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| 含2A片段的重组黄热病毒17D疫苗表达载体的构建 | |
| 引用本文： | Xiaowu Pang 付文川 郭银汉 张立树 谢天培 Xinbin Gu.含2A片段的重组黄热病毒17D疫苗表达载体的构建[J].生物工程学报,2006,22(3):492-498. |
| 作者姓名： | Xiaowu Pang 付文川 郭银汉 张立树 谢天培 Xinbin Gu |
| 作者单位： | 1. 北京东方天甲科技发展有限公司,北京,100078 2. 天甲丽珠生物科技有限公司,香港 3. 霍华德大学医学院,华盛顿,20059,美国 |
| 基金项目： | 华瀚生物制药控股有限公司资助项目;丽珠医药生物科技有限公司资助项目 |
| 摘 要： | 黄热疫苗是一种减毒的黄热病毒17D(YF-17D)活疫苗,是现有疫苗中最安全、最有效的疫苗之一,适于发展为疫苗载体。用RT-PCR法扩增出覆盖YF-17D全长基因组的3个cDNA片段:5′cDNA(A)、3′cDNA(B)和中间cDNA(C),同时引入SP6增强子序列、酶切位点和重复序列。顺序将A和B同E.coli-yeast穿梭质粒pRS424连接,再与C共转染酵母菌,利用缺少色氨酸和尿嘧啶的选择性固体培养基筛选出含YF-17D全长基因组的cDNA质粒。以该质粒为模板,经过DNA重组和酵母同源重组,获得含有口蹄疫病毒蛋白水解酶2A片段的重组YF-17D表达载体。将该表达载体体外转录后,电击转染BHK-21细胞。间接免疫荧光检测结果表明,RNA转录体在BHK-21细胞中进行了稳定的表达;滴度测定与形态学观察结果表明,重组病毒在细胞中的生长曲线等特征同母本YF-17D十分相似。结果提示,利用酵母菌同源重组在2A部位引入异种抗原基因,重组YF-17D表达载体pRS-YF-2A1具有成为高效活疫苗表达载体的潜力。 |
| 关 键 词： | 黄热病毒17D 表达载体 2A片段 全长cDNA 同源重组 |
| 文章编号： | 1000-3061(2006)03-0492-07 |
| 收稿时间： | 12 19 2005 12:00AM |
| 修稿时间： | 02 17 2006 12:00AM |
Construction of Recombinant Yellow Fever Virus 17D Containing 2A Fragment as a Vaccine Vector |
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| Xiaowu Pang,FU Wen-Chuan,GUO Yin-Han,ZHANG Li-Shu,XIE Tian-Pei,Xinbin Gu.Construction of Recombinant Yellow Fever Virus 17D Containing 2A Fragment as a Vaccine Vector[J].Chinese Journal of Biotechnology,2006,22(3):492-498. | |
| Authors: | Xiaowu Pang FU Wen-Chuan GUO Yin-Han ZHANG Li-Shu XIE Tian-Pei Xinbin Gu |
| Institution: | Beijing Oriental Tengen Tech Development Co., Ltd., Beijing 100078, China ;2 TenGen Livzon Biotech. Co., Ltd., Hongkong , China;3 Medical College, Howard University, Washington , DC 20059 U. S. A |
| Abstract: | |
| Keywords: | yellow fever virus 17D expression vector 2A fragment full-length cDNA homologous recombination |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |
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