B型烟粉虱Bemisia tabaci Gennadius成虫肠道细菌的初步研究

目的在棉花上采集到B型烟粉虱成虫,对其肠道细菌进行分离,为研究肠道细菌类群与其取食的食物之间的关系提供理论参考。方法从B型烟粉虱成虫肠道环境中分离、纯化和培养,获得6个细菌菌株,对其细菌形态、染色反应、培养性状和生理生化反应进行系统研究。结果常规鉴定结果表明,B型烟粉虱成虫肠道细菌6个菌株分别属于微杆菌属(Microbacterium)、爱德华菌属(Edwardsiella)、黄杆菌属(Flarobacterium)、预研菌属(Yokenella)、地杆菌属(Terrabacter)和邻单细胞菌属(Plesiomonas)。结论 B型烟粉虱成虫肠道分离细菌均在25~37℃、pH中性和低NaCl浓度下生长良好,对葡葡萄、甘露醇等绝大部分碳素化合物大都能利用,对氮素化合物利用各异。     

东亚飞蝗肠道细菌的研究

目的从微生态学角度研究东亚飞蝗的营养生理活动。方法从东亚飞蝗自然种群的雌、雄成虫肠道环境中分离、纯化、培养,获得细菌16个属的菌株,对菌体形态、染色反应、培养性状、生理生化反应进行系统研究。结果上述16个细菌菌株分别属于沙雷菌属(Serratia)、短状杆菌属(Brachybacterium)、预研菌属(Yokenella)、肠杆菌属(Penterobacter)、微杆菌属(Microbacterium)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、类芽胞杆菌属(Paenibacillus)、沙门菌属(Salmonella)、棍状杆菌属(Clavibacter)、放线杆菌属(Actinobacillus)、米勒菌属(Moelleralla)、不动杆菌属(Acinetobacter)、埃希菌属(Escherichia)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、克吕沃尔菌属(Kluyvera)、克雷伯菌属(Kleb-siella)。结论东亚飞蝗雌性成虫肠道环境细菌种类为12个,雄性为10个,其中6个菌株相同;数量之间存在明显差异。     

菜青虫幼虫肠道细菌的分离及鉴定

目的为深入研究菜青虫肠道的营养生理,分析其取食消化机制,对菜青虫肠道细菌进行了研究。方法从自然种群的菜青虫肠道环境中按传统分离、纯化、培养,获得细菌5个菌株,对其茵体形态、染色反应、培养性状、生理生化反应进行了系统研究。结果鉴定结果l号菌株为李斯特菌属（Listeria）,2号菌株为皮杆菌属（Dermabacter）,3号菌株为丙酸杆菌属（Propionibacterium）,4号菌株为沙雷菌属（Serratia）,5号菌株为短状杆菌属（Brachybacterium）。结论在菜青虫肠道环境中分离出5个菌株,鉴定出分类地位。其菌株之间的数量具有明显差异,以皮杆菌属数量最多（2×10^8）,需进一步研究该菌的功能及其在菜青虫肠道中的作用。     

中华通草蛉越冬成虫肠道可培养好氧细菌多样性分析

本研究以昆虫微生态学原理为指导探究中华通草蛉Chrysoperla sinica(Tjeder)的肠道菌群构成,为中华通草蛉的营养生理研究及人工繁殖利用提供理论依据和技术基础。采用无菌解剖及纯培养分离检测技术,从雌、雄成虫肠道环境中分离、纯化、培养,获得10个细菌菌株,对菌体形态、染色反应、培养形状、生理生化反应进行系统研究。结果表明,上述10个菌株分别属于摩根氏菌属(Morganella)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、地杆菌属(Terrabacter)、爱德华氏菌属(Edwardsiella)、色杆菌属(Chromobacterium)、热黄杆菌(Flavobacterium thoupophilum)、放线杆菌属(Actinobacillus)、棍状杆菌属(Clavibacter)、邻单胞菌属(Plesiomonas)、预研菌属(Yokenella);越冬期雌、雄成虫肠道细菌的种类和数量存在较大差异,可能与雌、雄成虫不同的营养和生理需求有关,两者关系还需进一步研究。     

