土壤杆菌介导的基因转移以及直接基因转移);ii。应用土城杆菌介导的基因转移保护作物(除草剂抗性、病毒病抗性、抗虫性以及基因表达的修饰以改良作物),111.病毒墓因组介导的外源基因在植物中的表达(DNA病毒基因组衍生的表达载体和R… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(3)
920861克隆的外源基因在大肠杆菌中增加表达的可能性〔英〕/Venetianer,p.了Aeta Bioteehnol一1991,11(2)一129~133〔译自DBA,1991,10 (15),91一08439习 在异源宿主(如大肠杆菌)中合成并累积想要的(外源)蛋白产物是一个复杂的多步骤过程,并受到以下步骤的影响:i。提高基因拷贝数的方法,如采用高拷贝数载体;11.提高和控制转录率的方法,如使用强启动子;111。提高翻译率的方法,如选用适宜的Shine一Dalgaroo序列;iv.增加合成蛋白或肤稳定性的方法,如表达融合蛋白;v.提高重组质粒稳定性的方法;如使用无需抗生素而能选择连续出现的质粒的方法;… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(1)
920166大型动物细饱分裂素的分子生物学〔英〕/M alisz。“,ski,C.…/Ady.Vet.Sei.Comp.Med一1990,35一181~213〔译自DBA,1991,20(9),91一04983〕 内容如下:选择的细胞分裂素的生物学特性,用细胞分裂素调节血细胞生成和免疫应答,以及牛和猪的重组细胞分裂素,包括(i)牛重组白细胞介素一1,(ii)牛重组白细胞介素一2,(i 11)牛重组粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子,(iv)牛重组干扰素甲,(v)猪重组白细胞介素一1和(vi)它们的结构特征及其基因。可利用交又杂交技术克隆编码这些细胞分裂素的cDNA,并在酵母或细菌中得以表达。在基础水平上,大量重组… 相似文献