Th1／Th2类细胞因子在氧化苦参碱抗小鼠急性免疫性肝损伤的影响作用研究

本研究的目的是观察氧化苦参碱（OM）对ConA诱导的小鼠急性免疫性肝损伤干预过程中Th1／Th2细胞因子的变化,探讨OM抗急性免疫性肝损伤的分子机制。将Balb／c小鼠随机分为四组：正常对照组（NCG）,肝损伤组（LIG）,OM对照组（OMCG）,OM治疗组（OMTG）。除NCG及OMCG尾静脉注射生理盐水0．3ml外,LIG及OMTG尾静脉注射12．5mg／kg ConA（0．3ml）一次。此外OMCG和OMTG在造模前0．5h经腹腔注射OM（60mg／kg）,每24h注射一次。     

白桦脂酸对免疫性肝损伤小鼠细胞因子及Bcl-2、activated-Caspase-3表达的影响

目的研究白桦脂酸(BA)对刀豆蛋白(Con A)诱导的急性免疫性肝损伤小鼠细胞因子及凋亡相关蛋白Bcl-2、activated-Caspase-3表达量的影响。方法将60只雄性KM小鼠随机分为6组,包括正常对照组,肝损伤模型组,联苯双酯(BIF)阳性对照组,BA高、中、低剂量组(H-BA、M-BA、L-BA组剂量分别为30 mg·kg~(-1)、15 mg·kg~(-1)、7.5 mg·kg~(-1))。BIF阳性对照组和BA高、中、低剂量组预防性给药15 d后,尾静脉注射20 mg·kg~(-1)Con A构建小鼠急性免疫性肝损伤模型。采用自动生化分析仪测定血清肝功能指标:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量;ELISA法测定血清炎性细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α、IFN-γ水平;Western blot法检测肝组织凋亡相关蛋白Bcl-2、activated-Caspase-3表达量的变化。结果与正常对照组比较,肝损伤模型组血清ALT和AST含量明显降低,IL-2、IL-4、IL-10和肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)水平明显升高,Bcl-2表达量下降而activated-Caspase-3表达量升高,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01);与肝损伤模型组比较,BA不同剂量组可显著降低Con A所致急性肝损伤小鼠血清ALT和AST含量,使小鼠血清中IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ水平显著降低,而IL-10水平显著升高,尤其是H-BA组、M-BA组,同时使Bcl-2表达量升高、activated-Caspase-3表达量下降,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论 BA对由Con A诱导的小鼠急性免疫性肝损伤具有拮抗作用。其机制可能与抗凋亡及降低炎性细胞因子水平和提高抗炎细胞因子水平、减轻T淋巴细胞毒性作用有关。     

雷公藤甲素对Con A诱导小鼠急性肝损伤的保护作用及机制

摘要 目的：探究雷公藤甲素（Triptolide）对刀豆蛋白A（Concanavalin, Con A）诱导的小鼠急性肝损伤的保护机制。方法：雄性BALB/c小鼠30只,随机等分为正常对照组、Con A模型组和雷公藤甲素治疗组。通过尾静脉注射Con A构建小鼠急性肝损伤模型。微孔板法检测血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）水平,HE染色观察肝组织病理变化,免疫组化、实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肝组织及血清中细胞因子水平。结果：与正常对照组比较,Con A诱导急性肝损伤小鼠血清ALT、AST水平显著增高（P<0.05）,肝组织呈局灶性炎性浸润、坏死。与Con A模型组比较,雷公藤甲素治疗组小鼠血清ALT、AST水平显著下降（P<0.05）;肝组织病理程度明显减轻;肝组织中CD4⁺T细胞的浸润降低,促炎细胞因子（IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-2）的水平显著降低（P<0.05）。结论：雷公藤甲素可以通过抑制CD4⁺T细胞向肝脏募集,下调IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-2的表达,有效防治Con A诱导的急性免疫性肝损伤。     

