dsRNA介导的RNA干扰

在多种生物中 ,外源或内源性的双链ＲＮＡ(ｄｏｕｂｌｅ ｓｔｒａｎｄｅｄＲＮＡ ,ｄｓＲＮＡ)导入细胞中 ,与ｄｓＲＮＡ同源的ｍＲＮＡ则受到降解 ,因而其相应的基因受到抑制。这种转录后基因沉默 (ｐｏｓｔ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌｇｅｎｅｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ,ＰＴＧＳ)机制首先在线虫 (Ｃ .ｅｌｅｇａｎｓ)中得以证实。由于这是一种在ＲＮＡ水平的基因表达抑制 ,故也称为ＲＮＡ干扰 (ＲＮＡｉｎｔｅｒｆｅｒ ｅｎｃｅ) ,简称ＲＮＡｉ[1] 。随后发现 ,在各种生物 ,如果蝇[2 ] 、拟南芥菜[3 ] 、及小鼠[4] 等均存在ｄｓＲＮＡ介导…     

研究基因转录的RT-PCR技术

ＤＮＡ模板序列的转录调控是基因表达多级调节过程的关键 ,细胞周期中基因转录水平的改变应激细胞发育、分化及正常生理功能的多种信号转导。疾病或其它因素也应激转录水平变化 ,从而改变各种ｍＲＮＡｓ的稳定性。因此基因的ｍＲ ＮＡ水平分析 ,在基因调控研究领域是必不可少的。ｍＲＮＡ的常规分析方法是Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｓ、ＲＮＡｄｏｔ/ｓｌｏｔｂｌｏｔ、核酸酶保护法(ｎｕｃｌｅａｓｅｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ)和原位杂交 (ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ)。而ＰＣＲ技术的应用开创了ｍＲＮＡ分析新方法[1 -3] :ＲＮ…     

反义RNA及其在植物学研究中的应用

反义ＲＮＡ最初发现于细菌中,它们是一些较短的、散布的转录产物[1],本身缺乏编码能力,但可以通过碱基配对的方式与靶ＲＮＡ的特定互补区域结合,从而阻抑基因的正常表达,因此,反义ＲＮＡ是高度特异性的基因表达抑制因子。1　自然界中存在的反义ＲＮＡ参与基因表达调控的反义ＲＮＡ是在原核生物中发现的。一些实验结果表明,在质粒的复制、转座子的转座作用及噬菌体的发育进程中,反义ＲＮＡ的调控起着至关重要的作用。ＣｏｌＥ1以及其他相关质粒的复制过程中,ＤＮＡ的延伸起始于一种特殊引物的形成。而这一引物所在的区段,亦可产生与引物本身5…     

降钙素／降钙素基因相关肽基因前体RNA的加工

降钙素和降钙素基因相关肽是由一个基因表达出的两种功能完全不同的多肽激素,其基因的表达主要在ＲＮＡ水平上受到调控,前体ＲＮＡ在加工成为成熟ＲＮＡ的过程中,在不同的组织中经过不同的剪接形成不同的ＲＮＡ。其剪接的特异性受到顺式元件和反式因子的调控,基因的ｅｘｏｎ４上游剪接受点和下游ｐｌｏｙＡ位点均存在弱的加工位点,通过增强子序列使之产生选择性剪接,另外,可能存在组织特异的反式剪接因子。     

真核生物tRNA基因的表达

真核生物ｔＲＮＡ基因的表达金由辛（中科院上海生化所分子生物学国家重点实验室,上海２０００３１）真核细胞的生长周期真核生物ｔＲＮＡ基因的表达研究远落后于蛋白质基因的表达研究。原因很明显：１。ｔＲ－ＮＡ基因表达的终产物为ＲＮＡ,它在中心法则遗传信息传递过程中才走了半程;2。蛋白质基因表达受基因工程的推动。     

RNAi：基因功能研究新途径

随着基因组结构深入研究,应用新的方法、思路探讨细胞基因功能已成必要。已证实：双链ＲＮ在多种生物中是导致细胞基因沉默的重要信号分子。ｄｓＲＮＡ介导的基因阻抑现象是反映基因功能、表达调控、缺陷识别等重要手段。ｄｓＲＮＡ介导阻抑特异基因表达的机制还不清楚。     

基因沉默：获得性免疫的新途径

基因沉默 (ｇｅｎｅｓｉｌｅｎｃｉｎｇ)首先发现于转基因植物。发生沉默的基因可以是外源性转移基因 ,也可以是入侵的病毒或宿主内源性基因。双链ＲＮＡ(ｄｓＲＮＡ)作为启动因素或中间体为不同生物基因沉默所共有。通常 ,基因沉默发生在两种水平上 ,一是由于ＤＮＡ甲基化、异染色质化及位置效应等引起的转录水平上的基因沉默 (ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌｇｅｎｅｓｉ ｌｅｎｃｉｎｇ ,ＴＧＳ) ,另一种是在基因转录后水平上通过对目标ＲＮＡ特异性降解而使基因失活的转录后基因沉默 (ｐｏｓｔ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌｇｅｎｅ…     

酿酒酵母中的RNA解旋酶

ＲＮＡ解旋酶是一类能解开双链ＲＮＡ的酶 ,存在于所有生物体中 ,其家族成员在进化上具有保守序列。ＲＮＡ解旋酶属于分子伴侣 ,对于确保ＲＮＡ分子的正确折叠以及保持和修饰其特定的二级、三级结构必不可少。在核转录、前体ｍＲＮＡ剪接、核糖体生物发生、核质转运、翻译、ＲＮＡ降解以及结构基因表达等过程中ＲＮＡ解旋酶都发挥了一定的作用。1 .解旋酶的结构ＲＮＡ解旋酶大部分属于蛋白质超家族Ⅱ (ＳＦⅡ ) ,包含七个保守序列 (图 1 ) [1] 。除核心区域外 ,多数ＲＮＡ解旋酶具有不同的Ｎ末端和Ｃ末端部分 ,可能与底物专一性有关。目前 ,…     

SAR与植物转基因沉默的消除

随着转基因技术在各上应用领域的深入和发展,转基因沉默现象已引起越来越多的关注。转基因沉默主要发生在转录或转录后水平,涉及核酸的三种相互作用,即：ＤＮＡ－ＤＮＡ、ＤＮＡ－ＲＮＡ、ＲＮＡ－ＲＮＡ。这是植物基因表达调控的具体表现之一,也是外源基因插入后生物体的一种自我保护。ＳＡＲ协同转基因进行转化,可以消弱宿主ＤＮＡ对外源基因的不利影响。实验证明,在稳定整合的转基因植物中,ＳＡＲ提高了整体表达水平,并降     

RNA的选择性加工对果蝇性别决定的作用

ＲＮＡ的选择性加工是真核生物基因表达调控的重要方式之一，同一种ｍＲＮＡ前体通过ＲＮＡ的选择性拼接可产生几种不同的ｍＲＮＡ，从而翻译出不同的蛋白质。ＲＮＡ的选择性加工对真核生物的发育调控是非常重要的，本文概述其在果蝇（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）的性别决定过...