人乳头瘤病毒16型(新疆株)E7基因的克隆与突变研究

目的：克隆分析人乳头瘤病毒16型(HPV16)新疆株的研基因;并对E7基因进行突变改造,以比较野生型与突变型HPV16E7基因的功能。方法：根据从中国新疆维吾尔族妇女宫颈癌活检组织标本中提取的DNA,进行PCR扩增获得HPV16E7基因,然后分别将其克隆到pMD18-T载体上进行DNA序列分析。根据HPV16E7基因的特点,分别设计点突变引物,用PCR的方法进行HPV16E7基因的点突变。结果：PCR检测显示扩增出HPV16(新疆株)E8基因;测序结果表明HPV16-XJ的研基因全长297bp,与德国标准株一致;利用设计突变位点的引物经PCR扩增,经序列测定后,分别得到了第70、172、271位碱基突变的HPV16E7基因;分别构建了野生型与单、双、三点突变的重组质粒pMD18-T-HPV16E7。结论：人乳头瘤病毒16型(新疆株)E7基因结构与德国标准株相同。HPV16E7基因多点突变的改造,为探索HPV16E7基因功能的变化和开展疫苗研究奠定了理论基础。     

巢－PCR分型检测人乳头状瘤病毒同源序列

采用L₁通用引物MY 11/9介导聚合酶链反应(PCR),从人生殖道疣、癌组织中扩增人乳头状瘤病毒(HPV)同源序列得394-552bp DNA片段,再以内引物GP5/6介导第二次扩增得139-154bp片段,然后根据Rsa Ⅰ酶切扩增片段的电泳图谱来分出HPV型别,无需特异型别的探针进行分子杂交,35例宫颈癌和30例生殖器疣HPV同源序列检出率分别为85.75%和96%;12例卵巢腺癌检出HPV同源序列者7例.本法简便、灵敏、可靠,并适合于临床应用.     

HPV与喉癌研究新进展

头颈部肿瘤(Head and Neck Cancer,HNC)包括口腔,咽部,鼻腔以及喉部的肿瘤,拥有较高的发病率和复杂的发病机制。而在所有头颈部肿瘤中,喉癌占所有恶性肿瘤中的3%以上,是全球第六大最常见的恶性肿瘤,因此喉癌在所有HNC中应受到特殊的关注。人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是小的双链DNA病毒。已有大量研究表明HPV感染与多种肿瘤的发生及预后密切相关。而目前HPV感染对HNC,尤其是对于口咽部肿瘤的致癌作用和临床意义引起学者们的重视,但是HPV感染对喉癌的作用目前尚未阐明。因此我们回顾了近年来关于HPV感染与喉癌相关性及其潜在致癌性的研究。尽管目前对于HPV在喉癌中的检出率多中心研究结果存在一定差异,但初步的研究已经表明HPV高危亚型的感染,如HPV16和HPV18等,与喉癌的发生存在一定的相关性,HPV病毒DNA与肿瘤细胞存在基因整合,同时喉癌细胞中P16的表达增高。但针对HPV感染后导致的相关疾病的预防及可行的精准性治疗措施目前尚不十分明确,还有待于进一步研究。     

兰州地区宫颈癌组织标本中HPV16感染情况的初步分析

人乳头瘤病毒的感染与宫颈癌有密切关系。通过兰州地区宫颈癌患者的HPV感染情况的分析对HPV16与宫颈癌之间的关系进行了研究。采用套式PCR方法,以HPV DNA的早期基因E6,E7和结构基因L1为扩增目的基因,对13份兰州地区宫颈癌组织进行扩增,将扩增阳性片段测序,并与HPV16标准序列进行比较,13份组织中有12份扩增到了HPV的目的基因。证实了HPV与宫颈癌有密切关系。     

人乳头瘤病毒的致瘤性及机制

高危型人乳头瘤病毒(HPV)可能引发多种癌症,公认的如宫颈癌和宫颈上皮内瘤变.近年来的研究表明,HPV还与头颈部鳞癌、食管癌及乳房癌等的发生密切相关.HPV引起头颈部鳞癌的机制在某种程度上与宫颈癌相似,但又有所不同.因此,阐明HPV的致癌机制对于HPV相关肿瘤的治疗具有重要意义.     

