氨基酸含量的快速测定方法之一—非水滴定法

<正> 非水滴定法是容量分析方法之一,它和用某些化合物溶于醇、醚、或醋酸、胺类等非水溶剂中,显示酸、碱或氧化还原等性质,采用适当的非水滴定剂进行滴定,得到比在水中进行滴定时要敏锐得多的滴定终点,从而能较准确地计算出被测物的含量。一般弱酸、弱碱,特别是生物碱的含量,多采用非水滴定法进行滴定,我国在75年编的新药典草案中,有十分之一的化学药品采用了非水滴定法进行含量测定。     

DL-α-氨基丙酸含量的电位滴定

<正> DL-α-氨基丙酸是一种生化试剂,是维生素B_6生产的两大主要原料之一。它是白色结晶体。味甜、易溶于水,不溶于无水乙醇和乙醚。294～296℃分解,等电点pH6。目前国内已经逐步推广应用非水滴定法分析氨基酸,非水滴定法是容量方法之一,一般弱酸、弱碱,特别是生物碱的含量,多     

工业合成甘氨酸其含量的测定——甲醛法

<正> 甘氨酸是医药、有机合成和生物化学研究中常用的氨基酸之一。工业上,甘氨酸可由一氯醋酸和氢氧化铵作用而成。而工业合成甘氨酸其含量的测定目前尚无国家标准。上海市卫生局药品检验标准中,甘氨酸的含量测定,采用高氯酸—冰乙酸非水滴定法。其它氨基酸的含量测定在工业上和医药上亦主要采用非水滴定和克氏定氮法,但是工业合成甘氨酸,由于其样品中有氯化铵的存在,用以上两法测定其准确性均受干扰。本文介绍用过量的氧化镁去除NH_3,在     

SARS-CoV细胞空斑试验

目的建立适用于生物安全三级实验室操作的SARS．CoV空斑试验方法。方法SARS－CoVl0倍系列稀释接种Vero－E6细胞,用0．6％琼脂糖覆盖中性红着色（琼脂糖．中性红法）或覆盖1％甲基纤维素,4％甲醛固定,结晶紫染色（甲基纤维素－结晶紫法）,空斑计数。结果琼脂糖－中性红法病毒滴度为6．14Lg pfu／mL,甲基纤维素－结晶紫法病毒滴度为6．57Lg pfu／mL。结论二种空斑试验方法相比,病毒滴度无明显差异。甲基纤维素－结晶紫空斑试验法形成的空斑比琼脂糖－中性红法清晰、操作简单安全、结果可长期保存。     

CRK1基因缺失对白念珠菌形态、黏附、生物被膜的影响

目的 研究CRK1基因缺失对白念珠菌形态、黏附、生物被膜的影响.方法 显微镜下观察,计算菌丝形成率,比较CRK1基因缺失菌（Δcrk1菌）及标准菌SC5314形成菌丝的能力;建立肠黏膜模型,计算黏附率,评价CRK1基因缺失对白念珠菌黏附的影响;MTT法及结晶紫法（CV）评价CRK1基因缺失对白念珠菌生物被膜形成的影响.结果 与SC5314相比,Δcrk1菌分别在10％胎牛血清和RPMI-1640培养条件下形成菌丝能力均较弱,两者之间有统计学差异;Δcrk1菌在60、90、120 min时对肠黏膜的黏附数明显少于标准菌SC5314,两者之间有统计学差异;通过MTT法、结晶紫法两种方法证实了,在经48 h培养后,Δcrk1菌与其标准菌SC5314相比,形成生物膜的能力弱,两者之间差异有统计学差异.结论 CRK 1基因缺失影响白念珠菌菌丝二态性的转化,进而影响黏附力和生物被膜的形成.     

胶红酵母JB401降解脱色三苯甲烷类染料

从烟梗中分离筛选得到1株能够对三苯甲烷类染料高效脱色的微生物,经ITS-5.8S rDNA分析鉴定为胶红酵母,命名为Rhodotorula mucilaginosa JB401。全波长扫描实验结果证实染料的脱色由胶红酵母降解结晶紫引起。为了提高R.mucilaginosa JB401脱色结晶紫的能力,通过单因素试验对R.mucilaginosa JB401的培养条件进行了优化,得出菌体生长24 h后以2%接种量接入初始pH为5的脱色培养基并在37℃摇床培养,可以取得最优脱色效果,此时脱色50、100和200 mg/L的结晶紫达到90%去除率分别需要3、6和14 h。此外,胶红酵母对温度和pH良好的适应性使其具有应用于工业废水处理的潜力。     

钙指示剂的发展及其研究现状

钙指示剂常被用于细胞及细胞器钙信号的检测,是钙信号转导研究中必不可少的工具.目前的钙指示剂分两大类,包括化学钙指示剂,如Fura-2、Indo-1、Fluo-4等,和基因编码的钙指示蛋白如D1ER、GCaMP、CEPIA1er等.随着技术的发展及研究需求的不断提升,各版本的钙指示剂也在不断更新.本文对已有的钙指示剂进行了系统地梳理,详细介绍了目前应用最为广泛的钙指示剂,总结了现有钙指示剂的优缺点,并对可优化提升的部分进行了展望,旨在为钙指示剂研究的进一步发展提供一些思路.     

