临床酵母样真菌的感染特点及耐药性研究

目的了解临床酵母样真菌的感染类型、分布以及耐药情况,为临床诊断治疗提供合理的用药依据.方法采用常规方法进行真菌培养,用科玛嘉显色培养基联合法国生物梅里埃API 20C AUX鉴定条进行鉴定,药敏试验采用微量稀释法.结果864株酵母样真菌中,白色念珠菌619株（71.6%）,其次为热带念珠菌116株（13.4%）和克柔念珠菌47株（5.4%）,非白色念珠菌感染的比例逐年上升（21.5%）.其中,呼吸道标本酵母样真菌检出率最高,达79.7%,其次是消化道为8.8%,泌尿道为4.7%.科室分布依次为干部科、呼吸科、急诊内科、血液科等;白色念珠菌对两性霉素B、5-氟胞嘧啶高度敏感,达90%以上,对氟康唑和伊曲康唑的敏感性有所降低.结论酵母样真菌的检出率与患者基础疾病密切相关;对氟康唑等药物的敏感性有下降的趋势,未发现对4种药物同时耐药的菌株,提示在治疗中,药敏监测是非常必要的.     

北京医院侵袭性酵母菌的感染分布及耐药性分析

目的调查北京医院2012～2013年及2016～2017年侵袭性酵母菌的感染分布情况及耐药情况。方法对临床检出侵袭性酵母菌进行菌株收集和统计,采用科马嘉显色培养基、API20C AUX和VITEK-2 Compact YST卡进行菌种鉴定及药物敏感试验,同时用质谱对所有菌株进行复核鉴定。其中真菌药敏试验采用ATB FUNGUS 3酵母样真菌药敏试剂盒(微量稀释)。结果 2012～2013年我院共检出侵袭性酵母菌62株,其中白念珠菌36株,占比58.06%;光滑念珠菌17株,占比27.41%;近平滑念珠菌5株,占比8.06%;热带念珠菌3株,占比4.83%;其他念珠菌1株,占比1.60%。2016～2017年我院共检出侵袭性酵母菌43株,其中白念珠菌21株,占比48.83%;光滑念珠菌11株,占比25.58%;近平滑念珠菌6株,占比13.95%;热带念珠菌5株,占比11.63%。真菌药物敏感结果显示白念珠菌、光滑念珠菌及热带念珠菌对5-氟胞嘧啶存在不同程度的耐药性。2016～2017年侵袭性酵母菌未发现菌株耐药。结论白念珠菌在我院侵袭性酵母菌感染中占主导地位,虽然近年来我院侵袭性酵母耐药情况有所好转,但仍需进一步做好真菌药物敏感性研究。     

阴道分泌物酵母样真菌分离培养及其药敏的临床价值

目的了解阴道分泌物酵母样真菌的分离培养及其药敏临床意义。方法从阴道分泌物中分离到的196株酵母样真菌,采用API-20Aux和ATBFUN GUS进行鉴定和药敏试验,所得结果进行统计分析。结果196株酵母样真菌中,分离率最多的前3种是白色念珠菌（80．5％）、葡萄牙念珠菌（9．5％）和光滑念珠菌（5．6％）,酵母样真菌对两性霉素B和制霉菌素敏感率最高,达94．5％和92．6％,5-氟胞嘧啶、咪康唑、益康唑和酮康唑只有43．6％～58．1％。结论真菌性阴道炎主要以白色念珠菌感染为主,感染的酵母菌除了对多烯类药物敏感率高外,对其他抗真菌药有不同程度的下降,应引起关注。     