粪菌移植对溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜Th1/Th2细胞及其细胞因子表达的影响

目的观察粪菌移植(FMT)对结肠炎小鼠结肠组织内Th1/Th2平衡及其细胞因子的影响。方法用葡聚糖硫酸钠(DSS)制备溃疡性结肠炎小鼠模型,共48只雄性C57BL/6小鼠,按3∶2∶1随机分为干预组、对照组和粪便供体组。其中干预组24只小鼠自由饮用2%DSS溶液,第6天时再次称重随机分为3组,每组6只:粪便滤液组(A组)、美沙拉嗪缓释颗粒组(B组)、生理盐水组(C组),并分别灌肠给予粪便滤液(500mg/mL,0.3mL/次)、美沙拉嗪缓释颗粒混悬液(25mg/mL,0.3mL/次)和生理盐水(0.3mL/次),每日2次,连续5d;对照组分为急性结肠炎组(D组)和正常对照组(E组),每组6只,分别自由饮用2%DSS溶液和蒸馏水7d后处死;粪便供体组(F组)正常进食饮水,采集新鲜粪便制作粪便滤液。评估疾病活动指数、脾脏指数、结肠长度和结肠组织病理评分。免疫组化法和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测结肠组织Th1/Th2细胞及细胞因子(TNF-α、IFN-γ、IL-4和IL-10)的表达。结果 (1)粪菌移植治疗明显改善结肠挛缩和病理损伤(P0.05),而脾脏指数明显增加(P0.05);(2)粪菌移植使结肠炎小鼠结肠组织的T-bet阳性细胞和Gata-3阳性细胞表达升高,T-bet/Gata-3平衡右移;(3)粪菌移植使结肠炎小鼠结肠组织细胞因子(TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-10)水平下降。结论粪菌移植促进结肠炎小鼠的结肠黏膜修复,可能与调节结肠组织Th1/Th2细胞平衡,下调炎症因子,介导Th2免疫修复有关。     

慢性乙肝病毒感染患者肝纤维化、肝功能及Th1/Th2细胞因子水平变化及恩替卡韦干预研究

摘要 目的：研究慢性乙肝病毒（HBV）感染患者肝纤维化、肝功能及Th1/Th2细胞因子水平的变化情况,并分析恩替卡韦干预对慢性HBV感染患者相关指标的影响。方法：选择2016年4月至2018年1月我院收治的120例慢性HBV感染者为研究对象,其中慢性乙肝轻度50例、中度24例、重度21例、肝硬化者25例,并选择同期于我院进行体检的50例健康者为健康对照组,分析不同病情慢性HBV感染患者血清中的肝纤维化指标[透明质酸（HA）、Ⅳ型胶原（ⅣC）,层粘连蛋白（LN）、III型前胶原肽（PC III）]、肝功能指标[丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转移酶（AST）]及Th1/Th2细胞因子[干扰素-γ（IFN-γ）、白介素-2（IL-2）、白介素-4（IL-4）、白介素-6（IL-6）]的变化,慢性HBV感染患者按照随机数字表法分为观察组和对照组,对照组给予还原型谷胱甘肽和复方甘草酸苷等常规护肝治疗,观察组在对照组基础上另口服恩替卡韦分散片治疗,对比两组治疗前后各指标水平。结果：慢性HBV感染患者的肝纤维化指标、肝功能指标及Th1/Th2细胞因子IL-4、IL-6等指标水平均显著高于健康对照组,且随着病情的加重呈逐渐上升趋势;而IFN-γ和IL-2水平均低于健康对照组,随着病情的加重而逐渐降低（P<0.05）。治疗后两组血清肝纤维化指标（HA、ⅣC、LN、PC III）、肝功能指标（ALT、AST）以及IL-4、IL-6水平均显著低于治疗前,且观察组低于对照组（P<0.05）。治疗后两组血清IFN-γ、IL-2水平均高于治疗前,且观察组高于对照组（P<0.05）。结论：慢性HBV感染患者存在肝纤维化水平上升、肝功能受损及Th1/Th2细胞失衡,恩替卡韦联合常规护肝治疗可有效纠正患者的Th1/Th2细胞失衡,减轻患者的肝纤维化,改善其肝功能。     