聚合酶链反应检测宫颈癌中HPV16E6／E7相关序列

本文报告了采用聚合酶链反应(即PCR技术)检测人宫颈癌中人乳头瘤病毒16型(HPV16)的E_6/E_7相关序列。在正链引物(SP)和反链引物(ASP)的诱导下,以二步温控法聚合酶链反应对34例人宫颈癌组织DNA进行检测,发现宫颈癌中HPV16E_6/E_7相关序列存在的阳性率达67.6％(23/34)。本研究结果提示:HPV16可能在宫颈癌的发生发展过程中起重要作用,采用PCR技术选择性地检测HPV16的转化基因(E_6、E_7)对深入探讨宫颈癌发生的机理、早期发现宫颈癌患者等有重要意义。     

外阴皮肤营养不良组织中人乳头瘤病毒DNA的检测

采用Southern Blot分子杂交方法检测了9例外阴皮肤营养不良组织中人乳头瘤病毒DNA的存在情况。结果显示8例增生型营养不良组织中,2例HPV-16阳性,1例HPV33阳性,在3例组织中探测到HPV16相关序列,在1例混合型中也检测到HPV16相关序例,HPV DNA的总检出率为77％。结果提示外阴皮肤营养不良的发生可能与HPV感染有关。     

反向点杂交法快速诊断人乳头瘤病毒的基因型

人乳头瘤病毒(HPV)是迄今已被肯定的少数DNA肿瘤病毒之一,在女性下生殖道肿瘤中的检出率高达90％以上。HPV的DNA检测和分型对女性生殖道肿瘤的病因学和癌情预报具有重要意义。HPV异质性很大,用目前国内外传统的DNA诊断方法诊断未知样品的基     

反向点杂交法快速检测HPV基因型的临床应用

应用反向点杂交法(RDB)的原理,针对HPV 6B, 11, 16, 18, 31, 33和35设计了7条序列作为未标记的特异性寡核苷酸(SSO)探针,分别固定在尼龙膜条上,形成7个点,再与经PCR扩增的样品DNA序列杂交,即可在一个膜条上分辨出这7型HPV中的任一型.此法快速简便,特异性高,不存在假阳性;且因PCR灵敏度高,亦不易出现假阴性.用PCR-RDB法检测保存的宫颈癌组织石蜡包埋标本32例,结果:HPV16阳性22例(68.8%),HPV18阳性5例(15.6%),HPV16/18双重感染2例(6.3%),阴性仅3例(9.3%).     

1株人乳头瘤病毒6型山东地方株的全基因组序列分析

人乳头瘤病毒6型(Human papillomavirus type 6,HPV6)是引起生殖器疣与复发性喉乳头瘤的主要病原体之一.为明确2019年济南市1例尖锐湿疣患者的病毒基因组序列特征,本研究提取其尖锐湿疣组织标本总DNA,分两段进行HPV6全基因组PCR扩增和步移法Sanger测序,将拼接后的序列与全球36条不同来源的HPV6全基因组序列进行对比分析.结果 显示,1013/19/JN/CHN/HPV6株(以下简称1013/HPV6)基因组全长8031bp,属于变异谱系B1,与全球不同地区HPV6分离株序列的同源性为98.4％～99.9％.1013/HPV6株与B1亚谱系参考株AF092932全基因组序列相比具有19个核苷酸变异位点,分布在7个开放阅读框架(Open Reading Frames,ORFs)和非编码区内.本研究首次分析了分离自中国大陆的HPV6全基因序列特征,研究结果为HPV分子进化的进一步研究和分型诊断试剂的优化提供了数据.     