150例酵母样真菌的菌种分布及其耐药性分析

目的分析引起医院酵母样真菌感染的菌种分布及其耐药性,以指导临床合理用药。方法对2007年10月-2008年10月的住院患者送至真菌室所分离的150株酵母样真菌,采用血清学鉴定及API 20C AUX酵母样真菌鉴定试剂条进行鉴定,采用ATB FUNGUS3进行药敏试验。结果分离到150株酵母样真菌,其中自假丝酵母菌94株（62．67％）,光滑假丝酵母菌14株（9．33％）,热带假丝酵母菌12株（8．00％）,无名假丝酵母菌10株（6．67％）,季也蒙假丝酵母菌6株（4．00％）,近平滑假丝酵母菌6株（4．00％）,其他酵母菌8株（5．33％）。以呼吸内科（54．67％）、老年科（9．33％）、皮肤性病科（9．33％）、血液科（8．67％）分离率最高。150株酵母菌对5氟胞嘧啶（5-FC）、两性霉素B（AmB）、氟康唑（FCA）、伊曲康唑（ITR）、伏立康唑（VRC）的敏感菌株分别为144、150、131、104、147株,敏感率分别为96．00％、100％、87．33％、69．33％、98．00％。结论真菌感染的因素有很多,临床分布科室广泛,临床上应重视真菌检测及真菌药敏试验,根据检测结果合理应用抗真菌药物。     

国内首例皮瘤丝孢酵母真菌血症分离株的表型及rDNA序列鉴定

目的通过对1例“脂膜炎”患者外周血分离株的表型及分子生物学鉴定,报道国内首例皮瘤丝孢酵母菌血症。方法采集患者的血及鼻咽结节组织标本通过真菌培养获得分离株,经沙氏培养基、马铃薯培养基、科玛嘉念珠菌显色培养后形态学观察及API 20C AUX系统鉴定,最后经PCR扩增rDNA基因测序证实。采用CLSI制定的M27-A2微量稀释法对病原菌株进行7种药物的体外药敏试验。结果分离株通过表型和分子生物学鉴定为“皮瘤丝孢酵母”。药敏结果显示菌株对两性霉素B耐药,氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、5-氟胞嘧啶敏感。卡泊芬净的抑菌浓度较低,而米卡芬净的抑菌浓度相对较高。患者因多种并发症死亡。结论皮瘤丝孢酵母引起的真菌血症为我国首例报道。API 20C AUX酵母鉴定系统可作为鉴定皮瘤丝孢酵母快速而简便的方法。通过分子生物学DNA序列检测分析能鉴定皮瘤丝孢酵母。     

酵母样真菌快速分型诊断

为进一步解决感染酵母样真菌病患者的早期诊断和治疗,我们采用了一种快速,简便,准确鉴定和分类酵母样真菌的方法－纸片法,同时对纸片法与传统的方法（生长图谱法）进行了比较。２１７株酵母样真菌的鉴定结果准确率达１００％,其中白念珠菌检出率最高１５５株占７１．４２％,为最常见菌,其次是热带念珠２０株占９．２２％,其它四种念珠菌１６株占７．３７％,还有分类及种未定酵母菌２６株占１１．９８％。以上观察结果其检出     

酵母样真菌感染的菌型分布及药敏试验分析

目的:调查酵母样真菌在临床标本中的菌型分布情况;了解临床常见真菌对常用抗真菌药物的敏感性,为临床使用抗真菌药提供依据.方法:按<临床检验操作规程>进行菌株分离和鉴定;对分离的菌株用法国生物梅里埃公司生产的ATBFUNGUS抗真菌药物敏感性试剂盒进行药敏试验.结果:共检出酵母样真菌256株,其构成比:白色念珠菌161株(62.88%)、热带念珠菌58株(22.8%)、高里念珠菌12株(4.69%)、酵母菌10株(3.91%),未定型7株(2.73%);91株酵母样真菌药敏结果:5-FC敏感率95.6%、AmB 100%、NYS 93.4%、MIZ 80.2%、ECO 81.3%、KET 84.6%.11株MIZ耐药株,2株同时耐ECO与KET,9株为ECO中介、8株为KET中介,15株耐药株有10株为热带念珠菌.结论:引起深部真菌感染的酵母样真菌种类日渐增多,其中以白色念珠菌为主;大部分酵母样真菌对抗真菌药敏感,咪唑类药物有交叉耐药,多数热带念珠菌有耐药性.因此,酵母样真菌的菌种鉴定及药敏试验对临床深部真菌感染的防治具有重要的意义.     

