基因枪在水稻遗传转化中的应用及其转化技术的优化

1983年Zambryski等人用根瘤农杆菌介导法进行烟草基因转移,获得了世界上首例转基因植株.随后,应用DNA直接导入技术如电击法(electroporation)和PEG介导法(PEG—mediated)成功地获得了转基因水稻植株.近年来,随着基因枪技术的建立和发展,水稻遗传转化成功的报道逐年增多.目前基因枪技术在植物遗传转化中的应用超过了根瘤农杆菌介导和其它转化方法的应用.这是因为基因枪转化技术不受植物种类的限制,不需要以原生质体作为转化的受体,可以将外源基因直接导入细胞、组织或器官,因而克服了根瘤农杆菌     

影响籼稻基因枪法遗传转化效果的几个因素的研究(简报)

基因枪转化技术在水稻的遗传转化上已被广泛地应用并获得显著的成效。与原生质体转化法相比较,基因枪法具有不受或少受基因型限制的优点且提高了转化效率,但对籼稻,仍有不少问题需要解决,转化系统尚须进一步完善。因此有必要对影响转化频率的因素进行深入的研究。我们在以barnase基因对籼稻的遗传转化以诱发工程雄性不育的研究中,特别注     

基因枪转化小麦主要影响因素细述

基因枪转化是目前小麦遗传转化的主要技术之一,高效的基因枪转化系统对于转基因小麦新品种培育、候选基因功能鉴定和功能基因组学研究具有重要意义。本文综述了影响基因枪转化小麦效率的主要因素,包括基因型、外植体、植物生长调节剂、轰击参数、筛选体系等,以期为进一步改进小麦基因枪转化技术,提高基因枪转化小麦的效率提供参考。     

基因枪转化技术及其在禾谷类作物遗传转化中的应用

基因枪转化法广泛用于禾谷类作物的遗传转化研究,是目前禾谷类作物遗传转化的有效方法。简要介绍了基困枪转化法的产生与发展、转化的特点以及影响转化频率的主要因素;系统地概述了基因枪法在禾谷类作物遗传转化的应用。     

农杆菌介导法与基因枪轰击法结合在植物遗传转化上的应用

根癌农杆菌介导法(Agrohacterium mediated transformation)和基因枪轰击法( particle bombardment transformation)是植物遗传转化的主要方法。两种方法各有优缺点．农杆菌介导法是一种天然的植物遗传转化系统,外源基因在转基因植物中的拷贝数低,遗传稳定性好;基因枪转化法不受材料基因型的限制。通过结合两种方法的优点,发展了3种农杆菌介导和基因枪轰击法相结合的遗传转化方法,分别为农杆枪法、基因枪轰击／农杆菌感染法、金粉或钨粉包裹菌体细胞作为微弹轰击法。对3种结合转化方法的技术途径、原理、转化受体及研究进展等方面进行了综述。     

基因枪法导入Bar基因后转化春小麦的幼胚因素

东北农业大学农学院曹颖、胡尚连、李文雄等鉴于基因枪技术不受宿主限制、转化周期短的优点和在单子叶植物遗传转化中广泛应用,他们用Bar基因转化小麦植株,即利用基因枪法将抗除草剂Bar基因导入春小麦东农7742,IE47和辽10,以培养20～22天的幼胚为受体,在80毫微克金枪粉量和6厘米的轰击距离下,基因枪发挥最佳的转化效果。其中有180个幼胚再生出12个植株,有3个呈GUS(基因)阳性,经PCR分析,检测到Bar基因,还证明用高金粉量可以提GUS基因瞬时表达。但金粉密度大,易成块、不能分散,单位面积上靶组织上金粉颗粒数量多,组织易受伤,影响抗性愈…     

单子叶植物RNA干扰和过表达Gateway载体的构建

基因枪和农杆菌介导的遗传转化是目前常用的两种单子叶植物遗传转化方法。载体的发展和改良是提高植物遗传转化效率的重要基础,RNA干扰载体和过表达载体是目前通过遗传转化研究植物基因功能的主要工具。Gateway克隆技术是一种基于lambda噬菌体特异位点重组特性的通用克隆技术,该技术可以将大批目的基因方便、快捷地连接到受体载体上。本文利用Gateway技术结合传统酶切、连接方法,构建了适用于单子叶植物基因枪和农杆菌转化的RNA干扰Gateway载体pAHC-PSK-RNAi、pClean-G185-RNAi和过表达Gateway载体pAHC-PSK-OE和pClean-G185-OE,为利用基因枪和农杆菌介导的遗传转化,在小麦和水稻等单子叶植物中进行规模化基因功能研究奠定了基础。     