黑粉虫幼虫肠道细菌的研究

从黑粉虫幼虫肠道环境中分离、纯化、培养,获得5个细菌菌株,对其培养性状、染色反应、菌体形态、生理生化反应等进行了系统研究.鉴定结果表明：上述5个细菌菌株分别属于金杆菌属（Aureobacterium）、李斯特菌属（Listeria）、微杆菌属（Microbacterium）、莫拉菌属（Moraxella）、短小杆菌属（Curtobacterium）,其中金杆菌属、微杆菌属、短小杆菌属菌也发现于黄粉虫幼虫肠道环境中.通过研究,既可为黑粉虫生产所需微生态制剂提供微生态理论依据,又发掘了微生物资源,丰富了微生物资源库.     

黄粉虫不同虫态肠道细菌分离及鉴定

目的研究黄粉虫肠道细菌的类群与其取食的关系,为进一步开发利用提供理论依据。方法从人工饲养的黄粉虫幼虫、蛹和成虫肠道环境中分离纯化获得9个细菌菌株,对其菌体形态、染色反应、培养性状、生理生化反应进行系统研究。结果研究结果表明,上述9个细菌菌株分别属于放线杆菌属（Actunobacillus）、丙酸杆菌属（Propionibacterium）、柠檬酸杆菌属（Citrobacter）、沙雷菌属（Serratia）、芽胞杆菌属（Bacillus）、皮杆菌属（Dermabacter）、短状杆菌属（Brachybacterium）、棍状杆菌属（Clavibacter）和微小杆菌属（Exiguobcacterium）。结论通过对黄粉虫不同虫态即幼虫、蛹和成虫肠道细菌分离,其细菌种类存在一定差别。     

黑粉虫与黄粉虫幼虫肠道细菌的比较

在黑粉虫和黄粉虫肠道中分别分离获得5株细菌,对其菌体形态、培养性状、染色反应、生理生化反应等进行了系统研究。鉴定结果表明,黑粉虫的5个细菌菌株分别属于金杆菌属(Aureobacterium)、李斯特氏菌属(Listeria)、微杆菌属(M i-crobacterium)、莫拉氏菌属(M oraxella)、短小杆菌属(Curtobacterium);黄粉虫的5个细菌菌株分别属于金杆菌属(Aureobacte-rium)、球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)、微杆菌属(M icrobacterium)、巨大芽孢杆菌(B.m egaterium)、短小杆菌属(Curtobac-terium)。金杆菌属(Aureobacterium)、微杆菌属(M icrobacterium)和短小杆菌属(Curtobacterium)均在2种昆虫肠道中出现。     

窗胸萤肠道细菌分离及鉴定研究

从窗胸萤的5龄幼虫中分离纯化获得10个细菌菌株,并对其菌体形态、染色反应、培养性状、生理生化性状进行了系统研究。鉴定结果表明,上述10个细菌菌株分别属于埃希氏菌属(Escherichia)、金色单胞菌属(Chryseomonas)、放线杆菌属(Actinobacillus)、摩根氏菌属(Morganella)、李斯特菌属(Listeria)、金杆菌属(Aureobacterium)、微杆菌属(Microbacterium)、地杆菌属(Terrabacter)、芽孢杆菌属(Bacillus)和黄杆菌属(Flavibacterium)。     

大莲湖池杉林湿地土壤可培养细菌的分离与鉴定

采用牛肉膏蛋白胨培养基培养,从大莲湖池杉林土壤中共分离得到20个菌落形态不同的菌株。通过对这些菌株的形态、培养特征、生理生化特征的研究以及16S rDNA序列分析,初步确定这些菌株分别属于假单胞菌属(Pseudomonas)、芽胞杆菌属(Bacillus)、红球菌属(Rhodococcus)、北里孢菌属(Kitasatosporia)、金黄杆菌属(Chryseobacterium)、不动杆菌属(Acinetobacter)、黄杆菌属(Flavobacterium)、鞘氨醇杆菌属(Sphingobacte-rium)和丛毛单胞菌属(Comamonas)等9个属细菌。其中芽胞杆菌属和不动杆菌属细菌是优势菌,分离到的红球菌属、北里孢菌属、鞘氨醇杆菌属和丛毛单胞菌属细菌在国内湿地土壤中报道较少。     