Biofortification of crops with seven mineral elements often lacking in human diets – iron, zinc, copper, calcium, magnesium, selenium and iodine

The diets of over two-thirds of the world's population lack one or more essential mineral elements. This can be remedied through dietary diversification, mineral supplementation, food fortification, or increasing the concentrations and/or bioavailability of mineral elements in produce (biofortification). This article reviews aspects of soil science, plant physiology and genetics underpinning crop biofortification strategies, as well as agronomic and genetic approaches currently taken to biofortify food crops with the mineral elements most commonly lacking in human diets: iron (Fe), zinc (Zn), copper (Cu), calcium (Ca), magnesium (Mg), iodine (I) and selenium (Se). Two complementary approaches have been successfully adopted to increase the concentrations of bioavailable mineral elements in food crops. First, agronomic approaches optimizing the application of mineral fertilizers and/or improving the solubilization and mobilization of mineral elements in the soil have been implemented. Secondly, crops have been developed with: increased abilities to acquire mineral elements and accumulate them in edible tissues; increased concentrations of 'promoter' substances, such as ascorbate, β-carotene and cysteine-rich polypeptides which stimulate the absorption of essential mineral elements by the gut; and reduced concentrations of 'antinutrients', such as oxalate, polyphenolics or phytate, which interfere with their absorption. These approaches are addressing mineral malnutrition in humans globally.     

乙型脑炎患者脑脊液和血浆氨基酸代谢的变化

本文采用气相色谱法对５７例乙型脑炎患者极期和２１例恢复期患者的脑脊液（ＣＳＦ）和血浆１４种游离氨基酸浓度进行分析。结果表明,乙脑极期ＣＳＦ游离氨基酸浓度除苏氨酸、丝氨酸值低于正常值外,其它氨基酸值均增高,其中谷氨酸、鸟氨酸、赖氨酸、缬氨酸、脯氨酸值上升明显（ａｌｌＰ＜０．０１）,至乙脑恢复期不同幅度下降。乙脑极期血浆游离脯氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、鸟氨酸、谷氨酸浓度高于正常值,而其它８种氨基酸值均下降明显,至乙脑恢复期,多数氨基酸恢复至接近正常水平。实验提示,乙脑病毒能明显影响血浆和ＣＳＦ中氨基酸的含量,而二者具有代谢差异。     

羟基磷灰石／聚乳酸及其共聚物复合生物材料

阐述了羟基磷灰石、聚乳酸和聚乙醇酸各自的结构性能特点;总结了两者通过复合有望得到具有良好力学性能、生物相容性、骨传导性的可降解羟基磷灰石／聚乳酸复合生物材料;最后展望了这类复合生物材料的发展方向。     

Identification of specific binding sites for leukotriene C4 in human fetal lung

Specific leukotriene C₄ (LTC₄) binding sites were identified in membrane preparations from human fetal lung. Specific binding of [³H]-LTC₄ represented 95 percent of total binding, reached steadystate within 10 minutes and was rapidly reversible upon addition of excess unlabeled LTC₄. Binding assays were performed at 4°C under conditions which prevented metabolism of [³H]-LTC₄ (80 mM serineborate, 10 mM cysteine, 10 mM glycine). Under these conditions, greater than 95 percent of the membrane bound radioactivity, as analyzed by high performance liquid chromatography, co-eluted with the LTC₄ standard. Computer-assisted analyses of saturation binding data showed a single class of binding sites with a dissociation constant (K_d) of 26 + 6 nM and a density (B_max) of 84 ± 18 pmol/mg protein. Pharmacological specificity was demonstrated by competition studies in which specific binding of [³H]-LTC₄ was displaced by LTC₄ and its structural analogs with inhibition constants (K_j) of 10 to 30 nM, whereas LTD₄, diastereoisomers of LTD₁, LTE₄ and the end organ antagonist FPL 55712 were 150 to 700 fold less potent competitors than LTC₄. These results provide evidence for specific, reversible, saturable, high affinity binding sites for [³H]-LTC₄ in human fetal lung membranes.     