流体力学注射IL-35质粒对ConA诱导小鼠肝损伤的保护作用

目的:观察流体力学注射白细胞介素35(IL-35)质粒对刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠肝损伤的干预效果。方法:通过流体力学注射将pcDNA3.1-IL-35导入C57BL/6小鼠体内,对照组注射pcDNA3.1。24h后,以ConA(15mg/kg)尾静脉注射建立小鼠肝损伤模型,检测血清ALT活性和肝组织病理变化。结果:流体力学注射pcDNA3.1-IL-3524h后,肝组织有IL-35mRNA和蛋白的表达。与对照组相比,pcDNA3.1-IL-35预处理组小鼠血清ALT水平明显降低,肝组织病理损伤明显减轻。结论:流体力学注射IL-35质粒对ConA诱导的小鼠肝损伤具有保护作用。     

轮状病毒致乳鼠肠道外感染Th1/Th2细胞因子变化的研究

目的通过复制轮状病毒（RV）肠道外感染乳鼠的动物模型,检测接种后乳鼠体内Th1/Th2平衡改变,对RV肠道外感染后机体免疫状态进行初步研究。方法48只乳鼠随机均分为3组：肠道外组、肠道内组和正常对照组。肠道外组通过腹腔注射猴RVSA11株,肠道内组灌胃等量RV悬液,对照组无特殊处理。分别在接种后第4天、第8天处死乳鼠,收集标本,观察心、肝、肾、肺等脏器病理变化,用ELISA法检测血清中IL-10和IFN-γ的表达。结果光镜下肠道外组乳鼠肾、肝、肺和脾脏出现病理改变。感染后第4天,肠道内、外组乳鼠血清IFN-γ水平均高于正常组,到第8天明显下降,基本达到基线水平;IL-10在肠道外组第4天增高,到第8天小幅下降,但仍然高于正常组;而肠道内组IL-10无明显改变。结论RV肠道外感染早期呈现Th1-Th2混合反应,而后期则以IL-10的表达为主,T细胞向Th2型免疫应答方向偏离,Th1/Th2细胞因子失衡机制可能是RV肠道外感染的重要因素。     

菌群失调小鼠感染鼠伤寒沙门菌后Th1和Th2细胞因子的动态研究

目的研究鼠伤寒沙门菌感染小鼠在菌群失调下Th细胞因子的动态变化,以探讨菌群失调对沙门菌感染的免疫机制。方法分别建立菌群失调、感染和空白对照的小鼠模型。各组动物在感染不同时点处死,观察小肠、肝脏和脾脏病理改变。采用流式细胞仪检测脾脏细胞中IFN-γ和IL-4表达,以此代表Th1和Th2细胞。结果菌群失调组病理损害最重,Th1明显增加,表达水平高,Th2变化不大,Th1/Th2比值升高。结论菌群失调后,能够加重小鼠感染鼠伤寒沙门菌引起的的Th1型反应,产生炎症性损伤。     

LPS/D-GalN诱发NF-κB转基因小鼠急性致死性肝损伤模型的建立

目的以NF-κB转基因BALB/c小鼠建立一个LPS/D-GalN诱发的急性致死性肝损伤模型。方法采取腹腔注射高剂量的LPS/D-GalN建立急性致死性肝损伤小鼠模型,观察模型小鼠的促炎症细胞因子水平和NF-κB的活性改变,以及肝脏功能和病理改变情况。结果模型组小鼠生存时间为8～10 h,模型建立后小鼠血清TNF-α、IL-6和MCP-1水平显著升高,在2～4h达到高峰;肝脏外观出现瘀血和出血,肝脏小叶被严重破坏,肝细胞严重坏死和出血;血清ALT/AST水平在模型诱发后持续迅速上升;整体成像显示NF-κB的活性在4～6 h达到高峰。正常对照组小鼠以上指标无显著变化。结论成功建立LPS/D-GalN诱发的NF-κB转基因小鼠的急性致死性肝损伤模型。     