酵母样真菌快速分型诊断

为进一步解决感染酵母样真菌病患者的早期诊断和治疗,我们采用了一种快速、简便、准确鉴定和分类酵母样真菌的方法——纸片法,同时对纸片法与传统的方法(生长图谱法)进行了比较。217株酵母样真菌的鉴定结果准确率达100％,其中白念珠菌检出率最高155株占71.42％,为最常见菌,其次是热带念珠20株占9.22％,其它四种念珠菌16株占7.37％,还有分类及种未定酵母菌26株占11.98％。以上观察结果其检出率和国内外报道的资料相似。我们认为用纸片法鉴定酵母样真菌,操作过程简单易行、费用低廉、准确快速,可尽早为临床提供治疗依据。     

临床标本中酵母样真菌的分离鉴定和药敏结果分析

目的调查目前临床标本中酵母样真菌感染现状及耐药性情况。方法常规分离临床标本中的酵母样真菌,用科玛嘉显色培养基及法国生物-梅里埃API20CAUX鉴定系统鉴定菌种,并用K—B法进行药敏试验。结果研究期间共分离到193例有临床意义的酵母样真菌,检出率较高的依次为白假丝酵母菌（62．7％）,热带假丝酵母菌（20．2％）,光滑球拟酵母菌（9．3％）。在6种抗真菌药中,对伊曲康唑、氟康唑的耐药率增高。结论近年来由酵母样真菌感染引起的疾病及其对常用抗真菌药物的耐药率有明显增加,应加强真菌的检测和耐药性监测工作,以指导临床合理使用药物。     

深部真菌感染的微生物学诊断与防治研究

用简单、快速的念珠菌分类鉴定法对657例不同患者标本进行了鉴定,结果121例分得真菌,阳性率18.24％。分得真菌153株,其中酵母样真菌97株,占63.4％;曲霉23株,占15.03％.酵母样真菌97株中念珠菌83株,占酵母样真菌的85.57％。念珠菌中又以白色念珠菌为主,其次为热带念珠菌、克柔氏念珠菌。深部真菌感染∞％以上是由念珠菌引起的。用ELISA和GC法检测念珠菌感染患者血清中Mn—Ag,结果表明患者血清中Mn—Ag浓度明显高于正常人,用念珠菌感染动物后24h,在血清中可测到Mn—Ag,是一个早期快速、特异诊断念珠菌血行播散的方法。丁香、黄连、桂皮、木香对真菌有抑杀菌作用。真菌感染与应用抗生素、激素的数量及时间密切相关。     

MALDI-TOF-MS技术在酵母样真菌鉴定中的临床应用评价

目的评价基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time Of FlightMass Spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术对酵母样真菌鉴定的临床应用价值。方法将2015年6月~2016年6月临床检出的142株酵母样真菌标本同时采用MALDI-TOF-MS技术和传统真菌培养方法进行鉴定,记录结果并对结果进行对比分析。结果两种方法对于常见的白念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌和新生隐球菌的鉴定率很高(100%),符合率较高(100%);对于少见的葡萄牙念珠菌、解脂念珠菌、产朊念珠菌,两种方法的符合率较低,分别为25.00%、00.00%、00.00%。结论 MALDI-TOF-MS技术对酵母样真菌的鉴定率较高,操作简便快速,是传统真菌培养鉴定的有力补充,可将其推广应用于酵母样真菌的早期快速鉴定。     