药用植物根系土壤可培养粘细菌的分离鉴定

[目的]对药用植物根系土壤可培养粘细菌进行分离与鉴定,探讨药用植物根系土壤粘细菌资源多样性.[方法]采集华南植物园和南岭国家森林公园22种药用植物根系土,利用辅助菌诱导分离技术分离样品中可培养粘细菌;通过菌株显微形态和菌落形态观察,结合16S rDNA基因序列分析,确定分离粘细菌菌株的系统发育地位.[结果]分离获得50株粘细菌,分属于3个科,7个属,其中粘球菌属(Myxococcus)18株,珊瑚球菌属(Corallococcus)11株,孢囊杆菌属(Cystobacter)7株,原囊菌属(Archangium)8株,标桩菌属(Stigmatella)1株,软骨霉状菌属(Chondromyces)4株,匣状球菌属(Pyxidicoccus)1株.粘球菌属和珊瑚球菌属分布最为广泛.[结论]研究发现药用植物根系土壤可培养粘细菌与土壤pH和有机碳含量等环境因子有一定的相关性.粘细菌更适宜在有机质丰富、pH近中性的环境中生长;粘球菌属和珊瑚球菌属的菌株对pH适应性较强,而粘球菌属和孢囊杆菌属的菌株对土壤有机碳含量依赖性不强,在贫瘠土壤中仍有分布.本研究对后续粘细菌资源的开发和利用提供良好的实验材料和理论基础.     

地鳖虫纤溶活性蛋白cDNA序列克隆与毕赤酵母表达

依据已报道的地鳖虫成熟肽cDNA序列设计引物,通过RT-PCR法从地鳖虫(Eupolyphage sinensis Walker)中克隆得到675 bp地鳖虫纤溶活性蛋白 (fibrinolytic protein,EFP)成熟肽编码序列.将此片段克隆到表达载体pPICZα-A中,转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达得到重组表达蛋白,经SDS-PAGE电泳和活性鉴定,表明重组EFP在毕赤酵母中均获得表达,重组表达蛋白相对分子质量为28.2 kD,表达产物分子质量与理论分子质量相符.重组蛋白在毕赤酵母中以分泌形式表达,具有纤溶活性.     

中华真地鳖若虫分龄的研究

通过系统测定刚蜕皮中华真地鳖EupolyphagasinensisWalker若虫腹宽、体长及体重值,得出若虫腹宽、体长及体重值变化有一定的规律,腹宽、体长及体重可以作为若虫分龄的标准。     

中华真地鳖雌虫产卵习性及其卵的发育

在室内饲养条件下,通过对不同月龄的中华真地鳖EupolyphagasinensisWalker雌成虫产卵量调查,并对卵块的质量品级和发育进度进行划分。结果表明1月龄至3月龄中华真地鳖的产卵能力较强;饱满、无破损、形状规则的卵块孵化较好;在卵的各发育阶段,卵块和卵粒的形态变化较明显,以此确立了卵发育的分级标准。     

地鳖虫对小鼠免疫功能的调节作用

研究中华真地鳖Eupolyphaga sinensis Walker免疫调节作用。经口给予小鼠1.89、3.78、7.56g/kg/d地鳖虫水煎萃取物,观察其对4周喂养小鼠免疫调节作用。地鳖虫水煎萃取物对小鼠廓清指数和吞噬指数明显增高;血清溶血素抗体滴度水平增加,小鼠脾细胞抗体生成有促进作用;中、高剂量组NO含量极显著高于空白对照组,碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性只有高剂量组高于对照。试验结果表明地鳖虫对机体免疫有提高的作用,说明地鳖虫具有免疫调节功能,具有较高的资源开发利用价值。     