调控Tim-3通路在免疫性肝损伤大鼠中对Th17细胞的影响

目的建立免疫性肝损伤模型,探讨Tim-3通路在阻断或激活时对Th17细胞的影响。方法大鼠尾静脉注射刀豆蛋白A(Con A)8周,建立免疫性肝损伤模型。无菌取脾脏制备脾淋巴细胞,取外周血分离血清后于-20℃保存,取肝脏组织放入4%的多聚甲醛中固定备用。在96孔板上将脾淋巴细胞平均分成5组,即阻断实验组、阻断对照组、激活实验组、激活对照组和Con A对照组。用Tim-3的单克隆抗体即Anti-Tim-3来阻断Tim-3通路;用Tim-3的重组配体galectin-9来激活Tim-3通路,37℃、5%CO2培养箱中培养72 h,收集细胞上清液于-20℃保存。生化分析法测血清中ALT、AST和ALB的表达;HE染色观察肝脏组织的病理变化;免疫组化法测肝脏组织中IL-17A和ROR-γt蛋白的表达;ELISA法测细胞上清液中IL-17A及IL-6的表达;实时定量PCR测各组脾淋巴细胞ROR-γt mRNA的表达。结果与对照组相比,模型组HE染色可见明显的炎性细胞浸润、肝脏组织损伤及较多的假小叶,免疫组化可见IL-17A和ROR-γt蛋白的表达明显升高;与阻断对照组相比,阻断实验组中IL-17A和IL-6的水平升高(P0.05);与激活对照组相比,激活实验组中IL-17A和IL-6的水平降低(P0.05);实时定量PCR显示与阻断对照组相比,阻断实验组中ROR-γt mRNA的表达明显增加(P0.05)。结论免疫性肝损伤的发病与Th17细胞密切相关,免疫调控Tim-3通路可通过影响Th17细胞效应,进而参与免疫性肝损伤的发病机制。     

对乙酰氨基酚诱导的小鼠药物性肝损伤的模型研究

改良对乙酰氨基酚（acetaminophen,APAP）单独诱导小鼠急性肝损伤的模型和致死模型。随机将小鼠分为4组：空白对照组、APAP3h组、APAP6h组和APAP12h组,每组5只。饥饿15h后用对乙酰氨基酚诱发小鼠肝损伤。测定各组血清ALT、AST及胆红素含量,HE染色观察各组肝组织损伤情况。观察生存率时,小鼠随机分为对照组、禁食＋APAP（500mg／kg）组、禁食＋APAP（300mg／kg）组和不禁食＋APAP（500mg／kg）组,四组同时给药,然后记录各组小鼠的生存情况,绘制四组小鼠的生存曲线。小鼠注射APAP后,随时间的延长,ALT、AST水平逐渐升高,均明显高于空白对照组（P〈0．05）。小鼠肝脏HE染色可见,APAP中毒组小鼠肝细胞坏死及炎性细胞浸润。禁食＋APAP（500mg／kg）组小鼠自16h开始出现死亡,72h时全部死亡,死亡率明显高于不禁食组和禁食＋APAP（300mg/kg）组小鼠。该研究对APAPI起的C57／BL6小鼠药物性肝损伤模型进行改良,使其更加稳定和便于研究,为进一步探究APAP诱导肝毒性的机制及防治措施奠定了基础。     

白细胞介素22对T细胞介导的小鼠肝损伤的治疗作用及初步机制探讨

目的研究人白介素22（IL-22）对T细胞介导的肝损伤小鼠的治疗作用。方法利用刀豆蛋白A（ConA）建立T细胞介导的肝损伤小鼠模型,检测静脉注射IL-22对肝损伤小鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）活性的影响,同时取小鼠肝组织进行病理学检查。并采用半定量RT-PCR方法检测IL-22刺激HepG2和LO2细胞后,对c-myc及Bcl-2基因转录表达水平的影响。结果IL-22明显降低ConA致小鼠急性肝损伤血清ALT、AST值的升高,减轻ConA对肝组织的病理损伤。体外检测IL-22对HepG2和LO2细胞表达c-myc及Bcl-2基因转录水平有促进作用。结论IL-22对T细胞介导的肝损伤小鼠模型具有治疗作用,该作用可能是通过IL-22促进肝细胞的抗凋亡因子的表达实现的。     