297例浅部真菌病临床及病原菌菌种分析

目的 探讨皮肤浅部真菌病致病真菌菌种的构成.方法 对297例真菌涂片阳性和培养阳性的浅部真菌病患者,取标本进行分离培养及菌种鉴定,培养阳性标本在形态学上不能准确鉴定的,进行梅里埃API 20C AUX酵母菌鉴定试剂盒或核糖体DNA （rDNA） ITS区序列测定,确切鉴定菌种.使用SPSS 17.0统计软件对于结果进行统计分析.结果 共分离培养出致病菌13种,其中红色毛癣菌86株（29.0％）,须癣毛癣菌68株（22.9％）,念珠菌属59株（19.9％）,暗色真菌属13株（4.4％）,曲霉菌属13株（4.4％）,红酵母菌12株（4.0％）,青霉菌属9株（3.0％）,毛霉菌9株（3.0％）,犬小孢子菌5株（1.7％）,浅白隐球菌3株（1.0％）,毛孢子菌属2株（0.7％）,絮状表皮癣菌1株（0.3％）,混合感染17株（5.7％）.结论 本地区浅部真菌病以甲癣为主,主要致病真菌是红色毛癣菌,但其他种类真菌感染尤其是念珠菌属有明显上升趋势.     

福建地区94例女性阴道念珠菌感染分离株分型研究

目的 对福建地区临床阴道分泌物分离出的（94株）念珠菌菌株进行分类鉴定,并通过分子生物学及API试验分析传统科玛嘉分类方法的准确性.方法 ①通过科玛嘉显色培养基鉴定菌种,并观察菌株显微镜下形态学表现.②通过ITS区段分子生物学序列分析进行菌种鉴定.③将科玛嘉试验与ITS区段序列分析结果与化验室检验报告结果对比,将鉴定差别菌株进一步行API试验及LSU区段序列分析.结果 ①94株念珠菌经鉴定结果为白念珠菌78株、光滑念珠菌10株、近平滑念珠菌3株、热带念珠菌1株、酿酒假丝酵母菌1株及其中1株为光滑念珠菌及近平滑念珠菌混合感染.②科玛嘉试验可良好的鉴定念珠菌,但对于少见菌种（如酿酒假丝酵母菌）仍缺乏特异性.③一般化验室通过简单菌落形态学及简易科玛嘉检测鉴定仍存在一定误差率（10/94）.④分子生物学方法鉴定菌种准确性高,且可从基因序列分析中鉴定包含C.parapsilosis sensu strico,Candida metapsilosis以及Candida orthopsilosis的近平滑念珠菌复合体菌种.结论 福建地区女性外阴感染的菌种仍以白念珠菌为主,但非白念珠菌的感染也占据相当的比例（16/94）,而在检测方法上,分子生物学技术较科玛嘉试验更能准确的鉴定念珠菌菌种.     

BD Phoenix^TM酵母菌鉴定板对临床分离酵母菌鉴定能力的评估

目的 评估BD Phoenix^TM酵母菌鉴定板对酵母菌的鉴定能力.方法 选取白念珠菌18株,热带念珠菌22株,光滑念珠菌19株,克柔念珠菌8株,近平滑念珠菌20株,新生隐球菌14株,季也蒙念珠菌4株,平常念珠菌1株,葡萄牙念珠菌1株,头状地霉2株,挪威念珠菌1株,链状念珠菌1株,乳酒念珠菌1株,希木龙念珠菌1株,解脂念珠菌3株,皱褶念珠菌1株,菌膜念珠菌3株,共计120株.借助Phoenix^TM 100全自动微生物鉴定仪,使用BD Phoenix^TM酵母菌鉴定板鉴定上述菌株.用真菌通用引物ITS1与ITS4对所有受试菌株的rDNA进行PCR扩增,对PCR产物进行序列测定、分析并作为金标准与BD Phoenix^TM酵母菌鉴定板的结果比较,同时使用MALDI-TOF MS质谱分析对试验菌株进行菌种鉴定.结果 BDPhoenix^TM酵母菌鉴定板除了对1株挪威念珠菌、1株平常念珠菌、1株解脂念珠菌、1株皱褶念珠菌未能鉴定以及1株链状念珠菌、1株克柔念珠菌、2株菌膜念珠菌、1株解脂念珠菌鉴定错误外其余试验菌株鉴定均正确,鉴定准确率为92.5％.所有鉴定结果均在17 h内获得,而白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌的鉴定时间均小于6h,并且不受推荐培养基的限制.所有菌株MALDI-TOF MS的鉴定结果与其rDNA ITS序列分析的结果完全一致.结论 BD Phoenix^TM酵母菌鉴定板对多数酵母菌能够快速准确地鉴定到种,但对某些少见酵母菌的鉴定能力有待进一步考证.     

