一种操作简便的组合式板状电泳槽

为了简化常规电泳操作,我在实际工作中研制了一种组合式无胶封板状电泳槽,可显著地简化操作,节省时间。现介绍如下。 一、电泳槽结构特点 采用组合方式 由三块部件构成完整电泳槽。上板与下板合拢后构成凝胶模板,倒入胶液后利用凝胶本身的封固作用使上下板顶端构成上电极槽。     

可同时作10块聚丙烯酰胺凝胶平板电泳的潜水式电泳槽

用凝胶平板电泳分析多个样品时,必须保证各板电泳条件严格一致。因此,最好是在同一电泳槽中做许多块平板的同时电泳。Anderson等的多重平板电泳装置较好地解决了这一问题,但要使用大量铂丝,而且结构复杂。我们结合自己的条件,设计制作了一台大型潜水式电泳槽,结构比Anderson等人所制做的装置简单得多,成本也低,而效果令人满意。电泳槽结构见图1。电极板是将电解用高     

一个多用途的垂直升降电泳装置

本电泳装置经过多次实验,表明仪器性能良好,可满足各种电泳的要求。它具有活动的上槽,能调节上下的距离直至250毫米,槽的两侧至少可同时做二块凝胶板,便于比较实验。凝胶板的大小和厚薄可用不同长度的玻板和不同规格的衬条(宽窄、长短、厚薄)来调节凝胶模框。本电泳槽不仅能做单向或双向电泳,还可作盘状电泳。因此是一种多用途的电泳装置。     

可同时作10块聚丙烯酰胺凝胶平板电泳的潜水式电泳槽

用凝胶平板电泳分析多个样品时,必须保证各板电泳条件严格一致.因此,最好是在同一电泳槽中做许多块平板的同时电泳.Anderson等的多重平板电泳装置较好地解决了这一问题,但要使用大量铂丝,而且结构复杂. 我们结合自己的条件,设计制作了一台大型潜水式电泳槽,结构比Anderson等人所制做的装置简单得多,成本也低,而效果令人满意. 电泳槽结构见图1.电极板是将电解用高     

一种新的柱状电泳方法

植物生理各领域都大量地运用电泳技术来进行生理生化分析。但目前普遍使用的管状或板状电泳都各有其不足。管状电泳的操作费工费时,要逐管地进行封头、灌胶,加水做平面以及玻璃管在电泳槽上的安装拆御等等工作。板状电泳则要进行防漏胶处理,如操作不当则易失败。我们经反复试验,吸取     

一步法电泳分析肌联蛋白亚型和肌球蛋白重链

目的为研究超大分子量肌小节蛋白肌联蛋白(titin)的生理病理功能,在一次电泳过程中同时分离titin各亚型和中分子量肌小节蛋白肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)。方法使用16cm×18cm垂直电泳系统,在电泳板下1/3灌注10g/L SDS-PAGE胶,上2/3灌注60g/L SDS-琼脂糖(SDS-VAGE)胶。低温8℃下持续电泳5h,在电泳板上层以SDS-VAGE胶电泳分离titin亚型,下层以SDS-PAGE胶电泳分离MHC。电泳后VAGE胶使用银染法标记titin各亚型,PAGE胶使用考马斯亮蓝染色法标记MHC。结果 titin各亚型得到有效的分离,目标蛋白条带显示清晰,与其分子量大小一一对应,分离效果明确。结论一步法垂直电泳系统可应用于超大分子量蛋白的电泳,同时可分离多个分子量差距大的蛋白,提高蛋白电泳实验效率。     

蚕核糖核酸结构与功能的研究——Ⅰ.长距离垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳装置的改进及蚕后部丝腺体小分子RNA的分离

对长距离平板垂直聚丙烯酰胺电泳的装置作了改进以后有如下一些特点: (1)装置结构简单可靠,其基本材料只需二块有机玻璃板和一根乳胶管; (2)制胶长度可达40厘米或更长,但只需一次灌胶; (3)不需要在装置边缘涂抹任何脂类物质,底部也不需要填塞任何蜡泥塑料,而无渗漏现象; (4)制胶厚度可达0.5～2.5毫米。由于以上特点,而使本装置优于其他垂直平板电泳装置。用本装置对五龄蓖麻蚕和家蚕后部丝腺体小分子RNA进行分离,分离效果和重复性良好。     