中华真地鳖在饲养池内的分布格局

运用扩散系数、聚集指数、平均拥挤度、聚块性指数和负二相参数等指标比较分析了中华真地鳖EupolyphagasinensisWalker在饲养池内的空间分布格局。结果显示 ,中华真地鳖在饲养池内的空间分布格局为聚集分布 ,并喜好聚集在饲养池的边缘。随着虫口密度的增大 ,向饲养池中央扩散。     

无土壤基质饲养中华真地鳖

设置中华真地鳖Eupolyphaga sinensis Walker的无基质和有基质饲养条件,研究生长繁育期和越冬期各龄段中华真地鳖的生长、蜕皮、存活率和雌虫产卵情况。有基质饲养条件以饲养土为基质;无基质饲养条件不以任何材料作为饲养基质,只用黑色潮湿的材料对试虫保湿和避光。结果表明:在食料充足的条件下,有、无饲养基质对中华真地鳖的生长发育无明显影响。无基质饲养条件下的生长繁育期大龄若虫和成虫存活率较高,且成虫的月产卵数也相对较高。表明无基质饲养技术可在地鳖虫饲养实践中推广,据此初步设想了无基质饲养地鳖虫的容器构造。     

地鳖虫活性物质的超临界CO_2萃取及其药效

应用超临界流体萃取技术萃取地鳖虫Eupolyphaga sinensisWalker活性物质,采用三因素三水平正交试验方案,考察压力、温度、时间等参数对萃取地鳖虫活性物质萃取量的影响。同时,对萃取产物与水提物进行药效比较。结果表明,在试验设计范围内,萃取压力18 MPa、温度55℃、时间90 min为最佳工艺参数组合,地鳖虫活性物质萃取量最大能达到62.50 mg/g,影响萃取量三因素主次关系为压力>温度>时间。地鳖虫超临界萃取产物对镇痛、消炎和抗凝血有较好的效果,相对于水提物有更好的发展潜力。     

中华真地鳖的生殖系统

通过解剖分析中华真地鳖EupolyphagasinensisWalker雌雄内生殖系统和外生殖器的构造,比较不同生长期雌虫的内生殖系统变化,并依据雌虫外生殖器和最后一腹节的构造叙述了地鳖虫卵鞘的形成过程。结果表明:中华真地鳖雌性附腺和雄性附腺发达;雄性外生殖器的阳体结构较为复杂;雌虫外生殖器、腹末构造与卵鞘表面形态的形成有必然的关系。     

土元粪及浸提液对番茄根结线虫的防治作用

通过室内生测和盆栽试验,研究了土元粪及其浸提液对南方根结线虫的防治作用,并对土元粪有机挥发物成分及低聚壳聚糖进行了分析.结果表明： 土元粪浸提液对根结线虫二龄幼虫具有击倒和致死作用,且随着浓度增加和时间延长而增加.浸提液的浓度≥20%具有明显的抑制线虫卵孵化的作用.盆栽试验表明,番茄根结线虫侵染形成的根结数量随土元粪使用量的增加而减少,相对防治效果随用量增加明显增大,且番茄株高、茎粗和叶片数随着土元粪用量的增加而增加.土元粪成分分析表明,土元粪中低聚壳聚糖含量达4.35%,有机挥发性物质有9大类110种.     

中华真地鳖中肠主要消化酶的活性研究

以中华真地鳖EupolyphagasinensisWalker为研究材料,测定人工饲养和野生地鳖虫在不同生长阶段消化酶的活性以及温度及pH对人工饲养地鳖虫中肠消化酶活性的影响。结果表明,在地鳖虫生长发育过程中,蛋白酶和脂肪酶活性随发育而逐渐增强,淀粉酶活性却随发育而逐渐减弱。在低龄若虫、高龄若虫和成虫阶段,人工饲养地鳖虫蛋白酶活力比野生地鳖虫低,人工饲养地鳖虫淀粉酶和脂肪酶活力比野生地鳖虫高;在30～60℃的范围内,人工饲养地鳖虫蛋白酶、淀粉酶的适宜温度范围为40～50℃,脂肪酶的适宜温度范围为35～45℃;蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的适宜pH范围分别为6.5～7.5,5.6～6.4和7.5～8.5。