妇科住院患者酵母样真菌感染的菌株分布与药敏研究

目的对妇科住院患者阴道分泌物酵母样真菌隐性感染的菌群分布与药敏结果进行回顾性分析,为临床围手术期合理使用抗真菌药物提供依据。方法妇科住院患者5813例阴道分泌物中分离到396株酵母样真菌,采用API-20Aux和ATBFUNGUS进行鉴定和药敏试验。结果396株酵母样真菌中,分离率最高的前3位是白色假丝酵母菌（59.6%）、光滑假丝酵母菌（21.2%）和接合假丝酵母菌（6.6%）。酵母样真菌对5-氟胞嘧啶（5-FC）、两性霉素B（AMB）和制霉菌素（NYS）敏感率最高,达90.7%、92.7%和96.2%,咪康唑（MIC）、益康唑（ECO）和酮康唑（KET）分别为74.2%、61.6%和69.4%。结论住院妇科患者阴道分泌物酵母样真菌隐性感染主要以白色念珠菌和光滑念珠菌为主,感染的酵母样真菌对5-FC、AMB和NYS的药物敏感性较高,对唑类抗真菌药则有不同程度的耐药率。     

河北地区侵袭性酵母样真菌的菌株分布及药敏分析

目的调查河北地区16家三级教学医院侵袭性酵母样真菌的菌株构成、分布及其体外药敏特点,为临床抗真菌药物的合理应用提供依据。方法收集河北地区2016～2017年侵袭性酵母样真菌感染患者的菌株,对菌种构成进行分析,采用Sensititre YeastOne显色药敏板对9种抗真菌药进行药敏试验。结果共检出侵袭性酵母样真菌260株,其中白念珠菌是最主要的致病菌,占42.31%;非白念珠菌占57.69%,主要包括热带念珠菌19.23%、近平滑念珠菌18.08%和光滑念珠菌9.23%。白念珠菌对氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑的耐药率分别为2.8%、1.9%和0.9%;热带念珠菌对氟康唑和伏立康唑的耐药率均为12.8%;近平滑念珠菌复合体对氟康唑和伏立康唑的耐药率分别为14.9%和10.6%;白念珠菌、热带念珠菌和近平滑念珠菌复合体对棘白菌素类抗菌物的耐药率几乎0%。结论侵袭性酵母样真菌感染中最常见的是白念珠菌感染,但是非白念珠菌感染已经超过50%。白念珠菌对抗真菌药物仍然有较高的敏感性,但对唑类药物的敏感率在不同种的念珠菌中存在差异。棘白菌素类对白念珠菌、热带念珠菌和近平滑念珠菌有很高的抗菌活性。     

118株口腔致病念珠菌病原学特征及药敏结果分析

目的调查分析临床致病口腔念珠菌菌种分布及对氟康唑、伊曲康唑、制霉菌素、5-氟胞嘧啶和酮康唑的药物敏感性,以提供临床用药依据。方法收集口腔真菌感染患者标本,常规涂片镜检、培养,对酵母样生长菌落用生物梅里埃公司API20AUX进行菌种鉴定。对其中的念珠菌进行药敏分析。结果共收集141例临床口腔真菌病标本,其中118株念珠菌中,白念珠菌87株（73.7%）,热带念珠菌15株（12.7%）,高里念珠菌6株（5.1%）,光滑念珠菌4株,其他念珠菌6株。口腔念珠菌对氟康唑、伊曲康唑、制霉菌素、5-氟胞嘧啶和酮康唑的耐药率分别为5.1%、1.7%、0%、3.4%、5.1%。结论解放军324医院口腔真菌感染主要为长期应用抗生素的老年患者。口腔念珠菌病仍以白念珠菌为主,对常用抗真菌药物呈不同程度的耐药,应进行真菌常规菌种鉴定及药敏试验。     