转铁蛋白受体单链抗体与BDNF融合蛋白的表达及活性鉴定

脑源性神经营养因子（BDNF）对中枢神经系统的多种神经元具有营养,修复和保护功能,但因无法通过血脑屏障限制了其应用。本文利用抗转铁蛋白受体（TfR）的单链抗体（ox26-scFv）作为脑转运载体,分别扩增单链抗体和BDNF基因,插入pTIG-Trx载体,构建融合基因表达载体pTIG-Trx/scFv-BDNF,在大肠杆菌BL21（DE3）中实现了高效表达。经Ni-NTA金属鏊合层析柱纯化后,在41Kd处可见目的纯化条带。大鼠GH3细胞免疫酶染色显示,ScFv-BDNF融合蛋白能与转铁蛋白受体特异性结合。同时能够促进鸡胚背根节神经突起的生长,具备了BDNF的生物学活性。为使BDNF能够跨越血脑屏障成为中枢神经系统的治疗药物打下了实验基础。     

我国现有的金鱼品种的分类及其系统发育的探讨1)

一、引言 金鱼是我国广大人民乐于饲养的一种家养观赏鱼类。它是由野生红黄色鲫鱼演变而来的。明朝李时珍在《本草纲目》中记载:金鱼“述异记载晋桓冲游庐山,见湖中有赤鳞鱼,即此也。”他还写道:“自宋始有畜者,今则处处家养玩矣。”因此可以认为金鱼起源于我国晋朝(公元265—420年间)。至今已有一千多年的历史了。 李璞(1959)报道了我国的金鱼品种已有二十余个。徐金声等(1980)报道有143个之多。耶么迄今为止我国的金鱼品种究竟有多少呢?为了弄清我国的金鱼品种资源,作者曾在北京等十七个省市的各大公园和花木公司所属鱼场作了调查。在调查过程中,我们     

平阳霉素对鸡胚绒毛尿囊膜血管内皮细胞生长的影响

利用鸡胚绒毛尿囊膜研究平阳霉素对血管内皮细胞移动和增殖的影响.(1)内皮细胞移动采用组织学切片、常规H-E染色,通过观察不同胚龄鸡胚CAM的组织学结构即可判定毛细血管EC移动.发现鸡胚在第8、10、12天胚龄时CAM EC都位于外胚层绒毛膜上皮之下,随胚龄增大,EC逐渐由中胚层移向外胚层.而孵育至第14天后(16、18天)CAM毛细血管EC大都移至外胚层上皮之上,紧贴壳膜.PY可明显抑制EC移动,使第18天胚龄时早已该移至外胚层之上的毛细血管EC仍停留在外胚层上皮之下.(2)内皮细胞增殖用放射自显影技术对第10天胚龄的鸡胚CAM EC进行3H-TdR标记,标记率即反映EC增殖的程度.同时用血管生长抑制剂PY对比研究对EC增殖的影响.对照组和实验组EC 3H-TdR标记率分别为41.5±3.4%和20.3±1.5%,PY可使CAM EC的DNA合成减少,即抑制EC增殖.鸡胚CAM可作为研究EC移动和增殖的体内模型,用于血管生成刺激因子和抑制因子的筛选和研究.     

维生素E对三氯乙烯急性染毒大鼠肝脏脂质过氧化与抗氧化酶的影响

本文观察了用抗氧化剂维生素E预处理后,三氯乙烯(3000mg/kg B-W-) 一次性经口染毒24h 大鼠肝脏的超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶等抗氧化酶活力及丙二醛含量的变化,结果表明三氯乙烯染毒组肝脏中丙二醛含量、超氧化物歧化酶活力及血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶活力均高于对照组(P< 0-01) ;而维生素E干预组的丙二醛含量、超氧化物歧化酶活力及血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶活力均分别低于三氯乙烯染毒组(P< 0-01) ,说明三氯乙烯急性染毒可引起肝脏脂质过氧化反应及肝损害,肝脏超氧化物歧化酶活力升高可能是机体受自由基及脂质过氧化反应刺激而诱导产生的一种适应性反应,维生素E对三氯乙烯所致的肝损害有一定的保护作用。     

An updated angiosperm classification

DAHLGREN, C, 1989. An updated angiosperm classification. A new two-dimensional diagram, reflecting the system of classification of the angiosperms, is presented. It combines the dicotyledon diagram in G. Dahlgren (1989) and an adapted monocotyledon diagram after that in Dahlgren (1985) in a single diagram. An updated monocotyledon taxonomy is presented and the classification is appended.