Th17及相关细胞因子与酒精性肝硬化患者肝脏硬度值、肝功能及脂联素水平的相关性分析

摘要 目的：探讨Th17及相关细胞因子与酒精性肝硬化患者肝脏硬度值（LSM）、肝功能及脂联素（APN）水平的相关性分析。方法：以2018年1月~2020年1月本院收治的酒精性肝硬化患者72例作为酒精性肝硬化组,同期在本院进行体检的健康志愿者100例作为健康对照组。对比两组研究对象Th17、白介素-17（IL-17）、LSM、肝功能指标、APN水平的差异,采用Pearson检验评估酒精性肝硬化患者Th17及IL-17与病情相关指标的相关性。结果：酒精性肝硬化组患者的Th17细胞分布比例、IL-17水平、LSM均高于健康对照组（P<0.05）。外周血中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（STB）的水平高于健康对照组,白蛋白（ALB）的水平低于健康对照组,血清中APN的水平低于健康对照组（P<0.05）。相关性分析发现,酒精性肝硬化患者Th17细胞分布比例及IL-17水平与LSM、ALT、AST、STB的水平呈正相关,与ALB、APN的水平呈负相关（P<0.05）。结论：酒精性肝硬化患者Th17及其细胞因子IL-17表达水平异常增高,可能在反映病情相关指标异常变化程度方面具有积极作用。     

Glucocerebroside treatment ameliorates ConA hepatitis by inhibition of NKT lymphocytes

Concanavalin A (ConA) induces natural killer T (NKT) cell-mediated liver damage. Glucocerebroside (GC) is a naturally occurring glycolipid. Our aims were to determine the effect of GC in a murine model of ConA-induced hepatitis. Mice in groups A and B were treated with GC 2 h before and 2 h following administration of ConA, respectively; group C mice were treated with ConA; group D mice was treated with GC; group E mice did not receive any treatment. Liver damage was evaluated by serum aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) levels and liver histology. The immune effect of GC was determined by fluorescence-activated cell sorter analysis of intrahepatic and intrasplenic NKT lymphocytes, measurement of cytokine levels, and Western blot analysis for STAT 1, 4, 6, and NF-kappaB expression. The effect of GC on NKT cell proliferation was assessed in vitro. Serum AST and ALT levels were markedly reduced in GC-treated group A mice compared with nontreated group C animals, and histological damage was markedly attenuated in group A. The beneficial effect of GC was associated with a 20% decrease of intrahepatic NKT lymphocytes, significant lowering of serum IFN-gamma levels, and decreased STAT1 and STAT6 expression. In vitro administration of GC led to a 42% decrease of NKT cell proliferation in the presence of dendritic cells but not in their absence. Intraperitoneally administered radioactive GC was detected in the liver and bowel. Administration of GC led to amelioration of ConA hepatitis associated with an inhibitory effect on NKT lymphocytes. GC holds promise as a new immune-modulatory agent.     

原发性肝癌患者Th1/Th2 亚群研究*

目的:探讨原发性肝癌患者血清中淋巴细胞亚群中Th1/Th2的变化,为分析肝癌的发生发展状症和临床治疗提供免疫学指标。方法:应用放射免疫分析及酶联免疫分析法(ELISA),测定46例肝癌患者,及43例正常对照组进行比较。以IL-2、INF-γ和TNF-α水平代表Th1型细胞因子,以IL-4,IL-6、IL-8、IL-10的水平代表Th2型细胞因子。结果:肝癌患者IL-2、TNF-γ、IL-6的水平明显低正常对照组,P<0.01。IL-4、IL-8、IL-10、TNF-α的水平明显高于正常对照组,P<0.01。结论:肝癌患者体内存在Th1/Th2细胞因子失衡,其中Th1亚群功能抑制,Th2亚群功能亢进,其与肿瘤在宿主体内生长密切相关。通过纠正这些免疫失调将成为肝癌治疗的重要手段。     