基因枪在植物遗传转化中的应用

基因枪技术是近年发展起来的一项新的植物遗传转化技术,本文较为系统地介绍了基因枪的类型,以及它们各自的特点和工作原理,并对基因枪在植物遗传转化中的广泛用途作了重点介绍,文中引用用参考文献七十余篇,为进一步深入了解学科的最新研究进展提供了方便。     

三个方便实用的植物表达载体构建与验证

为满足植物功能基因组学研究及转基因安全性需要,本研究根据一些国内外引进或商业化的植物表达载体及其相关元件,构建了3个适合于植物,尤其是单子叶植物转化的表达载体,即p AH006、p WMB022和p WMB025。p AH006载体包含由玉米泛素ubi启动子调控的GUS基因和bar基因的完整T-DNA区域,此区段能够被酶切回收,可用于单子叶植物农杆菌介导转化效率评价及基因枪介导线状DNA转化效果研究;p WMB022载体携带由双35S启动子调控的玉米色素基因Lc和C1,可用作基因枪介导的共转化筛选标记,直观筛选含目标基因转基因材料;p WMB025载体携带由ubi启动子调控的、商业化转基因植物中广泛利用的EPSPS基因,可用于禾谷类作物农杆菌或基因枪介导的遗传转化,载体多克隆位点可通过酶切方式更换目标基因。酶切鉴定结合农杆菌或基因枪介导的小麦幼胚愈伤组织或叶片转化验证此3个载体表明,载体构建正确,其标记基因、可视化基因和报告基因均能正常表达。这3个载体的构建对于小麦等植物转化效率提升、安全型转基因作物获得和植物功能基因组学研究等具有重要意义。     

植物转基因方法概述

综述了植物基因转化的不同方法。植物基因转化方法主要包括直接基因转移和农杆菌介导的转化,直接基因转移又包括PEG介导、电激介导和基因枪方法。相比之下,农杆菌转化方法具有明显的优势;本文对其方法和机制作了较为全面的介绍。     

黍稷的名实考证及规范

黍稷是起源于中国最古老的作物,糯者为黍,粳者为稷。长期以来对黍稷的称谓一直不能统一,特别是对稷的称谓在农史界一直争论不休,难以定论。本文从黍稷的起源演化过程、细胞学和遗传学的研究、黍稷是人类最早驯化的作物、我国甲骨文和古农书的记载等方面,论证了黍稷的起源早于粟。并以此为据,进一步辩证了稷不是粟,同时指出将黍稷称为软糜和硬糜、糜黍、糜子、黍子等不同称谓的不足之处,进而认为以黍稷作为规范称谓为好。     

羚牛(Budorcas taxicolor)部分脏器特点的观察

本文对2只羚牛的雌性生殖器官及肝、肾、脾等脏器进行了形态描述,并与黄牛及羊的相应器官进行了比较,为探讨羚牛的分类地位提供了解剖学资料。     

马蹄香种子生物学特性研究

马蹄香的雌蕊子房半下位,心皮6枚,蒴果蓇葖状,果实成熟时沿腹缝线开裂。种子呈三角状倒椭圆形,其背面凸出,具明显横皱纹,腹面凹入。马蹄香种子由种皮、胚乳和胚三部分构成。种皮由多层细胞组成;核型胚乳,种子成熟时游离胚乳核形成胚乳细胞,而胚尚未分化,仍停留在原胚阶段。种子发芽试验表明,马蹄香种子萌发率极低,具有种子休眠的生物学特征。对马蹄香种子的化学成分作了分析研究,种子胚乳中富含营养物质,其中粗蛋白含量为17.3(g/100g)。此外,种子含有丰富的镁、锰、钙、铁、锌等矿质元素。     

临沂生生园复干银杏生长特性

产生复干是银杏个体发育过程中一个普遍现象。本研究以临沂生生园全国最大复干银杏群落为对象,采用每木检尺的方式对园内复干银杏进行调查。结果显示,生生园内银杏共385株,雌株379株,占98.41%;平均树高20.9m,总胸径0.93m,母干胸径0.33m,冠径在5.0-15.0m范围内,枝下高6.3m;17株无复干,复干率为98.58%,每株复干数平均为4.6个,最大复干高为12.5m,胸径0.18m,复干与母干距离为0.61m,复干与母干夹角为10.5?;34株无萌蘖,萌蘖平均株数为38株,萌蘖高1.11m,萌蘖与母干最大距离0.73m。该片银杏林原桩有240年历史,现存复干银杏系从原桩萌发形成,树龄53年。本文对生生园复干银杏的起源、性别比例、复干与银杏适应性的关系等进行了探讨。     

激光技术在农产品质量检测中的研究进展

近年来激光在农业领域得到广泛的应用和研究,其中的一个最新进展是将激光技术应用于农产品内部品质和安全性检测。本文介绍了农产品质量检测中的几种激光技术,包括应用激光的吸收与反射技术来检测农产品糖酸度、质地、PH值、成熟度、干物质等;应用激光诱导荧光技术来检测农产品的农药残留、叶绿素、成熟度;应用激光拉曼光谱技术来检测农产品水果损伤、农药残留。对农产品激光检测的未来发展趋势进行了探讨和展望。     