禾本红酵母Y－5对结晶紫、孔雀石绿的吸附

研究了培养时间、初始pH、温度对禾本红酵母Y-5吸附结晶紫、孔雀石绿的影响,并对吸附剂的解吸和循环利用等进行考察.结果表明： 在染料浓度为50 mg·L^-1、pH 7.0、摇床转速150 r·min^-1、30 ℃、吸附10 h时,红酵母对结晶紫、孔雀石绿的吸附率分别达峰值,为93.8%和87.7%;解吸后的菌体对结晶紫、孔雀石绿的吸附率分别为85.5%和78.5%,说明菌体对染料的吸附是可逆的,循环利用效果良好,菌体可再生和循环利用;禾本红酵母Y-5对结晶紫、孔雀石绿的脱色机理为吸附作用,染料多被吸附在红酵母表面的羟基（-OH）上,其吸附染料快速、高效、可逆,在染料废水处理上具有潜在的应用价值.     

金溶胶基底的 SERS 增强效果的实验研究

本文以结晶紫作为探针分子,研究了以金溶胶膜、pH ＝6以及 pH ＝13的金溶胶溶液为活性基底的表面增强拉曼光谱的增强效果。采用化学还原法制备金溶胶,加入氢氧化钠改变其 pH 值,并以自组装法制备金溶胶膜。通过比较金溶胶膜、pH ＝6及 pH ＝13时金溶胶溶液的增强因子以及在这三种金溶胶基底上结晶紫的检测限,分析不同活性基底增强效果的差异。三种活性基底的增强因子分别可达到5．9×103、1．5×105、2．3×107,pH ＝13的金溶胶溶液有最佳的增强效果。以这三种金溶胶为基底对结晶紫进行表面增强拉曼光谱探测,可得到检测限为70．7 nmol／L、9．6 nmol／L、1．8 nmol／L。结果表明,金溶胶溶液的增强效果明显优于金溶胶膜,而通过改变金溶胶体系的 pH 值可以改变金纳米颗粒的聚合程度及对探测物的吸附特性从而获得更高灵敏度的活性基底。     

棕色固氮菌缺失nifE的突变种固氮酶钼铁蛋白的结晶

从限氨固氮培养基中培养棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipmann)缺失nifE的突变种DJ35中,分离纯化得到缺失FeMoco的钼铁蛋白(ΔnifE Av1).在一定条件下结晶得到深棕色短斜四棱柱晶体.结晶溶液中各组分的浓度以及结晶方法等对其晶核数目、晶体大小和质量有明显影响.目前用气相扩散的悬滴法所得的最大晶体的二维边长分别为0.12 mm和0.13 mm.     

两种新型培养细胞数量检测技术的探索

将SRB比色法和结晶紫比色法与MTT比色法与MTT比色法在96孔板培养HeLa细胞的数量及活力测量精确度和操作方法上进行了对比。试验结果显示：SRB比色法和结晶紫比色法的最佳检测波长均为490nm。最佳染液浓度分别为0.4%和0.25%。SRB比色法的检测精确度略逊于MTT法，结晶紫比色法与MTT法无显著差异。另外，此两种检测方法的操作过程更为简便，所需时间也较短，可在一定范围内取代MTT比色法。     

细菌脱色酶TpmD对三苯基甲烷类染料脱色的酶学特性研究

从嗜水气单胞菌DN322中分离纯化出能够对三苯基甲烷类染料结晶紫、碱性品红、灿烂绿及孔雀绿进行有效脱色的脱色酶,命名为TpmD。该酶的亚基分子量为29.4kDa,等电点为5.6。该酶催化上述4种三苯基甲烷类染料脱色反应的适合温度为40~60℃,适合pH范围为5.5~9.0。动力学参数测定结果显示TpmD对结晶紫、碱性品红、灿烂绿及孔雀绿的Km值分别为24.3、40.65、4.2、68.5μmol-1.L-1,Vmax值分别为19.6、74.1、82.8、115.6μmol.L-1.s-1。结晶紫为该酶的最适反应底物。TpmD催化的脱色反应依懒于NADH/NADPH及分子氧的存在,显示该酶属于NADH/NADPH依赖型的氧化酶类。这是国内外首次关于细菌中三苯基甲烷类染料脱色酶酶学性质的描述。     