丹参对非酒精性脂肪肝Th17细胞及相关细胞因子的影响*

目的:研究丹参对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠Th17细胞及相关细胞因子的影响,为临床上丹参治疗NAFLD提供实验依据。方法:SPF级别SD大鼠32只,随机分为模型组、空白对照组、葛根对照组、丹参组,每组8只。模型组给予高脂饲料喂养4周以建立NAFLD模型;丹参治疗组及葛根对照组大鼠给予6.25g·kg^-1·d^-1的浓缩液每日1次灌胃;除了空白对照组外,其余各组大鼠均给予高脂饲料喂饲4周。实验完全结束(第4周),各组大鼠禁食12～14 h,禁水2 h后,采血,收集肝脏组织,检测各组大鼠血脂(TC、TG、LDL-C、HDL-C)水平及肝功能(AST、ALT)、肝脏指数,观察肝组织病理学改变。流式细胞仪检测外周血Th17、Treg细胞含量。通过ELISA法检测血清IL-6、IL-17、TNF-α水平;RT-PCR法检测肝脏组织RORγt基因表达。结果:连续4周喂养高脂饮食后,模型组大鼠肝脏发生脂肪变性,有大量炎症细胞浸润。与模型组相比,丹参治疗组、葛根对照组大鼠TC、TG、LDL-C、ALT、AST水平及肝脏指数明显低于模型组(P＜0.05),HDL-C水平明显高于模型组(P＜0.05)成功复制NAFLD大鼠模型。丹参治疗组大鼠外周血Th17细胞含量、IL-6、IL-17水平、大鼠RORγt基因表达量显著低于模型组及葛根对照组(P＜0.05);TNF-α水平低于模型组及葛根对照组;Treg细胞含量高于模型组(P＜0.05)及葛根对照组(P＞ 0.05);Treg/ Th17显著高于模型组及葛根对照组 (P＜0.05)。结论:丹参通过降低血清中IL-6、IL-17、TNF-α水平,抑制RORγt基因表达,降低外周血Th17细胞含量,升高Treg细胞含量,调整Th17/Treg平衡,从而抑制NAFLD发生发展。     

NF-κB在腹部肠管火器伤后肝组织中的表达及意义

目的:探讨NF-κB在腹部火器伤肠管穿透后肝组织中的变化及意义。方法:42头健康长白仔猪随机等分为对照组和伤后1h、2h、4h、8h、12h和24h组,实验组建立腹部肠管火器伤模型后,用免疫组化图像分析法测定各组肝内NF-κB的表达,同时测定血清中ALT、AST水平,光镜下观察各组肝脏组织学变化。结果:实验组肝内NF-κB活性明显高于对照组,并于伤后1h和8h出现2个高峰(P<0.05)。实验组出现逐渐加重的肝细胞水肿、变性、坏死,血清ALT、AST水平在伤后明显升高,并于伤后2h和12h出现2个高峰(P<0.05)。结论:NF-κB的活化在腹部火器伤肠管穿透后继发性肝损伤中扮演着重要角色。     

DDFA对重症急性胰腺炎大鼠肝脏细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因表达的影响

目的探讨DDFA对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肝脏细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因表达的影响。方法57只大鼠随机分为假手术组(SO组,n=9)、SAP组(n=24)和DDFA治疗组(n=24)。大鼠SAP模型采用50g/L牛磺胆酸钠胰腺被膜注射法建立,建模后6、12、24h测定血BIL、AST、ALT,光镜观察肝脏组织病理变化,TUNEL法测定肝脏细胞凋亡,SABC免疫组化染色法测定肝脏Bax、Bcl-2基因表达。结果SAP组BIL、AST、ALT和肝脏细胞凋亡指数、Bax基因表达较假手术组升高,Bcl-2基因表达较假手术组下降,光镜下见肝脏组织损害明显;经DDFA治疗后,BIL、AST、ALT和肝脏细胞凋亡指数、Bax基因表达下降,而Bcl-2基因表达增强,光镜下见肝脏组织损害减轻。结论肝脏细胞凋亡、Bax、Bcl-2基因表达参与SAP发病机制,在SAP早期给予DDFA治疗对减轻肝脏损害程度、改善预后是有益的。     

无绿藻对小鼠Th17细胞分化的影响

目的 研究无绿藻是否能够影响小鼠Th17细胞的分化,影响Th17细胞分泌相关的细胞因子.方法 体外培养无绿藻,用尼龙毛柱法分离培养小鼠脾脏T淋巴细胞,按照1∶5的比例将两者在transwell培养板上共培养,培养2h、4h、8h、12 h、24 h、48 h,分别收集T淋巴细胞,留取培养上清液.流式细胞技术检测Th17细胞表型,ELISA法检测培养上清液中IL-17的水平.结果 从共培养2h开始,随着共培养时间的延长Th17细胞所占比例逐渐降低,共培养8h后趋于稳定（P＜0.05）;从共培养2h开始,培养上清液中IL-17的水平逐渐升高,8h后出现下降,24h后趋于稳定（P＜0.05）.结论 在与T细胞共培养的条件下,无绿藻抑制了小鼠Th17细胞的分化,但是在最初2～8h可以促进Th17相关细胞因子IL-17的释放.