蚕核糖核酸结构与功能的研究 Ⅰ.长距离垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳装置的改进及蚕后部丝腺体小分子RNA的分离

对长距离平板垂直聚丙烯酰胺电泳的装置作了改进以后有如下一些特点:(1)装置结构简单可靠,其基本材料只需二块有机玻璃板和一根乳胶管;(2)制胶长度可达40厘米或更长,但只需一次灌胶;(3)不需要在装置边缘涂抹任何脂类物质,底部也不需要填塞任何蜡泥塑料,而无渗漏现象;(4)制胶厚度可达0.5～2.5毫米。由于以上特点,而使本装置优于其他垂直平板电泳装置。用本装置对五龄蓖麻蚕和家蚕后部丝腺体小分子RNA 进行分离,分离效果和重复性良好。     

介绍一种改良的冷却装置的垂直板电泳槽

介绍一种改良的带冷却装置的浸入式垂直板电泳槽。用不会变形的有机玻璃制作固定架及控制凝胶厚度的隔条,以代替市售的可压缩的U形橡胶套,以螺丝固定玻璃板,用医用硅胶管密封以完全分隔正负极电泳缓冲液。经试用于蛋白质及核酸电泳,效果甚佳。     

琼脂糖凝胶电泳

Ⅰ琼脂糖凝胶 琼脂糖凝胶电泳是在卧式电泳装置上进行的,因为:(1)它为低浓度的琼脂糖凝胶提供了较好的支持体系,(2)在电泳过程中较少发生扭曲,(3)所得的DNA带比较直。最容易操作的凝胶体系,是将琼脂糖凝胶完全浸没在电泳缓冲液之下约1毫米     

变性梯度凝胶电泳装置及其在DNA突变检测中的初步应用

设计了一套适用于变性梯度凝胶电泳(DGGE)的装置。该装置为带缓冲液循环系统、可精确控制温度的夹芯式双垂直电泳槽,其整个凝胶板内的控温精度和均匀度均在±0.5℃范围内。对其在DNA突变检测中的应用作了初步的探讨。通过PCR-DGGE连用成功地分离了野生型p53基因和含点突变的P53基因(第141密码子由TGC突变为TAC)。     

不经染色直接从SDS-PAGE制备凝胶中准确切下所需蛋白条带的方法

蛋白样品的垂直板SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE)不但是一种最常用的蛋白分析方法,也经常用于蛋白质的制备。从电泳凝胶上纯化蛋白,一般都要先用考马斯亮蓝染色,然后切下所需的蛋白条带。这里介绍一种可以不染色,直接从SDS-PAGE制备凝胶上准确切割所需蛋白条带的方法。与染色后切胶的方法相比,这种方法简单、省时,分离到的蛋白容易从胶中洗脱回收,并可明显提高回收率,而且省去了令人烦怖的从回收的蛋白中脱去染色时结合的染料的问题。作者曾用此方法分离过多种蛋白,屡试不爽。这种方法与一般的SDS-PAGE制备电泳的差别主要在电泳结束后对凝胶的处理上。     

绿豆淀粉胶电泳在同功酶研究中的应用——关于淀粉胶电泳方法的改进

淀粉胶电泳是一种以淀粉凝胶作为介质的电泳方法。这种方法自1955年由Smithies首创以来,已普遍用于蛋白质化学的研究,特别是在同功酶的研究中使用较多。淀粉胶电泳的主要优点在于它的系统简便和无毒性。淀粉凝胶中葡萄糖残基所构成的三维网状结构虽不如聚丙烯酰胺凝胶那样均匀一     

哺乳类基因工程的一些实验操作 实验4 琼脂糖凝胶电泳

一、琼脂箱凝胶的制备 1．电泳槽与点样孔梳的选择进行琼脂糖凝胶 电泳的电泳槽通常有水平板型和垂直板型两种。这里 我们选择较简便，应用最广的平板型电泳槽。点样孔 杭可根据样品数目、点样量等作出选择。对于一定量 的样品来说．，宽而薄的梳子可产生较细而平直的带，适 合于酶切图谱的分析等，较狭的梳子可增加待测样品 检出的灵敏度，适合于印迹杂交检测哺乳类基因组中 单拷贝基因或DNA样品的量较少等情况。点样孔梳 选定后，再根据凝胶的厚度，就可算出每一点样孔中可 以加入的样品体积。     