Proteolipid protein 2 mRNA is expressed in the rabbit embryo during gastrulation

The expression pattern of the receptor tyrosine kinase gene EphB3 was examined during the early stages of chick embryogenesis, and is described in this report. In the gastrula, EphB3 is expressed in epiblast cells adjacent to and entering the anterior portion of the primitive streak; expression is extinguished once cells have ingressed. At headfold stages, EphB3 is strongly transcribed in the floor of the foregut and in anterior lateral endoderm, and is expressed in the subjacent cardiogenic mesoderm. EphB3 is transiently expressed in the lateral ectoderm, neural tube, and neural crest during these stages. Later neural expression is localized to the mesencephalon. In the somitic mesoderm, EphB3 is initially expressed in the sclerotome, but later is expressed predominantly in the dermatome. Prominent expression is also detected in the developing heart, liver, posterior ventral limb bud mesenchyme, pharyngeal arches, and head mesenchyme.     

糖、糖、“糖”——什么是糖?

糖类是自然界中最常见的一类生物分子,但是糖类因不同的人群可以有三种不同的理解.一是科学上的糖类,二是生活中的糖类,三是作为甜味剂的"糖"类.因为甜味是一个生理上的感觉,凡能与甜味受体相互作用的均是甜味剂,其中有些是糖的"糖",也有不是糖的"糖".     

丹麦森林土壤反硝化作用的动力学分析

本项研究将乙炔和氯霉素抑制技术结合起来 ,对丹麦一森林土壤的反硝化作用进行了研究 ,并考察温度对其还原酶活性的影响 .反硝化还原酶活性和合成过程受O2 的抑制 ,厌氧培养时 ,需要一定时间消耗系统中残余的O2 来解除这种抑制作用 .在无抗生素抑制蛋白质合成时 ,硝酸还原酶只有少量合成 ,而N2 O还原酶却显著地诱导产生 .这一结果对土壤吸收N2 O能力的研究具有重要意义 .在各处理下 ,系统中未发生亚硝酸盐的明显积累 ,表明亚硝酸还原酶活性大于硝酸还原酶 .外加葡萄糖加速了反硝化作用 ,并能促进酶的合成和消除还原过程中的电子竞争 .供试土壤表现出很强的厌氧呼吸作用 ,并受外加C源的促进 .反硝化作用的活化能低于土壤厌氧呼吸的活化能 ,因此反硝化作用的Q1 0值较低 ,CO2 和N2 O的产生比例随温度升高而加大 .     

Two types of hormone-responsive adenylate cyclase in the rat liver

We have demonstrated the existence of two types of hormone-responsive adenylate cyclase in the isolated perfused rat liver. One, less abundant, is linked to glycogenolysis and the other is not. Glucagon stimulates mainly the glycogenolysis-linked fraction and, to a lesser extent, the fraction which is not linked to glycogenolysis. The suppressive effect of insulin is specific for the glucagon-responsive adenylate cyclase and is inhibited by 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX). However, this mechanism can explain only partly the ability of insulin to suppress glycogenolysis, and is not observed when cAMP is increased sufficiently by glucagon. Secretin-responsive adenylate cyclase is not linked to glycogenolysis and is suppressed specifically by oxymetazoline. The capacity of this suppressive effect is large and not inhibited by IBMX. These results suggest that there is a functional compartmentalization of cAMP within the hepatocyte or among hepatocytes.     

Is NO the king? Pathophysiological benefit with uncertain clinical impact

NO is the "hero" molecule of the last few decades. It is a ubiquitous and omnipotent radical with both hemodynamic and antiproliferative effects within the cardiovascular system. NO is an important counterregulatory factor for vasoconstrictors and growth promoting substances. Endothelial dysfunction with decreased NO production is related to many cardiovascular disorders, such as coronary artery disease, heart failure and hypertension. Despite the important role of NO within the circulation, there is only limited evidence in the form of large clinical trials that NO delivery can reduce cardiovascular morbidity and mortality. Thus, NO donors are not in the first line therapy in ischemic heart disease, heart failure or arterial hypertension and NO delivery is recommended only in particular clinical situations, when a well established treatment is contraindicated or has an insufficient effect. It is concluded that the insufficient NO production is the principal disorder in endothelial dysfunction, which is related to cardiovascular pathology with deteriorated prognosis, but the impact of therapeutically increased NO bioactivity on the morbidity and mortality is inferior to well established treatment with ACE-inhibitors, AT(1) receptor blockers, beta-blockers, statins and certain antihypertensive drugs. There is little doubt that NO is king in the circulation, but kings seldom decide the battles.