连续5年无菌体液标本中分离真菌的鉴定及药敏分析

目的回顾性调查2002-2006年华西医院住院患者无菌体液标本真菌培养的情况,分析真菌菌种及其耐药特点,为临床诊断、治疗提供参考。方法标本接种沙堡弱培养基进行分离培养,采用科马嘉念珠菌显色培养基（CHRO-Ma-gar）和API-20CAUX鉴定系统结合形态学进行菌种鉴定,使用念珠菌药敏试条（ATB-Fungus 2）对2006年来自血液标本中的真菌进行药敏试验。结果2002-2006年间检出的阳性样本数依次为7株、22株、39株、32株及57株;血液来源73株,清洁中段尿来源59株,是主要样本来源;分离真菌以白念珠菌和热带念珠菌为主,占70%以上;2006年血培养中共分离出16株念珠菌,体外药敏情况详见文中。结论临床无菌体液标本中真菌的检出率有逐年上升的趋势;菌株以白念珠菌和热带念珠菌为主,同时近平滑念珠菌、克柔念珠菌、光滑念珠菌、马尔尼菲青霉菌等菌株也有出现;样本来源以血液、清洁中段尿为主;体外药敏总体耐药率低,但是逐渐出现了对氟康唑耐药的白念珠菌和热带念珠菌,应引起高度重视。     

特康唑对常见念珠菌的体外敏感性试验

目的：研究特康唑对重度念珠菌性阴道炎常见念珠菌的体外敏感性。方法菌株分离自上海交通大学医学院附属仁济医院、上海市第六人民医院、上海市第一妇婴保健院妇科门诊外阴阴道念珠菌病（ VVC）患者的阴道分泌物。所有菌株均经念珠菌显色培养基（ CHROMagar Candida）、API 20C AUX鉴定,并采用CLSIM27?A3肉汤微量稀释法对213株临床分离念珠菌作了特康唑、克霉唑、咪康唑3种抗真菌药物敏感性测定。结果213株菌株经鉴定为白念珠菌192株（90．14％）,光滑念珠菌21株（9．86％）。特康唑对192株白念珠菌的MIC范围：0．024～12．5μg／mL,MIC50：0．39μg／mL,MIC90：1．56μg／mL,GM：0．248μg／mL;特康唑对19株光滑念珠菌的MIC范围：0．024～1．56μg／mL,MIC50：0．049μg／mL,MIC90：1．56μg／mL,GM：0．107μg／mL。结论目前阴道念珠菌病的病原菌仍以白念珠菌为主,并提示特康唑与克霉唑、咪康唑3种药物对213株念珠菌均具有良好的敏感性,特康唑对白念珠菌及光滑念珠菌有较强的抑制作用并未发现有耐药现象。     

727株真菌失发布与药敏分析

目的 对727株真菌的分布及药敏试验进行分析。方法 用沙保罗培养基分离培养真菌,用API20CAUX生化鉴定及SATBFUNGUS药敏板。结果 727株真菌中白色念珠菌438株,热带念珠菌155株,光滑念珠菌73株,近平滑念珠菌23株,新型隐球菌15株。5－H氟胞嘧啶、两性毒素B、制霉菌素、咪康唑、益康唑和酮康唑的敏感率分别为92．0％、97．6％、94．6％、56．3％、62．9％和70．4％,结论真菌感染仍然以白色念珠菌为主。两性霉素B、制需菌素和一氧胞密啶敏感率较高,而咪康唑、益康唑和酮康唑均出现不同程度的耐药,且呈上升趋势,这需要临床慎选针对性强且副作用低的药物,减少耐药菌株出现。