自制袋装厌氧指示剂与BBL等产品的应用效果比较

厌氧菌培养能否成功关键之一,在于培养容器内游离氧的含量,残余氧含量越少,厌氧菌培养的成功率越高。为了检测培养厌氧菌的容器中厌氧程度,许多学者设计了各种厌氧指示剂,其中尤以美国 BBL 出品的袋装厌氧指示剂颇受欢迎。它的优点是:比较灵敏;使用方便;有效期长.目前国内尚无与之可比拟的产品问世.虽然国内管装液体指示剂和袋装指示剂已有报告,但当较长时间保存则指示效果不佳。为了便于基层单位广泛开展厌氧菌研究工作,我们研制了一种袋装厌氧指示剂,经过两年多观察,并与美国 BBL 产品和国内外常用的五种化学指示剂,两种生物指示剂作了比较,现将结果报告如下:     

超低温含水生物样品电子显微镜技术

现代电子显微镜的分辨力已达到0.2nm,但用它观察生物结构,其分辨力几乎要低一个数量级。目前电镜观察生物结构的最好记录是对紫膜结构的研究,能显示1nm的规则结构,表明紫膜具有二维结晶性质。对无规则生物结构的观察,以核糖体为例,其分辨力只及3—5nm。因此,目前生物样品电子显微镜分析     

紫萁贯众化学成分研究

紫萁贯众为紫萁科(Osmundaceae)紫萁属植物紫萁(Osmunda japonica Thunb.)带叶柄残基的根茎.本文采用溶剂法及各种色谱方法从紫萁贯众乙酸乙酯部位分离得到6个化合物,通过理化性质和波谱数据分析,分别鉴定为1,7,9,11-四羟基-3-甲基-5,6-二氢-萘骈蒽醌(1),(E)-3,4-二羟基苯亚甲基丙酮(2),原儿茶酸(3),β-谷甾醇(4),β-胡萝卜苷(5)和二十六烷酸(6).化合物1为首次从植物界中得到,化合物2、3和6均为首次从紫萁属植物中分离得到.     

紫淮山全粉喷雾冷冻干燥工艺及其特性研究

制备高品质的紫淮山全粉,有利于拓宽紫淮山的消费途径和提升产品价值。本文考察了固液比、进料流量和冻结温度对紫淮山全粉水分含量、溶解度和花色苷含量的影响,通过四因素三水平正交试验,优化了紫淮山全粉喷雾冷冻干燥工艺,并对热风干燥、真空冷冻干燥、喷雾干燥、喷雾冷冻干燥这4种干燥方式制备的紫淮山全粉理化特性和抗氧化能力进行了比较。结果表明,紫淮山冷冻喷雾干燥的最佳工艺条件为进料流量25 mL/min、固液比1∶1、冻结温度-30℃,在此条件下得到的紫淮山全粉水分含量为3. 89%、溶解度为23. 12%、花色苷含量为13. 28 mg/100 g。干燥方式对紫淮山全粉的物理性质、营养成分、活性成分和抗氧化能力的影响显著。     

嗜菌紫膜表面电位和质子泵效率间的关系

本文研究了中性红与紫膜结合,并用直接滴定法和测定结合量法,求得了结合于膜上之中性红本征PK和在不同离子强度时的表观PKa值.从它们的差值中计算得到紫膜表面电位.并得不同盐浓度的表面电位和质子泵效率作了比较.结果说明.阳离子对质子泵效率的影响不能完全用表面电位的变化来说明.这一结果暗示了一定的阳离子对于紫膜质子泵功能的完成有着特殊作用.     

应用指示剂提高生长谱法测定发酵液中L—苏氨酸含量的准确性

在应用生长谱法测定发酵液中L—苏氨酸含量时,增强培养基上指示菌生长圈的清淅度,提高检测的准确性,是苏氨酸发酵上的一个重要方面。我们在测定培养基中添加一定量的溴甲酚紫,结晶紫或两者的混合物,生长圈清淅可见。在L—苏氨酸一定浓度范周内,生长圈的大小与L—苏氨酸的含量成线性关系。与传统纸层析测定法相比有更高的准确性。本文就添加指示剂的浓度、培养条件、指示菌浓度等因素进行了叙述。     

瘤普霖原料药含量测定方法的研究

本文对瘤普霖原料药分别采用电位滴定法、氧瓶燃烧法、凯氏定氮法、pH指示剂吸收度比值法和交流示波极谱滴定法进行了含量测定,并对五种方法进行了比较。实验结果表明,pH指示剂吸收度比值法和交流示波极谱滴定法简单、快速、灵敏度高。     

再力花残体活性炭的制备及对结晶紫的吸附

以多年生水生植物再力花残体为原料,磷酸为活化剂制备活性炭,其BET比表面积达1174.13 m2·g-1,微孔面积为426.99 m2·g-1,平均孔径为3.23 nm.考察了不同pH、结晶紫初始浓度、吸附时间和吸附温度下,活性炭对结晶紫的吸附性能.结果表明:吸附量基本不随pH变化;吸附过程主要分为快速吸附和慢速吸附2个阶段,符合伪二级动力学方程;在温度为293、303、313 K条件下,吸附过程更符合Langmuir等温吸附方程,最大吸附量分别为409.83、425.53和438.59 mg.g-1,且吸附是一个熵增的自发吸热过程.