凝胶电泳槽的简易快速密封法

为解决电泳槽的漏胶问题,我们在长期的电泳实践中,摸索出一种简单、快速、经济、实用的PMMA(聚甲基丙烯酸甲酯)塑料密封法,经反复使用效果良好。现介绍如下: 1.PMMA密封胶的配制及其使用方法 称PMMA粉末1g(有机玻璃粉末亦可),置于具磨口塞的玻璃瓶中,然后加入8ml三氧甲烷,按紧瓶塞     

一种简便的薄层等电聚焦分析电泳装置

薄层等电聚焦分析电泳是近年来发展起来的一种高分辨率的蛋白质分析技术。等电聚焦是利用两性载体电解质,在外加电场的作用下,形成稳定的pH梯度,使得蛋白质、酶及多肽按其各自不同的等电点聚焦在相应的pH位置上,以便达到分离的目的。薄层等电聚焦分析电泳可以在一块薄层胶片上分析多个样品,操作方便、分辨率高,所以被人们广泛地采用。本文介绍一种简便的薄层等电聚焦分析电泳装置,它适用于我们现有的一般实验室条件,勿需进口成套贵重设备,同样能得到满意的分析结果。 1.电泳装置的配备我们自制了简易的电极架(图1)。上架用     

聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳分离血红蛋白的研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳,借助圆盘电泳仪的简易装置,对正常血红蛋白及异常血红蛋白(Hb)等进行了分析,获得满意效果。一、方法 1.凝胶制备 40％聚丙烯酰胺液(丙烯酰胺38.4克及甲叉双丙烯酰胺1.6克溶于蒸馏水至100毫升)1份,20％两性载体(Ampholine,国产、pH4—10)0.5份,蒸馏水3份,0.25％过硫酸铵液(临用前配制)2份,混匀,立即分装于内径4毫米,长9厘米的玻管中,胶长6厘米,日光灯下聚胶(约2小时),待胶聚合后,加样     

第25届国际生物学奥林匹克竞赛试题实验1·细胞和分子生物学

正总分:64.5分时间:90 min注意:所有的DNA电泳设备将在考试开始50 min后由助理同时开启。在电源开启前,请保证你已经将你的样品按照试卷上的指南放到了凝胶内。一旦超过时间,你将不允许进行凝胶电泳。作为提醒,助理将敲3次钟。第1次钟提醒你电泳将在20 min后开始。第2次钟提醒你电泳将在2 min后开始。第3次钟表示电泳已经结束。当第3次钟敲响时,你将被要求把你的胶从电泳槽中     

双水相电泳分离蛋白质的研究

近几年来,随着生物技术的迅速发展,制备型电泳技术的研究得到了重视。然而由于技术上的原因,大规模的制备型电泳技术的研究还未能取得突破。阻碍电泳放大的一个主要问题是由于电加热作用而导致的热对流对电泳分离的破坏。为解决这一问题,人们提出了许多方法。例如,在太空的微重力环境下进行电泳,应力稳定自由流动电泳,循环等电聚焦和区带电泳,色谱电泳和等电膜等电聚焦等。这些方法在电泳放大上都取得了一定的进展,但各有其局限性。最近,Clark提出利用双水相的液液界面阻止热对流的设想,为开发大规模的制备型电泳技术开辟了一条新途径、Raghava Rao等在两种双水相体系上施加电场后成倍地缩短了分相时间。Levine和Bier采用U型管电泳装置研究了双水相体系中血红蛋白的电泳迁移率,观测到界面有阻滞作用。Clark在柱型电泳装置中进行了一组双水相萃取肌红蛋白的简单实验。在10mA的恒电流下电泳40min之后,肌红蛋白的分配系数为7.5,而当电场反向后,分配系数变为0.04,界面阻力并不显著,两者结论并不一致。     

滇金丝猴和菲氏叶猴血红蛋白及几种同功酶的比较研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对滇金丝猴和菲氏叶猴血红蛋白和几种同功酶在相同电泳条件下进行了分析和比较。 电泳:采用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳(8.9×0.5cm),T=6.5％;聚丙烯酰胺凝胶板电泳(14×13cm),T=7.2％,pH8.3的Tris—Glycine缓冲液;北京六一仪器厂DYY—Ⅲ型电泳仪;电流3mA/管、2mA/cm~2;电流时间3h(圆盘),5h(板)。染色参考Davidson et al.(1965)、Tashion et al.(1971)、Mikio Kuboki(1978)、牛满江、童弟周(1978)等的方法并略加修改。